梅毒患者血清TRUST滴度和CRP水平与临床分期的关系*

李永生，陈家强，谢筱颖，陈凯婷

(佛山市第三人民医院检验科，广东佛山 528000)

梅毒是临床上常见的一种慢性、系统性性疾病，由梅毒螺旋体感染所致，I期者主要累及生殖器皮肤，Ⅱ期者可累及躯干皮肤，Ⅲ期者可累及多个脏器，不同临床分期的治疗方法存在差异[1]。目前，梅毒甲苯胺红不加热血清试验(toluidine red unheated serum test，TRUST)是临床上诊断梅毒最常用方法之一，且具有良好的诊断效能，而其滴度在不同临床分期中虽存在差异，但其对临床分期的效能低[2]。而有研究表明，C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)是机体内常见的一种急性时相反应蛋白，在机体受感染或组织损伤时，其血液水平可急剧上升，并与疾病的发生发展有关[3]。对此，本研究通过对梅毒患者进行TRUST滴度、血清CRP水平检测，探讨二者与患者临床分期的关系，为指导临床治疗提供依据，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选取2013年12月～2016年12月本院确诊的梅毒患者200例，纳入标准：①经临床症状、病史、实验室、血尿常规、血清学等检查证实为梅毒[4]；②年龄18～70岁，TRUST滴度阳性且在1∶2及其以上；③患者或其家属签署知情同意书；④无精神病病史。排除标准：①妊娠期、哺乳期女性或有肿瘤者；②检查前1个月内无抗炎、抗感染、免疫、糖皮质激素等治疗史；③有心、肝、肾等严重性疾病和高血压、糖尿病等；④拒绝或中途退出本次研究。本次研究经本院伦理委员会审批且通过，依据临床分期分为I期组(n=90例)、Ⅱ期组(n=70例)和Ⅲ期组(n=40例)，所有资料来源均真实可靠，其中I期组：年龄19～62岁，BMI值19.45～30.82 kg/m2，Ⅱ期组：年龄20～63岁，BMI值19.32～30.91kg/m2，Ⅲ期组：年龄21～64岁，BMI值19.37～30.75kg/m2，三组患者在年龄、BMI，性别、婚姻上比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 三组一般资料比较

1.2 试剂和仪器 TRUST试剂盒购自上海荣盛生物技术有限公司，CRP试剂盒购自上海科华生物工程股份公司，全自动加样仪购自瑞士帝肯公司，75-2型微量搅拌仪购自上海医用分析仪器厂，日立7800全自动生化分析仪购自上海曼普生物科技有限公司。

1.3 方法 ①检测方法，所有患者给予TRUST检查，即抽取左上臂静脉血3 ml置入无菌试管中，行常规血清分离(3 000 r/min，12 min，离心半径8 cm)后，通过全自动加样仪吸取50 μl血清样本放在直径为18 mm圆圈的卡片圆圈中央并均匀地涂布在整个圈内，吸取TRUST抗原液轻轻摇匀后用9号针头(60滴/ml)加一滴抗原并置于75-2型微量搅拌仪上旋转8 min(100±2 r/min)后在亮光下观察结果；再取50 μl血清样本通过日立7800全自动生化分析仪采用酶联免疫吸附法检测血清CRP水平，统计分析所有患者TRUST滴度、临床分期、血清CRP水平；②评估标准，TRUST滴度标准[5]为，圆圈内仅见甲苯胺红颗粒集中于中央一点或均匀分散(未产生凝集反应)为阴性，圆圈内出现小的黑色絮状物且液体浑浊(产生凝集反应)为阳性，并记录其扩散情况(主要记录1∶2～1∶32)，CRP正常值为0～10 mg/L[6]。

2 结果

2.1 三组TRUST滴度、血清CRP水平比较 见表2。

表2 三组TRUST滴度、血清CRP水平比较

注：与I期组比较aP<0.05；b与Ⅱ期组比较P<0.005。

在TRUST滴度分布方面，I期组和Ⅲ期组主要分布在1∶4和1∶8，Ⅱ期组主要分布在1∶8和1∶16，I期Ⅱ期Ⅲ期组平均值为1∶(6.87±3.41)，1∶(11.97±3.78)，1∶(7.54±3.52)，三组比较差异有统计学意义(χ2=16.571，13.247；t=8.948，6.060；F=22.142，35.576，均P<0.05)，但I期组和Ⅲ期组间差异无统计学意义(P>0.05)，TRUST滴度与患者临床分期呈“∩”型分布关系；在血清CRP水平方面，Ⅱ期组明显高于Ⅲ期组和I期组，I期组明显高于Ⅲ期，差异均有统计学意义(t=29.546，22.213，40.171，F=68.790，均P<0.05)，三组均大于正常临界值(10 mg/L)，但Ⅲ期组接近正常临界值，血清CRP水平与患者临床分期呈“∩”型分布关系。

3 讨论

梅毒是一种由苍白(梅毒)螺旋体引起的性传播疾病，主要通过性途径传播，也可通过母婴途径传播，其危害性仅次于艾滋病，严重者可导致死亡的发生，且近年来其在我国发病率逐年增加，年龄覆盖率广泛，故如何有效诊治梅毒具有重要的临床价值[7]。目前，梅毒的筛查诊断方法有多种，其中TRUST是较为常用的方法，且随着医疗技术的发展与成熟，其具有操作简单、检出迅速的特点，准确率可高达90%以上[8]。徐敬轩等[9，10]研究显示，梅毒临床表现复杂，几乎可侵犯和损伤全身各器官，在发生发展过程中，细胞免疫和体液免疫均部分参与并协同发挥抵抗再感染、保护机体等作用，但梅毒可引起不同程度的免疫抑制，提示其临床治疗应依据病情开展。也有研究表明，梅毒螺旋体早期感染时，机体免疫功能正常，可对其作出正常的免疫反应并予以有效清除，但未被清除的梅毒螺旋体可引起炎症免疫反应而损伤机体内多组织、器官，随着病情进展，可能会损害免疫系统而造成免疫功能低下，导致机体免疫抑制的出现[11，12]。而有研究表明，TRUST可通过检测梅毒螺旋体感染人体后作出免疫应答时所产生抗类脂质抗原的抗体(反应素)，而有效评估梅毒的感染情况，在临床分期中也具有一定的鉴别效能[13]。而也有研究表明，C反应蛋白是一种由肝脏合成、分泌的急性时相反应蛋白，可激活补体和加强吞噬细胞的吞噬而起调理作用，在机体的天然免疫过程中发挥重要的保护作用，其水平变化可有效反映机体的炎症免疫状态[14，15]。

本研究通过对患者进行TRUST滴度检测，发现三组TRUST滴度分布及血清CRP水平差异均有统计学意义，此结果与Soeiro等[12，13]的研究结果基本相同，表明TRUST滴度与患者临床分期有关。这可能是由于I期患者的病情较轻，其体内梅毒螺旋体并未大量增殖，且患者机体免疫功能尚且正常，仍能够有效对梅毒螺旋体表面的脂质作出免疫应答并激活人体产生磷脂自身抗体及细胞免疫系统[16]，产生了相应的反应素，并激活了巨噬细胞释放白介素-1、刺激了肝细胞产生CRP，故机体内反应素少而表现为TRUST滴度低、炎症免疫反应轻而表现为CRP水平低；但随病情进展至Ⅱ期，可能由于患者的自身免疫作用未能够有效灭杀梅毒螺旋体而导致其能够大量增殖，并引起了更剧烈的免疫应答[17]，使反应素的产生增多和炎症免疫反应增强，进而导致TRUST滴度、血清CRP水平上升；而随着Ⅲ期患者病情的加重，上述病理生理变化更严重，炎症免疫反应可能损伤机体内多组织、器官，导致免疫功能受损，机体的免疫系统防御能力下降[18]，进而使免疫应答减少，导致反应素产生下降和炎症免疫反应减弱，故表现为Ⅲ期组TRUST滴度、血清CRP水平低于Ⅱ期组。此外，研究发现I期组和Ⅲ期组TRUST滴度分布基本相同，表明TRUST滴度分布在患者不同临床分期中存在重叠，这可能是由于反应素的出现较慢(约3～4周)，且随着免疫抑制现象的出现[19]，反应素的产生可能会轻度下降至I期水平，导致其鉴别效能下降。同时，研究中I期组明显高于Ⅲ期，且Ⅲ期组接近正常临界值(10 mg/L)，提示血清CRP水平与患者临床分期关系密切，这可能是Ⅲ期组患者免疫受抑制后，其炎症免疫反应也随之下降，而CRP为急性时相反应蛋白，其能够迅速对该反应作出相应的生理变化[20]，因此其能够有效评估患者的临床分期。

综上所述，TRUST滴度分布在梅毒TRUST滴度阳性患者不同临床分期中存在重叠，而血清CRP水平与患者临床分期关系密切，提示其对指导临床治疗具有重要的参考作用。