ApoE基因多态性与高脂血症患者血脂代谢的关系

刘慧方

（梅州市人民医院检验科，广东 梅州 514000）

血脂水平与载脂蛋白E（apolipoprotein E，Apo E）基因多态性存在相关性，与冠心病和动脉粥样硬化的发生密切相关[1]。ApoE基因位于19号染色体，具有明显的基因遗传多态性，有3种主要的异构体即E2、E3、E4，其分别由1个基因位点的3个等位基因ε2、ε3、ε4编码。在普通人群中存在 6 种基因型：3 个纯合子（E2/ E2、E3/ E3、E4/ E4），3 个杂合子（E2/ E3、E2/ E4、E3/ E4）。按组分为E2型（E2/E2，E2/E3）、E3型（E3/ E3，E2/ E4）、E4型（E3/E4，E4/E4）。本研究通过对ApoE基因多态性和血脂水平变化的研究，以探讨针对ApoE基因型变化而制定个体化治疗方案。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2016年1—12月梅州市人民医院高脂血症患者总胆固醇（total cholesterol，TC）、甘油三脂（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）其中一项异常增高的142例，其中男100例、女42例，年龄45～86岁。排除合并周围血管疾病或周围血管栓塞性疾病者、大动脉炎、血液病 、结核 、恶性肿瘤、严重肝肾功能不全、入院前1周内使用降脂药物者。

1.2 仪器与试剂

DNA提取试剂盒购自北京天根公司，TC-96型PCR仪购于杭州博日科技有限公司，MK100-2A型杂交仪及ApoE基因型检测试剂盒（基因芯片法）购自珠海赛乐奇生物技术有限公司，AU5400全自动生化分析仪购自日本奥林巴斯公司，TC、TG、LDL-C检测试剂盒购自北京中生北控生物科技股份有限公司。

1.3 方法

抗凝血标本采用乙二胺四乙酸二钾抗凝，用于ApoE基因分型检测。血清标本用于血脂水平检测。血液标本置于-20 ℃冰箱中冻存。按试剂盒说明书提取全血基因组DNA，ApoE基因进行扩增，随后将扩增产物进行杂交，对ApoE基因行分型检测，基因芯片的位置设置见图1。同时测定不同ApoE基因型血清标本的TC、TG、LDL-C水平，所有操作均按照试剂盒说明书进行。最终分析收集的标本中ApoE基因的分布频率及其与血脂水平的相关性。

图1 ApoE基因的位置设置

1.4 统计学方法

采用SPSS 23.0软件对数据进行统计分析。计量资料以表示，2个组间比较采用t检验，计数资料以率表示，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 ApoE基因表型检测

ApoE基因表型分为：E2型（E2/E2、E2/E3）；E3型（E2/E4、E3/E3）；E4型（E3/E4、E4/E4）。见图2。

图2 ApoE基因表型

2.2 ApoE基因表型分布

ApoE基因表型E3型等位基因占比最高（65.49%），其次是E4型等位基因（17.53%），最后是E2型等位基因（16.90%）。见表1。

表1 142例高脂血症ApoE基因表型分布

2.3 不同高脂血症类型ApoE基因型的比较

142例高脂血症患者，其中高TC 51例，高TG 70例，高LDL-C 49例。51例高TC血症中E4表型比例最高（41.03%），E3表型其次（27.83%），E2表型最低（14.29%）；31例高TG血症中E2表型比例最高（66.67%），E 3表型其次（3 9.1 3%），E 4表型最低（28.21%）；22例高LDL-C血症中E4表型比例最高（30.77%），E3表型其次（28.70%），E2表型最低（19.05%）。

2.4 不同ApoE基因型高脂血症患者血脂水平的比较

E4基因型TC水平高于E2基因型和E3基因型（P＜0.05）；3个组TG和LDL-C水平差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 不同ApoE基因表型高脂血症患者血脂水平的比较（， mmol/L）

表2 不同ApoE基因表型高脂血症患者血脂水平的比较（， mmol/L）

注：与E4基因型比较，*P＜0.05

基因类型 例数 TC TG LDL-C E2 24 4.41±0.35*2.92±0.25 2.68±0.21 E3 93 4.70±0.40*2.38±0.22 2.92±0.18 E4 25 5.30±0.22 2.61±0.64 3.14±0.28

3 讨论

高脂血症是动脉粥样硬化的一个极其重要的危险因素，而动脉粥样硬化是导致CHD的主要原因。ApoE基因是目前被研究较多的血脂相关基因，是参与调节机体血脂代谢的重要因子，其基因多态性与血脂水平密切相关[2]。ApoE是多种脂蛋白的结构蛋白， 在血浆脂质运转和代谢过程中起着重要的作用。对ApoE基因型与血脂水平关系的研究发现，E2在降低 TC 水平上具有一定的优势，E4与较高的TC水平相关，可能与高血脂相关的疾病有关[3]。ZHANG等[4]、GRAMMER等[5]的meta分析认为ApoE基因是CHD的风险因素之一。刘金凤等[6]认为E4等位基因的表达是脂质代谢紊乱的重要危险因素。ZENDE等[7]报道ApoE基因型血清中 TC、LDL-C及TG水平高于其他基因型。ApoE基因多态性与TC水平密切相关，不受环境、性别、年龄等遗传因素干扰而存在，不同的ApoE基因型TC 水平由高到低依次为E4/E4、E3/E4、E2/E4、E3/E3、E3/E2、E2/E2。ApoE各基因型编码的ApoE异构体与脂蛋白受体的亲和性及其在体内的代谢速度不同，最终影响个体间血脂的水平。

本研究中以高脂血症患者为研究对象，ApoE3基因型例数占总例数的65.42%，E4等位基因占17.53%，E2等位基因占16.90%，与相关报道[8-9]的结果有差异，这可能与研究对象不同有关。本研究的142例高脂血症患者中，51例高TC血症患者E4基因型比例最高（41.03%），E2基因型最低（14.29%）；31例高TG血症患者E2基因型比例最高（66.67%），E4基因型最低（28.21%）；22例高LDL-C血症患者E4基因表型比例最高（30.77%），E2基因型最低（19.05%）。高脂血症患者因ApoE基因型不同而变化，E2、E3基因型TC水平与E4基因型相比差异有统计学意义（P＜0.05），TC水平为E4基因型＞E3基因型＞E2基因型，与刘国栋等[10]研究报道相符。

ApoE基因型的变化可应用于临床指导患者正确选择调脂药物，实现对其个体化的精准医疗， 降低冠心病的发病率和心血管事件风险。ApoE2基因型属于保护类基因型，对他汀类药物敏感，治疗效果较好，故首选他汀类药物[11-12]。ApoE3基因型属于大众类基因型，血脂异常无明显偏性，他汀类药物治疗正常，而采用黄酮类药物降脂效果更好。E4基因型可增加CHD、心肌梗死、脑梗死、老年痴呆患病风险，宜低脂、低盐、低糖饮食，忌烟酒[13]，他汀类药物治疗效果较差，治疗时应加大剂量治疗[14-15]，但需注意监测药物不良反应。

综上所述，高脂血症是动脉粥样硬化和心脑血管疾病的独立危险因素，ApoE基因多态性对血清血脂水平具有重要影响，临床上可根据 ApoE基因表型的变化指导患者选择适合的降脂药物，以降低CHD的发病率和心血管事件风险。随着研究的不断深入，ApoE基因多态性将对这些疾病的诊断及预防发挥重要的作用。