5项分子指标在良恶性胸腔积液鉴别中的应用价值对比*

陈丽芳，陈咏芳，赖 馨△，李小峰

(1.广东省深圳市龙岗区人民医院检验科 518172；2.广东省深圳市龙岗中心医院检验科 518172)

胸腔积液(PEs)是指胸腔异常积聚的液体，任何原因导致胸膜腔内出现过多的液体称为PEs，俗称胸水。据报道，已有60余种病因可导致PEs产生，包括肿瘤、感染及多系统性疾病等病因[1-2]。炎症、结核和肿瘤是引起渗出性PEs最常见的原因。PEs的形成原因是临床上治疗的第一步，特别是对患者PEs的良恶性，必须在最短的时间内作出准确判断，对症治疗，这对患者的治疗和预后有重要的意义。目前临床常规诊断方法很难确认PEs的性质[3]。而且常用的各种检查方法都有其局限性，例如PEs脱落细胞检查是最简单、最特异的检查方法，但其阳性率较低，据统计仅为30%[4]。因此检测PEs中高敏感性、高特异性的可溶性标志物成为临床研究的一个重点。PEs中分子标志物的检测已成为临床上常用的鉴别良性和恶性PEs的常用方法[5-6]。本文通过测定良性与恶性PEs患者PEs中的白细胞介素-22(IL-22)、白细胞介素-27(IL-27)、血管内皮生长因子(VEGF)、组织因子(TF)、组织因子途径抑制物(TFPI)的水平，探讨其在PEs良恶性性质中的应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取深圳市龙岗区人民医院2015年1月至2016年1月90例PEs患者的PEs标本。根据患者病理学和影像学检查结果确诊为恶性PEs的47例患者为恶性组；同时选取诊断为良性PEs的43例患者为良性组。

1.2试剂与仪器 IL-22、IL-27、VEGF、TF、TFPI试剂盒由上海酶联生物科技公司提供，操作过程严格按照试剂盒说明书进行，并用汇松公司的酶标仪进行比色读数。

1.3方法 在患者未进行药物治疗前在无菌条件下抽取PEs 10 mL，3 500 r/min离心10 min后提取上清液，储存于-80 ℃。待所有患者的积液标本留取完成后统一进行测定。本研究中采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测两组PEs中IL-22、IL-27、VGEF、TF、TFPI的水平。

2 结 果

2.1良性和恶性PEs组中5项分子指标水平比较 恶性组PEs的IL-22、IL-27、VEGF、TF、TFPI水平明显高于良性组，且5项分子指标间比较差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 良性和恶性PEs组中5项分子指标水平

表2 PEs 5项分子指标的相关性分析

注：*P<0.01

2.2PEs 5项分子指标的相关性分析 通过对PEs分子5项指标进行Pearson相关性分析可知,这5项指标相互影响，且互为正相关,差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

2.3PEs中IL-22、IL-27、VEGF、TF、TFPI的ROC曲线特征 根据PEs两组中的5项分子指标水平绘制PEs 5项分子指标ROC曲线(图1)。根据ROC曲线特征可知5项分子指标的ROC下面积、诊断点、灵敏度、特异度和准确度。PEs中的VEGF检测的灵敏度、特异度和准确度远高于其他4项指标。因此，在良恶性鉴定中，VEGF的优势高于其他4项分子指标，见表3。

图1 PEs5项分子指标ROC曲线

表3 PEs 5项分子指标的ROC曲线特征

注：AUC>0.5即有诊断价值

3 讨 论

IL-22也称为IL-10相关T细胞衍生的可诱导因子。在人体内，IL-22的功能多种多样，主要有保护和修复组织损伤，促进细胞再生及增生、抗微生物感染、促炎、促纤维化、抗细胞凋亡等作用[7-8]。而肿瘤的生长及浸润离不开新生血管的形成。IL-22具有激活细胞生长、增殖和分裂周期的相关信号通路的功能[9]。在胸膜腔中，IL-22可通过促进基质金属蛋白酶(MMPs)表达发挥免疫病理作用。

IL-27是目前新发现的众多个白细胞介素中的一种，是一种新型IL-6/IL-12家族成员，参与全身多种炎性反应，在自身免疫介导的组织损伤及炎症过程中发挥了重要作用。IL-27在肿瘤性疾病中具有一定的治疗潜能，抑制调节T细胞(Treg)生成，影响凋亡和抑凋亡基因生成，诱导肿瘤细胞凋亡参与抗肿瘤作用[10-13]。

VEGF是一种对血管生长有强效诱导作用的有丝分裂原。该物质广泛分布于人体内各重要器官和血管中，能够与血管内皮细胞上特异的酷氨酸激酶受体结合，发挥其促进血管生长，增加血管通透性，促进肿瘤转移等生物活性。肿瘤细胞增殖、浸润和转移的基础是血管生成。VEGF是所有血管生成促进因子中作用最强的促血管生成因子，可强烈诱导血管生成，并可特异性地作用于内皮细胞，使其产生促分解、增生和趋化作用，增加血管内皮的通透性而促进浸润转移，并使肿瘤细胞逃脱免疫监视。有研究表明，VEGF过量表达与诊断患者伴有恶性肿瘤呈相关性。

TF又名凝血因子Ⅲ，是血管外细胞表面跨膜糖蛋白受体。有研究显示，TF促进血管新生、肿瘤细胞生长和转移。

TFPI是一种丝氨酸蛋白酶抑制物，是TF凝血途径的主要抑制物。肿瘤患者经常出现高凝状态。肿瘤诱导新血管的生成。TF的高表达，会引起血栓形成。同时化疗，长期卧床也会导致血栓形成。因此TFPI作为天然抗凝剂可能有用武之地。凝血异常甚至血栓形成与恶性肿瘤的发生、发展密切相关。

本研究对43例良性PEs和47例恶性PEs标本的5项分子指标水平分别进行检测，组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。当这5项指标水平上升，有提示PEs恶性质的可能，要引起高度注意。对PEs 5项分子指标进行Pearson相关性分析，这5项指标互呈正相关。由ROC曲线特征可知，这5项分子指标对PEs的良恶性诊断均有价值(AUC>0.5)。均有一定的灵敏度和特异度提示PEs恶性性质的可能。跟其他4项指标相比，VEGF在恶性PEs中检出的灵敏度、特异度和准确度高于本研究中其他的4项指标。国外许多实验表明：VEGF与恶性PEs形成关系密切，许多肿瘤的腹膜转移依赖于VEGF水平。VEGF可促进恶性PEs的形成，在恶性PEs中具有较高的表达水平。

所以，VEGF检测水平可作为恶性PEs诊断的一种新方法而为临床服务，从而对良恶性PEs鉴定中起到一定的作用，使患者迅速得到治疗，避免延误了病情的情况发生。