旋光法快速测定注射用硫酸核糖霉素的效价

耿 悦

（江苏省食品药品监督检验研究院 江苏南京210019）

0 引 言

《中国药典》2015年版[1]（ChP2015）二部规定硫酸核糖霉素原料药及其制剂的含量测定采用抗生素的微生物检定法，该法的优点是能真实反映药物的抗菌活性，缺点是操作繁琐，测定条件要求高，检验周期长，测定误差大，不能满足快速检验和中间体质量控制的要求。本文根据硫酸核糖霉素具有旋光性的特点，拟对旋光法快速测定硫酸核糖霉素原料药及其制剂含量的可行性进行考察。

1 仪器与试剂

1.1 实验仪器

电子天平（Mettler Toledo XS205）；旋光仪（Anton Paar MCP300）；pH 计（Mettler Toledo）。

1.2 药品及试剂

硫酸核糖霉素工作对照品（无锡福祁，批号20170701，干燥失重 3.6%，含量以干燥品计，706核糖霉素，单位 mg）；注射用硫酸核糖霉素（19批抽检样品）；蒸馏水自制。

2 实验方法

2.1 标准曲线绘制

取硫酸核糖霉素工作对照品适量，用蒸馏水溶解并稀释制成浓度为 2.06×104、1.36×104、1.03×104、6.99×103、3.43×103、1.72×103µg/mL 的溶液。用1dm 测定管依次测定旋光度，以效价（C）为横坐标，旋光度（α）为纵坐标绘制标准曲线。经直线回归，得回归方程为：

2.2 回收率实验

取硫酸核糖霉素原料药适量，制成 10mg/mL溶液（约含 6900核糖霉素，单位 mL），依次测定，代入回归方程计算。其平均回收率为 100.7%，RSD为0.6%（n＝6）。

2.3 专属性实验

取新霉胺（已知杂质）对照品 0.03744g，置10mL容量瓶，加水定容。按2.2配制供试品溶液，分别加入新霉胺对照品溶液 1.5mL，测定其回收率分别为102.17%、102.09%，已大于102.0%。当供试品溶液中新霉胺含量大于 2.0%时，旋光效价法将带来较大误差。本次 19批样品新霉胺含量在 0.1%～0.2%（药典有关物质方法测得），可以用来测定。

2.4 pH值对旋光度的影响

按2.2配制供试品溶液，分别用硫酸溶液和氨试液调节 pH 值为 4.5、5.0、6.5、7.1、7.4，取上述供试品溶液适量，测定其旋光度，带入回归方程计算，并测定其回收率，分别为 101.6%、100.5%、98.6%、98.3%、94.7%，在碱性条件下旋光度会明显降低，在pH值为4.5～7.1范围测定较为准确。

2.5 温度对旋光度的影响

按 2.2配制供试品溶液，分别在 15、20、25、30℃测定旋光度，带入线性方程计算，回收率分别为100.0%、100.3%、101.7%、104.1%。上述结果表明，在15～25℃，温度对测定影响较小。

2.6 溶液的稳定性

按 2.2配制供试品溶液，分别在第 0、1、2、3、4、5、6、7、8h测定其旋光度，9次测定值RSD为0.4%，说明溶液在8h内稳定。

3 结 果

3.1 19批样品的比旋度测定

对抽检的 19批注射用硫酸核糖霉素（为原料药直接灌装）进行了比旋度的测定，结果为+45～+46°。第 17版《日本药局方》[2]规定比旋度应为+42～+49°（ChP2015暂未控制该品种比旋度），可见 19批样品均符合规定。

3.2 19批样品旋光效价测定法与微生物效价测定法比较

我们测定了 19批抽检样品的旋光度，通过标准曲线计算其旋光效价，并与微生物效价法测定值进行比较。19批抽检样品，旋光效价法测定结果在 701～713核糖霉素（单位 mg），微生物效价法测定结果在704～707核糖霉素（单位 mg）。旋光效价的误差为-0.9%～+0.8%。

旋光效价测定值与微生物效价测定值比较，P＝0.633＞0.05，2种方法所测结果之间无显著性差异。

4 结 论

本文建立了利用旋光法测定硫酸核糖霉素效价的方法，适用于硫酸核糖霉素原料药和注射用硫酸核糖霉素。该方法具有实验设备简单、实验操作简便快捷、实验成本低、无污染、短时间内即可完成测定等优点，且温度、pH 值、放置时间等因素在一定范围内变化对测定干扰不显著。

该法适用于企业中间品控制或企业内控方法，并且可作为快速检验方法之一，用于监督抽验药品初筛和快检。