食品中防腐剂的液相色谱分析

虞叶道 赵舒景

食品添加剂在饮料行业中具有重要作用。防腐剂是饮料中主要的添加剂，它们能够抑制微生物的生长，延长饮料的保质期。我国食品添加剂使用卫生标准中，对允许使用品种、使用范围以及最大使用限量均有明确规定，但随着饮料品种和添加剂种类的日益增多，存在食品添加剂滥用的趋势，对人体健康造成一定的风险。为保障食品安全，需要对饮料中这些食品添加剂的含量进行检测。近年来，有关食品添加剂的检测方法研究很多，主要涉及有液相色谱法、气相色谱法、液相色谱-质谱法。本研究针对苹果醋饮料中苯甲酸钠、山梨酸钾、水杨酸、邻苯基苯酚、对氯间二苯酚等5种常见的防腐剂， 利用高效液相色谱法进行检测，方法操作简单、快速，适用于食品防腐剂的检测。

实验部分

实验仪器与试剂。高效液相色谱仪（1200LC安捷伦公司）；数控超声波清洗机（TH- 600BQ济宁天华电子仪器公司）。

苯甲酸钠、山梨酸钾、水杨酸、邻苯基苯酚、对氯间二苯酚、乙酸铵试剂均为分析纯，甲醇为色谱纯。超市购买的苹果醋。

溶液的配制。准确称取 0.77 g乙酸铵，加水溶解并定容至 500 mL容量瓶中，得到0.02 mol/L的乙酸铵溶液。

准确称取苯甲酸钠，山梨酸钾，水杨酸，邻苯基苯酚，对苯基苯酚，对氯间二苯酚，联苯各0.2 g，溶解后用甲醇定容至100 mL的容量瓶中，从中移取10 mL溶液，用甲醇定容至100 mL的容量瓶中得到各物质浓度为200 mg/ L的混合标准溶液。

样品处理。称取苹果醋5.0 g，置于50 mL离心管中，加入甲醇10 mL，超声提取5 min，用稀氨水或盐酸溶液调节pH至7左右，用甲醇溶液定容至25 mL，再用0.45 μm滤膜过滤后进行分析。

色谱条件。色谱柱：Eclipse XDB- C18（4.6 mm× 250 mm，5 μm）；柱温：30℃；进样量：5 μL；波长：230 nm；A为甲醇，B为0.02 mol/L乙酸钠溶液，pH为6.5，梯度洗脱条件见表1。

实验结果与讨论

物质的定性分析。通过液相色谱测得苯甲酸钠，山梨酸钾，水杨酸，邻苯基苯酚，对苯基苯酚，对氯间二苯酚，联苯标准溶液的出峰时间，然后根据各样品的保留时间找出苹果醋中相对应峰的保留时间从而进行定性分析。标准样品各物质的保留时间见表2。

将配制的标准系列混合样注入液相色谱，得到图1，按保留时间的顺序，它们分别是苯甲酸钠，山梨酸钾，水杨酸，邻苯基苯酚，对苯基苯酚，对氯间二苯酚，联苯。

苹果醋样品的液相色谱图见图2。从保留时间（表3）对比分析，可以看出，苹果醋中含有苯甲酸钠，山梨酸钾，水杨酸，邻苯基苯酚，对氯间二苯酚。

定量分析。在用保留时间进行定性分析后，在上述同样操作条件和液相色谱条件下，用外标法来对苹果醋中的苯甲酸钠，山梨酸钾，水杨酸，邻苯基苯酚，对氯间二苯酚的含量进行测定。

配制5个不同质量浓度的混合标准溶液，分别为20，40，60，80和100μg/mL，在最佳色谱条件下进行测定。结果表明，在 20～100μg/mL范围内线性关系良好，线性回归方程和线性相关系数见表4。

因此，根據苹果醋色谱图中各峰的峰面积可以求出苹果醋中各防腐剂的含量，见表5。

精密度和回收率的测定。在苹果醋样品中添加一定量的防腐剂标准溶液，样品处理后，色谱进样分析，连续测定3次，测定结果见表6。结果表明该实验方法有较好的精密度和回收率。

本文利用高效液相色谱检测的方法，对苹果醋中苯甲酸钠、山梨酸钾、水杨酸、邻苯基苯酚、对氯间二本酚进行了分析测定，含量分别为 1.26 mg/kg，0.014 mg/kg，3.6 mg/kg，1.24 mg/kg，6.9 mg/kg，本实验方法检测时间短，灵敏度高，检测性能好，能够满足饮料中防腐剂的检测要求。