博落回生物碱和茶籽多糖对黄羽肉鸡生长性能、血清生化指标及脂质过氧化的影响

2018-11-16胡贵丽刘勇强宋泽和范志勇张石蕊

动物营养学报 2018年11期

胡贵丽刘靖刘勇强宋泽和范志勇张石蕊贺喜

(湖南农业大学动物科学技术学院，饲料安全与高效利用教育部工程研究中心，湖南畜禽安全生产协同创新中心，长沙 410128)

博落回又名号筒杆、山号筒，隶属罂粟科，为多年生草本植物；其果实中含有较丰富的生物碱，主要有血根碱(sanguinarine)、原阿片碱(protopine)、白屈菜红碱(chelerythrine)、α-别隐品碱(α-allocryptopine)、β-别隐品碱(β-allocryptopine)等。博落回生物碱的药理活性较广，如抗菌消炎、抗肿瘤、改善肝功能和杀虫作用等，可以替代抗生素发挥中药作用。

植物多糖广泛存在于植物中，是一类由单糖通过糖苷键组合而成的化合物，常见的有黄芪多糖、枸杞多糖、海藻多糖和茶籽多糖等。研究发现，植物多糖具有降血糖、抗肿瘤、免疫调节等作用。

目前，已有许多关于博落回生物碱和茶籽多糖在动物生产中的研究。饶华等研究显示，博落回提取物能显著改善断奶仔猪的生长性能。李美奎等报道认为，饲粮中添加5.0 mg/kg博落回提取物能显著提高仔猪的平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)，降低料重比(F/G)，极显著降低血清丙二醛(MDA)含量。徐春燕研究发现，饲粮中添加一定量的苜蓿多糖和黄芪多糖能提高肉仔鸡的抗氧化能力，显著提高血清总抗氧化能力(T-AOC)，降低血清MDA含量。陈桂冰等研究显示，茶籽多糖能清除羟基自由基、氮自由基、过氧化氢等，同时对过氧化氢引起的DNA氧化损伤具有保护作用。但有关博落回生物碱和茶籽多糖在家禽生产中的研究还较少。因此，本试验旨在研究博落回生物碱和茶籽多糖对黄羽肉鸡生长性能、血清生化指标及脂质过氧化的影响，从饲料添加剂角度为其开发利用提供条件，并探索其作为新型、高效绿色饲料添加剂的可能性，从而为博落回生物碱和茶籽多糖在畜禽生产中的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

博落回生物碱：总碱含量为70%，其中血根碱占60%，白屈菜红碱占20%，由湖南中药提取工程研究中心提供；茶籽多糖：纯度为43.4%，由湖南农业大学食品科技学院油脂教研室提供；抗生素：前期为抗敌素，后期为黄霉素。

1.2 试验动物与试验设计

选择同批次、遗传背景相同、发育正常的1日龄黄羽肉鸡750羽，随机分为5个组，每组6个重复，每个重复25只鸡。各组鸡的初始体重无显著差异(P>0.05)。采用单因子随机试验设计，对照组饲喂基础饲粮，试验组分别在基础饲粮中添加抗生素(1～28日龄为10 mg/kg抗敌素，29～56日龄为5 mg/kg黄霉素；抗生素组)、茶籽多糖(0.04%；多糖组)、博落回生物碱(1～28日龄为10 mg/kg，29～56日龄为20 mg/kg；博落回组)、茶籽多糖(0.04%)+博落回生物碱(1～28日龄为10 mg/kg，29～56日龄为20 mg/kg；多糖+博落回组)。抗生素的添加符合我国现行法律法规规定。试验鸡采用粉料饲喂。试验期56 d，分为1～28日龄和29～56日龄2个阶段进行。

1.3 试验饲粮

基础饲粮参照NRC(1994)和《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)中的肉鸡营养需要，选用玉米、豆粕等原料配制而成，其组成及营养水平见表1。

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)

1)预混料为每千克饲粮提供 The premix provided the following per kg of diets：Cu 25 mg，Fe 96 mg，Mn 105.4 mg，Zn 98 mg，Na 0.9 mg，I 1.29 mg，Se 0.225 mg，VA 12 000 IU，VD32 500 IU，VE 20 mg，VK33.0 mg，VB13.0 mg，VB28.0 mg，VB67.0 mg，VB120.03 mg，泛酸 pantothenic acid 20.0 mg，烟酸 niacin 50.0 mg，生物素 biotin 0.1 mg，叶酸 folic acid 1.5 mg。2)营养水平为计算值。Nutrient levels were calculated values.

1.4 饲养管理

试验鸡舍选用开放式，采用高低床平养，光照为14 h光明：10 h黑暗(14 L:10 D)；1～7日龄30～33 ℃、8～14日龄27～29 ℃、15～21日龄24～26 ℃、22～28日龄22～23 ℃、29～56日龄20～21 ℃，保持正常温度，舍内采取锅炉控温，自然通风。定期打扫鸡舍卫生，相对湿度保持在55%～65%，自由饮水和采食，按常规程序免疫。

1.5 测定指标与方法

1.5.1 生长性能

试验期间观察试鸡的生长和健康状况，按重复记录饲料消耗量；于28、56日龄早晨称重(空腹8 h)，计算各组试鸡的ADFI、ADG和F/G。

1.5.2 血清生化指标

于28、56日龄早晨(空腹8 h)，分别从每个重复中选择1只接近该组平均体重的试鸡，翅静脉采血10 mL，静置凝固后，3 000 r/min离心10 min，收集离心管上层血清分装，于-20 ℃保存，用于血清生化指标的测定。血清谷丙转氨酶(ALP)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)活性和尿素氮(UN)含量采用迈瑞BS-200全自动生化分析仪测定，试剂盒均购自深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，所有指标严格按照相关试剂盒说明书进行操作。

1.5.3 胴体性状和肌肉MDA含量

于56日龄时，分别从每个重复中选择1只接近该组平均体重的试鸡，称重后颈部放血、屠宰，参考《家禽生产性能名词术语和度量统计方法》(NY/T 823—2004)计算胸肌率和腿肌率。计算公式如下：

胸肌率(%)=100×胸肌重/全净膛重；腿肌率(%)=100×腿肌重/全净膛重。

取相同部位的胸肌50 g左右，于4 ℃保存，用于胸肌MDA含量的测定。测定方法如下：将肌肉于4 ℃保存2、4、6 d后，严格按照南京建成生物工程研究所试剂盒说明书进行操作。

1.6 数据处理与分析

试验数据采用SPSS 16.0软件的one-way ANOVA程序进行系统分析，组间差异显著者则采用Duncan氏法进行多重比较，以P<0.05为差异显著性标准。试验结果以“平均值±标准差”表示。

2 结果

2.1 生长性能

由表2可知，1～28日龄时，各组黄羽肉鸡的ADG、ADFI和F/G均无显著差异(P>0.05)。29～56日龄和1～56日龄时，博落回组的ADFI显著高于其他各组(P<0.05)，对照组、抗生素组、多糖组和多糖+博落回组的ADFI无显著差异(P>0.05)；各组的ADG和F/G均无显著差异(P>0.05)。

表2 博落回生物碱和茶籽多糖对黄羽肉鸡生长性能的影响

续表2项目 Items对照组 Control group抗生素组 Antibiotic group多糖组 Polysaccharide group博落回组 Macleaya cordata group多糖+博落回组 Polysaccharide+Macleaya cordatagroupP值 P-value1～56日龄 1 to 56 days of age平均日增重 ADG/(g/d)29.42±0.7229.56±0.2429.61±0.7430.54±0.2729.73±0.180.532平均日采食量 ADFI/(g/d)69.30±1.07b69.93±0.55b69.47±1.07b72.73±1.35a70.29±0.77b0.011料重比 F/G2.36±0.032.37±0.042.35±0.032.38±0.042.36±0.030.412

同行数据肩标相同或无字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。下表同。In the same row, values with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as below.

2.2 血清生化指标

由表3可知，28日龄时，与对照组相比，其他各组黄羽肉鸡的血清ALT、LDH活性和UN含量显著降低(P<0.05)，抗生素组、多糖组、博落回组和多糖+博落回组的血清ALT、LDH活性和UN含量无显著差异(P>0.05)；与对照组相比，其他各组的血清ALP活性极显著降低(P<0.01)，多糖组、博落回组和多糖+博落回组的血清ALP活性极显著低于抗生素组(P<0.01)，多糖组、博落回组和多糖+博落回组的血清ALP活性无显著差异(P>0.05)；各组的血清AST活性无显著差异(P>0.05)。56日龄时，与对照组相比，其他各组的血清ALP活性极显著降低(P<0.01)，血清LDH活性显著降低(P<0.05)，抗生素组、多糖组、博落回组和多糖+博落回组的血清ALP、LDH活性无显著差异(P>0.05)；各组的血清ALT、AST活性和UN含量均无显著差异(P>0.05)。

表3 博落回生物碱和茶籽多糖对黄羽肉鸡血清生化指标的影响

续表3项目 Items对照组 Control group抗生素组 Antibiotic group多糖组 Polysaccharide group博落回组 Macleaya cordatagroup多糖+博落回组 Polysaccharide+Macleaya cordatagroupP值P-value56日龄 56 days of age谷丙转氨酶 ALT/(U/L)13.23±1.8210.85±3.469.47±3.208.86±5.3510.30±2.660.284谷草转氨酶 AST/(U/L)315.88±27.94307.98±24.93298.22±13.62288.97±13.15289.00±23.860.220碱性磷酸酶 ALP/(U/L)2 823.10±192.80Aa2 392.66±127.70Bbc2 281.68±187.88Bbc2 251.54±166.22Bc2 289.50±169.14Bbc<0.001乳酸脱氢酶 LDH/(U/L)541.47±76.84a453.98±42.32b449.18±47.02b439.78±53.22b427.78±85.87b0.049尿素氮 UN/(mmol/L)0.18±0.030.21±0.050.15±0.070.16±0.020.17±0.030.475

2.3 胴体性状和肌肉MDA含量

由表4可知，与对照组相比，博落回组黄羽肉鸡的胸肌率和腿肌率、多糖组和多糖+博落回组的腿肌率均显著提高(P<0.05)；与抗生素组相比，博落回组和多糖+博落回组的胸肌率和腿肌率及多糖组的腿肌率均显著提高(P<0.05)；博落回组的胸肌率显著高于多糖组(P<0.05)，与多糖+博落回组无显著差异(P>0.05)；多糖组、博落回组和多糖+博落回组的腿肌率无显著差异(P>0.05)。肌肉于4 ℃保存2、4、6 d后，抗生素组、多糖组、博落回组和多糖+博落回组的肌肉MDA含量极显著低于对照组(P<0.01)，多糖组、博落回组和多糖+博落回组的肌肉MDA含量无显著差异(P>0.05)；2 d时，多糖组、博落回组和多糖+博落回组的肌肉MDA含量极显著低于抗生素组(P<0.01)；6 d时，多糖组、博落回组和多糖+博落回组的肌肉MDA含量显著低于抗生素组(P<0.05)。

表4 博落回生物碱和茶籽多糖对黄羽肉鸡胴体性状和肌肉MDA含量的影响

3 讨论

3.1 博落回生物碱和茶籽多糖对黄羽肉鸡生长性能的影响

本试验结果表明，饲粮中添加博落回生物碱在一定程度上提高了黄羽肉鸡的ADG，显著提高了ADFI，而F/G与对照组和抗生素组相比无显著差异；博落回组黄羽肉鸡的生长性能与抗生素组相比无显著差异。这一结果与Vieira等在饲粮中添加37.5 mg/kg博落回提取物可提高21日龄火鸡的ADG相一致。云龙研究显示，饲粮中添加博落回血根碱提取物能显著改善黄羽肉鸡生长后期的ADG和ADFI。Kantas等[10]和蔡鹏等[11]在仔猪上的研究显示，饲粮中添加博落回生物碱可改善断奶仔猪的生长性能。饲粮中添加博落回生物碱可改善动物的ADG、ADFI和饲料利用效率，一方面可能是因为博落回生物碱中重要的成分血根碱具有抑制胆碱酯酶活性、刺激唾液分泌等功能及利尿、外周抗肾上腺素解交感等作用[12]，且通过抑制芳香族氨基酸脱羧酶调节色氨酸-5-羟色胺代谢途径，从而提高动物的采食量[13]；另一方面可能是因为博落回生物碱能保障肠道健康，促进肠细胞增值、分化、更新，促进小肠对营养物质的消化吸收，从而提高了动物的体增重[14]。

目前，多种被分离出来的植物多糖均表现出促生长作用。本试验结果也显示，饲粮中添加茶籽多糖能改善黄羽肉鸡的生长性能，作用效果与抗生素相当。这与袁钟宇等[15]试验结果相似，饲粮中添加300 mg/kg茶籽多糖对肉鸡生长性能的影响与5 mg/kg恩拉霉素相当。李学军等[16]研究显示，饲粮中添加茶籽多糖能改善仔猪的生长性能。茶籽多糖对肉鸡生长性能的改善可能与其促进肠道菌群平衡，提高动物健康水平，从而促进营养物质的吸收和蛋白质的合成有关。

3.2 博落回生物碱和茶籽多糖对黄羽肉鸡血清生化指标的影响

血清AST和ALT活性是检查肝功能是否正常的理化指标，肝功能不全时，血清中的AST和ALT活性会升高[17]。本试验中，多糖组、博落回组和多糖+博落回组黄羽肉鸡的血清ALT和AST活性低于对照组，除28日龄时的血清ALT活性与对照组相比差异显著外，其他均无显著差异，这表明茶籽多糖和博落回生物碱不会给机体代谢带来不良影响，且不会损伤肝脏细胞。正常情况下，血清中的ALP和LDH活性较低，当细胞因各种因素(如应激)刺激而受到损伤时，细胞膜的通透性增加，ALP释放入血液的速度增加，血清ALP活性显著升高[18]；当机体组织细胞受到广泛损伤时，LDH活性显著升高。本试验结果表明，与对照组相比，茶籽多糖、博落回生物碱及二者联用均可使黄羽肉鸡的血清ALP活性极显著下降，血清LDH活性显著下降；与抗生素组相比，茶籽多糖、博落回生物碱及二者联用均可使28日龄时的血清ALP活性极显著下降。这表明茶籽多糖和博落回生物碱可能具有保护肠黏膜，降低其受损程度的作用。血清UN含量与动物体内的蛋白质代谢情况及饲粮氨基酸的平衡状况有关，当蛋白质代谢异常时，血清UN含量升高；蛋白质代谢良好时，血清UN含量降低[19]。本试验结果显示，与对照组相比，茶籽多糖、博落回生物碱及二者联用均能显著降低28日龄黄羽肉鸡的血清UN含量。这说明茶籽多糖和博落回生物碱并未对肝肾的正常功能造成影响，蛋白质的利用率有所改善。血清UN含量降低说明蛋白质代谢终产物的排泄正常，体内无有毒物质聚积，给黄羽肉鸡饲喂茶籽多糖和博落回生物碱不仅不会损害肾脏，反而有保护肾脏、增强肾脏排泄功能的作用；此外，血清UN含量降低说明蛋白质的分解代谢降低，蛋白质在体内的沉积增加。

3.3 博落回生物碱和茶籽多糖对黄羽肉鸡胴体性状和脂质过氧化的影响

本试验结果表明，饲粮中添加博落回生物碱可显著提高黄羽肉鸡的胸肌率和腿肌率；多糖组的胸肌率和腿肌率高于对照组，胸肌率显著高于抗生素组。MDA是体内自由基攻击生物膜上的多不饱和脂肪酸，从而引发脂质过氧化所产生的一类较稳定的脂质过氧化物。组织中的MDA含量是反映脂质过氧化程度的重要指标，是体内脂质反应的最终产物，肉品中的MDA含量直接反映肉品脂质过氧化的程度[20]，直接关系到肉品的货架寿命。本试验结果显示，肌肉于4 ℃保存2、4、6 d后，抗生素组、多糖组、博落回组和多糖+博落回组的肌肉MDA含量极显著低于对照组。这与Lee等[21]研究结果相一致，饲粮中添加20和50 mg/kg血根碱能显著降低肉鸡的腿肌MDA含量。云龙试验亦显示，饲粮中添加血根碱能降低28日龄黄羽肉鸡的血清MDA含量；血根碱添加水平小于150 mg/kg时，56日龄肉鸡的血清MDA含量显著低于对照组和抗生素组。多糖类物质具有清除自由基和增强机体免疫功能作用。薛凌峰等[22]在饲粮中添加150～450 mg/kg香菇多糖，发现能够显著提高仔猪的血浆超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性，降低血浆MDA含量。李学军等[16]研究发现，饲粮中添加600 mg/kg茶籽多糖能提高生长猪的血清SOD活性，降低血清MDA含量。这说明添加茶籽多糖和博落回生物碱均可延长鸡肉的货架存放时间，作用效果与抗生素相似。