超声波辅助去除白果中银杏酸的工艺优化

潘芸，肖朝耿，程坷伟，陶缘，杨胜利*

(1.浙江工业大学 药学院，浙江 杭州 310014； 2.浙江省农业科学院 食品科学研究所，浙江 杭州 310021； 3.浙江康恩贝养营堂食品有限公司，浙江 东阳 322100)

白果中含有丰富的营养物质，具备较高的食药用价值。日常食用的白果就是银杏加工制成的干果[1-2]。未加工的白果中含有多种毒性成分，多食会中毒，甚至可导致生命危险[3-4]，但在加热煮好或晒干加工之后，银杏果中的有毒成分大量减少，可以直接食用，也可以制成各种各样的零食和饮料，不过仍存在一定的安全隐患。银杏脱毒是指利用物理、化学或生物的方法脱去银杏酸等有毒成分，从而适于人们食用和药用[5-6]。鉴于此，本文采用超声波辅助，开展白果中银杏酸脱毒技术研究。

1 材料与方法

1.1 材料

银杏样品系市售带壳银杏。

主要仪器：HSW-24型电热恒温水浴锅，上海一恒科技有限公司；R206型旋转蒸发器，上海申生科技有限公司；JJ500型电子天平，美国双杰(兄弟)集团有限公司；THZ-82A型水浴恒温振荡器，金坛市杰瑞尔电器有限公司；JP-1000B型高速多功能粉碎机，永康市久品工贸有限公司；KQ2200型超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司。

1.2 样品预处理

购买带壳的新鲜银杏，用工具去壳，同时除去种皮，之后在粉碎机内粉碎成糊状。取糊状的银杏果干燥、研磨，过60目筛，得到银杏粉。

1.3 处理设计

用电子天平称取1.00 g的银杏粉，加入20 mL的90%乙醇溶液作为提取剂，超声20 min，过滤，得到银杏酸物质的提取液，用分光光度法测定其中的银杏酸含量。

实验过程中保持其他因素不变，分别考查料液比(1∶20、1∶30、1∶40、1∶50、1∶60)和提取剂(90%乙醇、水、正己烷)对脱除银杏酸的影响。在考查料液比的影响时，固定银杏粉称样量，通过改变提取剂的用量调整料液比。在考查提取剂的影响时，每种提取剂条件下均分别超声20、30、40、50 min。超声结束后过滤，得到银杏酸物质的提取液，90%乙醇溶液的提取液可以直接稀释测量吸光度，以正己烷、水为提取剂得到的滤液需要旋转蒸发后再经过90%乙醇溶液溶解、过滤、稀释一定倍数后再测量吸光度。

1.4 银杏酸含量测定

采用分光光度法。用电子分析天平称取标准品银杏酸2.00 mg，用无水乙醇溶解，定容至50 mL，配成40 mg·L-1的标准溶液。分别量取标准溶液0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mL于10 mL容量瓶中，加入乙醇定容，振荡摇匀，在310 nm处测定吸光度，绘制标准曲线。取处理过的样品，同样在310 nm处测定吸光度值，推算出提取液中的银杏酸含量。

2 结果与分析

2.1 银杏酸标准曲线

如图1所示，银杏酸0～8.0 mg·L-1，吸光值与含量线性良好，适于测定银杏酸含量。

图1 银杏酸标准曲线

2.2 浸提剂及超声时间对超声波法去除银杏酸的影响

银杏酸是一类水杨酸衍生物，溶解性与水杨酸相似，易溶于乙醇、乙醚、氯仿，微溶于水，在沸水中溶解。由图2可知，以90%乙醇为提取剂时，提取液中银杏酸的含量最高，其次是水，而以正己烷为提取剂的效果较差。故选择90%乙醇作为去除白果中银杏酸的提取剂。

图2 不同提取剂比对银杏酸去除的影响

随着超声时间延长，提取出的银杏酸含量先增加，至40 min时达到最大值，之后提取液中的银杏酸含量下降。故选择最适的超声时间为40 min。

2.3 料液比对超声波法去除银杏酸的影响

由图3可知，在试验条件下，随着料液比降低(1∶20～1∶60)，提取液中银杏酸的含量先增加，至1∶50时达到最大，之后略有下降，但是脱除率仍然在增加。

图3 不同料液比对银杏酸去除效果的影响

3 小结与讨论

经检测，本研究所使用的白果银杏酸含量为293.6 mg·kg-1。经过处理后，银杏酸含量大幅度降低。采用超声波辅助的方法，在料液比为1∶50时，脱除液中银杏酸含量达到5.45 mg·L-1，即1 g白果脱除287.5 mg银杏酸，银杏酸脱除率达到97.9%，脱毒后的白果粉中银杏酸含量约为6.1 mg·kg-1；当料液比为1∶60时，脱除液中银杏酸含量达到4.84 mg·L-1，即1 g白果脱除290.4 mg银杏酸，银杏酸脱除率达到98.9%，脱毒后的白果粉中银杏酸含量约为3.2 mg·kg-1。目前，食用白果中银杏酸含量并没有国家标准，在检索范围内仅见国际上关于银杏叶提取物中银杏酸含量必须低于5 μg·g-1的限量要求，与此对照，本文方法可满足相关要求。白果食品的脱毒处理在毒理学上是可证明其安全性的，由于原料成本低，且具有较好的食疗效果，白果食品发展具有较大潜力，本研究为保证白果食用安全提供了可资借鉴的工艺方法，但将白果开发为“快消食品”的加工工艺等仍有待改进，其消费市场也有待扩展。