鳜鱼嗜水气单胞菌的分离鉴定及药敏试验

邱 燕 梅广海

嗜水气单胞菌广泛分布于池水、淤泥等自然环境，常引起鱼、鳖、鳗、牛蛙等水生动物败血症或局部感染，导致水产动物大量死亡，给水产养殖业造成经济损失。目前对嗜水气单胞菌引起的疾病多采用抗生素防治，本文通过药物敏感试验，选择性使用抗生素，从而减少药物残留、降低细菌耐药性以及对水环境的污染等。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病料的采集。取病体鳜鱼4个样、鳜鱼养殖池水样16份，2016年9月2日在海安县雅周镇迥垛村鳜鱼养殖基地采集。

1.1.2 主要试剂。培养基、BD Crystal阴性板条及药敏试验板条均购自南京菲恩医疗科技有限公司。

1.2 试验方法

1.2.1 病鱼的剖检。肉眼观察鳜鱼体表变化，解剖病死鳜鱼，分析各内脏的病症。

1.2.2 病原菌的分离培养。无菌采取鳜鱼表面和内脏组织以及养殖水样，分别接种于营养琼脂培养基，28℃恒温培养24h，挑取单个菌落进一步纯化。

1.2.3 病原菌的鉴定。根据革兰氏染色结果，使用BD Crystal阴性板条来鉴定其生化特性，从而确定鉴定菌种。

1.2.4 药敏试验。对分离的四株嗜水气单胞菌进行药敏试验，将分离菌株制成0.5麦氏的菌悬液，取0.1mL注入药敏板条，28℃恒温培养24h，观察细菌生长情况。使用药物为：硫酸新霉素、氟苯尼考、恩诺沙星、甲砜霉素、盐酸环丙沙星、红霉素、盐酸土霉素和强力霉素。

2 结果

2.1 病死鳜鱼的剖检结果。病鱼体表出血，剖开后内脏正常，内容物较少。

2.2 病原菌鉴定结果。共分离四种菌株，鉴定结果均为嗜水气单胞菌。

2.3 药敏试验结果。试验结果如表1显示，氟苯尼考和盐酸环丙沙星对嗜水气单胞菌显示出较强的抑菌效果，红霉素和盐酸土霉素抑菌效果不明显。

表1 各种抗菌药物对嗜水气单胞菌的最低抑菌浓度（MIC值）mg/L

3 讨论

本试验中通过病原菌分离培养，分离出四种菌株，生化鉴定初步鉴定为嗜水气单胞菌，通过对四种菌株的药敏试验，氟苯尼考和盐酸环丙沙星对嗜水气单胞菌有较强的抑菌效果，由于盐酸环丙沙星属于禁用渔药，实际应用中可采用氟苯尼考。由于不同的养殖区域、养殖品种、用药方法都会使病原菌因药物环境不同而产生耐药性差异，给疾病的预防带来了困难，因此对嗜水气单胞菌等引起的细菌性疾病的防治既要考虑病原菌对药物的敏感性，也要根据水产用药的相关规定合理用药。