2018年上半年产蛋鸡致病性大肠艾希菌耐药情况研究报告

李桂喜 ，董松岭 ， 何永光 ，魏曼 ，梁磊

(1.商丘市动物疫病预防控制中心，河南 商丘 476100；2.商丘市质量技术监督检验测试中心，河南 商丘 476000；3.郑州市动物卫生监督所，河南 郑州450007；4.商丘市畜产品质量监测检验中心，河南 商丘 476100）

由于养鸡生产中广泛使用抗菌素 （饲料长期低剂量添加，雏鸡和青年鸡预防性投药尤为严重），不合理使用或滥用抗菌素，导致大肠艾希菌因抗菌药物的选择性压力，耐药菌得以迅速繁殖而成为优势菌，并引起多重耐药和耐药基因获得较长期存留或遗传。产蛋期药物残留严重影响食品安全和人体健康，残留药物通过排泄物进入土壤和地下水对生态安全造成严重危害。

为了临床合理和最低限度使用抗菌药物,2018年1月1日至6月30日对苏鲁豫皖交界某鸡病门诊140日龄以上、疑似患有大肠杆菌病的病死鸡，进行常规大肠艾希菌分离并选用8种药物进行药敏试验和耐药性研究。

1 材料与方法

1.1 病料来源 疑似患有大肠杆菌病的病死蛋鸡，进行常规大肠艾希菌分离鉴定毒株。

1.2 培养基 郑州人福博赛生物技术有限公司商品化MH培养基。

1.3 质控菌 大肠埃希菌ATCC25922。

1.4 药敏纸片 OXOID公司商品化药敏纸片，选用 AMC(阿莫西林/克拉维酸)、N（新霉素）、CIP（环丙沙星）、CT（多粘菌素）、CTX（头孢噻肟）、C（氯霉素）、SH（壮观霉素）、K（卡那霉素）8 种药敏纸片进行本研究。其中氯霉素作为兽药氟苯尼考药敏参考，头孢噻肟作为兽药头孢噻呋药敏参考。

1.5 药敏试验方法 采用CLSI标准K-B法。

1.6 药敏结果判定 根据CLSI最新解释标准。

2 结果

2.1 分离株致病性大肠艾希菌敏感结果 CT敏感率最高达86.27%，N最低敏感率仅为4.59%，由高到低排序：CT(289株/335 株，86.27%)＞SH(227株/429 株，52.91%)＞AMC(167 株/415 株，40.24%)＞CTX(108株/389株，27.76%)＞K(81株/354株，22.88%)＞CIP(76 株/395 株，19.24%)＞C(52 株/396株，13.13%)＞N(13 株/283 株，4.59%)。 结果见表 1、图1。

图1 不同药物敏感（S）柱状图

表1 2018年上半年药敏试验结果汇总表（单位：株）

2.2 分离株致病性大肠艾希菌耐药结果 C耐药率高达83.08%，AMC耐药率最低为11.08%，由高到低的排序：C(329株/396株，83.08%)＞N(202株/283 株，71.38%)＞CIP(262 株/395 株，66.33%)＞CTX(228株/389株，58.61%)＞K(203株/354株，57.34%)＞SH(121 株/429 株，28.21%)＞CT(株 46/335株，13.73%)＞AMC(46 株/415 株，11.08%)。 结果见图2。

图2 不同药物耐药（R）柱状图

2.3 0 mm药敏值结果 C对78.28%菌株无任何作用，只有2株对CT的药敏值是0mm，由高到底的排序 ：C(310株/396株，78.28%)＞K(203株/354株，57.34%)＞CIP(151 株/395 株，38.23%)＞CTX(109株/389 株，28.02%)＞SH(26 株/429 株，6.06%)＞N(15株/396 株，3.79%)＞AMC(8 株/415 株，1.93%)＞CT(2株/335株，0.59%)。结果图3。

图3 不同药物抑菌圈直径0mm柱状图

2.4 诱导耐药和依赖耐药菌株分离结果 对K、CIP和C产生诱导耐药和依赖耐药菌株较多，对CT产生最少，只有4株/335株，为1.19%。由多到少排序：K(34株/354株，9.60%)＞CIP(29株/395株，7.34%)＞C(22 株/396 株，5.56%)＞SH(15 株/429株，3.49%)＞CTX(13 株/389 株，3.34%)＞N(8 株/396株，2.02%)＞AMC＞(8 株/415 株，1.93%)＞CT(4 株/335株，1.19%)。 结果见图 4。

图4 依赖耐药和诱导耐药情况

2.5 多重耐药结果 有24.72%菌株对7种药全部耐药，只有1株对8种药全部敏感，1株对7种药敏感，其余均对2种以上药物耐药。多重耐药由高到低排序：7耐 (67株/271株，24.72%)＞6耐(66株/271 株，24.35%)＞5 耐 (62 株/271 株，22.88%)＞4耐 (25株/271株，9.23%)＞3耐 (21株/271株，7.75%)＞8耐(15株/271株，5.54%)＞2耐(13株/271株，%)＞1耐=0耐(1株/271株，0.37%)。 结果见图5、表 2。

图5 多重耐药饼状图

表2 多重耐药汇总表

综合以上结果，C的耐药率、0mm药敏值居于首位；N、CIP耐药率分别居于第二和第三；CT敏感率最高，0mm药敏值、耐药率、诱导耐药和依赖耐药菌株分离株均最低。

3 结论与讨论

3.1 由于蛋鸡亲代细菌耐药质粒的遗传和育雏期、产蛋前期抗生素的不规范使用，导致蛋鸡大肠杆菌耐药性的产生。C、N、CIP高耐药率的试验结果，与蛋鸡生产中氟本尼考、氟喹诺酮、新霉素类药物的预防性投药和滥用药密切相关，这三类药物也是多次禽蛋抽检药残较多的品种，与2018年上半年食药监部门鲜蛋抽检药物残留结果一致。鲜蛋不合格原因是被检出含有氟苯尼考、恩诺沙星、氧氟沙星等，其中氟苯尼考检出频次57.58%（38/66）、恩诺 沙星 39.39%（26/66）、氧氟沙星1.52%（1/66）。

3.2 致病性大肠艾希杆菌是一种机会菌，产蛋期是大肠杆菌原发和继发的高发期。

加强饲养管理，降低鸡舍NH3、H2S、粉尘的浓度可将发病率降至一个较低的水平。日常饲料添加微生态制剂，采用生物拮抗作用，可有效抑制致病性大肠艾希杆菌的繁殖。

3.3 加强低致病性禽流感、新城疫等病毒性疫病的防控，可以减少致病性大肠艾希杆菌的继发感染。

3.4 蛋鸡发病后可采用酸化剂饮水和加强鸡舍消毒。酸化剂饮水将pH值调控至4.2左右，抑制致病性大肠艾希杆菌的繁殖，鸡舍强化消毒能够降低空气致病性大肠埃希菌浓度。

3.5 选择饲养优质抗病蛋鸡品种，如农大三号、花凤等本土品种。