葛根枳椇软胶囊对乙醇所致大鼠化学性肝损伤的保护作用

周颖，罗小菊，常秀亭，李备

（海南省食品检验检测中心，海南海口 570314）

葛根枳椇软胶囊以葛根提取物与枳椇子提取物为主要原料，对化学性肝损伤有辅助保护功能[1]。葛根为豆科植物野葛的干燥根，其性凉，味甘、辛，具有解肌退热、生津止渴、解酒毒等功效[2]。枳椇子为鼠李科拐枣属植物枳椇的干燥成熟种子，其主要功能为清热利尿、止渴除烦、解酒毒，用于热病烦渴、呃逆、小便不利[3]。近年来，乙醇中毒及饮酒导致的疾病呈现上升趋势。急性乙醇中毒是临床常见的急重症，其对肝脏损伤较为常见[4]。为了验证解葛根枳椇软胶囊对肝脏的保护作用，进行了以下研究。

1 材料与方法

1.1 实验动物

SD大鼠，SPF级，40只，成年雄性，体重140～160 g，由广东省医学实验动物中心提供，生产许可证号SCXK（粤）2008-0002。饲养条件：温度20～26 ℃，相对湿度40%～70%，环境等级为屏障系统，动物自由进食、水，12 h/12 h明暗交替。

1.2 受试样品

金奥力牌葛根枳椇软胶囊，威海紫光生物科技开发有限公司生产。胶囊内容物为棕黄色黏稠油状液体，每100 g含总黄酮510 mg。密封、避光、置阴凉干燥处保存。人体推荐用量为每日2次，每次2粒。成人体重以60 kg计，人体推荐剂量为33 mg/kg，以胶囊内容物作为受试样品进行试验。

1.3 主要仪器和试剂

1.3.1 仪器

电子分析天平(METTLER TOLEDO XS204)，超细匀浆器(Fluko F6/10)，离心机，全自动生化分析仪(日立7100)，紫外可见分光光度计(Thermo EVOLUTION 300)，酶标仪(Thermo MK3)，冰冻切片机(Leica CM1900UV)，显微镜 (Leica DM2500)等。

1.3.2 试剂

丙二醛测定测试盒、甘油三酯测定试剂盒及还原型谷胱甘肽测定试剂盒均来源于南京建成生物工程研究所。

1.4 实验方法

动物按体重随机数字法分为4组，分别为空白对照组、模型对照组、受试样品低、高剂量组，每组8只。分组后低、高剂量组分别灌胃给予16.7、66.7 mg/mL的受试样品，10 mL/kg，空白和模型对照组均灌胃给予等体积的溶媒玉米油，每日一次，连续30日。末次给药结束后，模型对照组及低、高剂量组一次灌胃给予50%乙醇12 mL/kg，空白对照组给等体积纯化水，建立肝损伤模型。

生化检测指标及组织病理学检查禁食16 h后，腹腔注射60 mg/kg戊巴比妥钠溶液进行麻醉处死动物，各组大鼠分别取出肝脏，其中一部分（左叶）用作冷冻切片，进行病理组织学检查，观察脂滴在肝脏中的分布、范围和面积并进行评分；另一部分用于制成肝匀浆分别测定丙二醛（MDA）、还原性GSH及甘油三酯（TG）含量。

1.5 数据统计处理

采用SPSS 20.0软件对数据进行统计分析，所有数据以x—±SD表示，采用方差分析，比较组间差异。

2 实验结果

受试样品对酒精性肝损伤大鼠的肝组织过氧化脂质降解产物丙二醛（MDA）以及甘油三酯（TG）含量的影响，见表1。

从表1可见，与空白对照组比较，肝损伤模型对照组的MDA、TG含量明显升高，且两者的差异具有显著性（P＜0.05、P＜0.01），表明酒精性肝损伤模型成立。

表1 葛根枳椇软胶囊对肝匀浆MDA、还原型GSH、TG的影响（±SD）

表1 葛根枳椇软胶囊对肝匀浆MDA、还原型GSH、TG的影响（±SD）

注：#、##分别表示与空白对照组比较P＜0.05、P＜0.01；*、**分别表示与模型对照组比较P＜0.05、P＜0.01。

组别 剂量/（mg/kg） 动物数 MDA/（nmol/mg） GSH/（mg/g） TG/（mmol/l）空白对照组 0 8 6.80±1.11 46.25±5.03 1.70±0.418模型对照组 0 8 10.44±2.90# 32.86±7.43## 2.54±0.60##低剂量组 167 8 7.38±1.87* 32.51±5.69 1.90±0.33*高剂量组 667 8 6.94±1.25** 36.07±5.99 1.26±0.22**

受试样品各剂量组大鼠的肝组织MDA含量均低于肝损模型对照组，与肝损模型对照组的差异均有显著性（P＜O.05），表明葛根枳椇软胶囊具有降低乙醇性损伤的大鼠肝组织中过氧化脂质含量的作用。

受试样品各剂量组大鼠的肝组织TG含量均低于肝损模型对照组，且与肝损模型对照组的差异均有极显著性（P＜0.01），表明葛根枳椇软胶囊具有降低乙醇性损伤的大鼠的肝组织甘油三脂（TG）含量的作用。

受试样品对乙醇性肝损伤大鼠的肝组织脂肪变性的影响结果见表2。

表2 葛根枳椇软胶囊对脂滴在大鼠肝脏分布的影响（x—±SD）

从表2可见，肝损模型对照组大鼠的肝组织脂肪变性评分值明显高于空白对照组，两者的差异具有极显著性（P＜O.01），表明肝损模型成立。样品各剂量组大鼠的肝组织脂肪变性评分值均低于肝损模型对照组，且与模型对照组的差异均具有极显著性（P＜0.01），表明葛根枳椇软胶囊具有减轻乙醇性肝损伤的大鼠肝组织脂肪变性的作用。

3 结语

当机体大量摄入乙醇时，乙醇在体内的代谢中间产物乙醛和氧自由基可对肝脏产生危害[5]。摄入大量的乙醇，可使得自由基产生增加，导致肝脏的脂质过氧化，体内与氧化或抗氧化有关的指标，如GSH、MDA等也随之发生相应的改变。此外，乙醇在乙醇脱氢酶的催化下大量脱氢氧化，使三羧酸循环障碍和脂肪酸氧化减弱而影响脂肪代谢，致使脂肪的堆积，导致体内的TG指标升高[6-7]。因此，清除氧自由基、降低肝脏组织脂质过氧化、降低TG含量被视为对肝脏有保护作用的指标[8]。

本研究设定低、高剂量组以检测葛根枳椇软胶囊对乙醇所致的化学性肝损伤的保护作用。实验结果表明，样品低、高剂量都能显著降低体内MDA、TG含量，高剂量组的作用更明显，而对于还原型GSH两个剂量组均无明显改变，说明样品具有抵抗脂质过氧化、降低甘油三脂等保护肝脏的作用。并且样品各剂量组大鼠均能明显减轻乙醇所致肝组织脂肪变性均。综上所述，葛根枳椇软胶囊对大鼠化学性肝损伤具有一定的保护作用。