室内装修污染的遗传毒性及其机制研究
2018-11-07许鹏甄兴厚汪睿辰张习苗刘畅刘红英通讯作者
许鹏 甄兴厚 汪睿辰 张习苗 刘畅 刘红英(通讯作者)
(潍坊医学院生物科学与技术学院 山东 潍坊 261053)
目前,国内外众多学者研究证实家装污染物对人体健康具有极大影响[1],如苯对大鼠脑组织结构和认知功能的影响[2]、甲醛对精子的致畸影响[3]等,但尚缺乏分子遗传学水平的研究探讨以及混合因素对微核率影响的剂量和时间效应的研究数据。
本实验同时观察了家装污染物单一因素及混合因素对微核率的不同影响,探讨了苯、甲醛、氯化铅对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率的影响的分子机制,从而为进一步研究家装污染物对人类遗传物质的影响,以及提出更合理有效的防治措施提供了实验依据。
1.材料和方法
昆明种清洁级小白鼠84只,雌雄各半,体重27~33g,8周龄,由潍坊医学院实验动物中心提供。
随机分组,实验组共12组,包括甲醛组、苯组、氯化铅组及混合组,其中每组各分为高、中、低浓度3组。对照组2组,即生理盐水组、花生油组。所用染毒试剂为0.050mg/ml、0.025mg/ml、0.125mg/ml的氯化铅溶液;1%、0.5%、0.25%的甲醛溶液;以及100mg/ml、50mg/ml、25mg/ml的苯溶液。
实验组采用腹腔注射染毒。每4天一次,共6次,染毒剂量0.002ml/g。各组小鼠分别在第2、4、6次染毒24小时后处死[4],常规制作微核制片[8]后观察计数,微核率以千分率表示[5,7],分别计算雌雄动物微核率的均值,无明显差异可合并计数。利用统计学软件SPSS17.0,以1000个嗜多染红细胞中出现微核的细胞个数为指标,采用单因素方差检验分析,检验水准为α=0.05。各组均数比较采用One-WayANOVA、组间两两比较采用SNK检验、实验组与对照组采用对照样本的t检验。
2.结果
2.1 苯对小鼠微核率的影响
苯对小鼠微核率的影响见表1。结果表明,无论以染毒时间为变量还是以染毒剂量为变量,实验组小鼠的微核率均明显高于对照组(P<0.05),且随着染毒时间的延长和染毒剂量的增加,小鼠微核率呈持续上升趋势(P<0.05)。
表1 苯对小鼠微核率的影响
2.2 甲醛对小鼠微核率的影响
甲醛对小鼠微核率的影响见表2。结果显示,使用甲醛染毒会导致小鼠微核率明显增加,且有时间和剂量效应(P<0.05)。
表2 甲醛对小鼠微核率的影响
2.3 氯化铅对小鼠微核率的影响
氯化铅对小鼠微核率的影响见表3。结果表明,无论以染毒时间为变量还是以染毒剂量为变量,实验组小鼠的微核率均明显高于对照组(P<0.05),且随着染毒时间的延长和染毒剂量的增加,小鼠微核率呈持续上升趋势(P<0.05)。
表3 氯化铅对小鼠微核率的影响
2.4 混合染毒对小鼠微核率的影响
混合染毒对小鼠微核率的影响见表4。结果表明,混合染毒对小鼠的微核率影响效应明显高于单一因素染毒对小鼠的影响(P<0.05),且随着染毒时间的延长和染毒剂量的增加,小鼠微核率呈持续上升趋势(P<0.05)。
表4 混合染毒对小鼠微核率的影响
3.讨论
微核(micronucleus,MC),也叫卫星核,是真核生物细胞中的一种异常结构,是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。微核的产生过程与染色体损伤密切相关[9-10],且出现的频率决定于组织DNA损伤的程度,故可以通过微核率的高低来推测组织畸变情况[11-13]。微核实验是遗传毒理学常用的实验方法之一,可以检测遗传损伤程度,可以通过观察细胞中微核的个数来检测遗传毒物对细胞的损伤程度[9]。已有多项研究表明,在受到了化学诱变剂、生物因素、电离辐射等影响后,细胞的微核率均明显增加[14-17]。故微核试验最大的优点是经济、简单、快速,大量对比试验研究表明该方法在敏感性、特异性和准确性方面,与经典的染色体畸变分析方法基本相当。
本实验以时间、剂量、种类为变量,多角度多层次研究了苯、甲醛、氯化铅对小鼠骨髓细胞微核率的影响。结果显示,随着家装污染物浓度的增加和染毒时间的延长,小鼠骨髓细胞的微核率均明显升高;且混合因素染毒对小鼠遗传物质的损伤程度明显高于单一因素的影响。
该结果提示我们在注重家装材料的美观性以及家具的实用性的同时更应当重视家装材料的环保性。控制和预防家装污染物的毒害,不仅要从法律制度上着手,还要加强绿色环保家装材料的教育宣传,尽可能的减少家装污染物对人们身体健康的危害。