以CLSI EP15-A2指南验证生化分析系统的精密度和正确度

陈振翅 梁婉珍 彭又生

(江门市中心医院检验科，广东 江门 529000)

根据CLSI EP15-A2的评价方案验证本科购置的日立7600生化仪对Urea、UA、Chol三个项目的检测精密度和正确度，探讨EP15-A2指南用于验证配套检测系统精密度和正确度的价值。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1仪器与试剂 仪器选用日立公司生产的7600生化分析仪。试剂盒选择中生北控公司生产的Urea测定试剂盒(批号160761)、UA测定试剂盒(批号160691)、Chol测定试剂盒(批号161441)及配套校准品。

1.1.2正确度验证材料 选用2016年卫生部临检中心常规化学室间质评第三次活动质评物(批号201633,201635)冻干粉(简称C1、C2)。

1.1.3精密度验证材料 选用2016年卫生部临检中心常规化学室间质评第二次活动质评物(批号201621,201622)冻干粉(简称L1、L2)和2016年卫生部临检中心脂类项目室间质评第一次活动质评物(批号201612,201613)冻干粉(简称L3、L4)。

1.2 方法

1.2.1仪器校准和室内质控 每天实验前对Urea、UA、Chol 3个项目进行校准，并测定质控水平，室内质控合格时当天数据方可接受。

1.2.2正确度验证 根据EP15-A2指南每天对同一批C1、C2按项目分别测定2次，重复测定5 d。

1.2.3精密度验证 根据EP15-A2指南每天对L1、L2、L3、L4测定3次，重复测定5 d。

1.2.4对实验室精密度和正确度要求 本实验3个项目的精密度和正确度指标分别参考我国卫生行业标准《临床生物化学检验常规项目分析质量指标》的偏倚(Bias)和变异系数(coefficient of variation，CV)指标，并要求试剂商说明书指标不能大于表1中的要求。

表1 对3个项目CV和偏倚的要求[3]

1.3 统计分析

根据CLSI EP15-A2文件进行评价实验室生化分析系统，使用昆莱公司的质控软件进行统计学分析。具体参考以下公式[4]：

1.3.1精密度验证公式 计算重复性和实验室内标准差S，按CLSI EP15-A2的公式测定L1、L2结果，计算重复性和实验室内标准差S，判断是否符合(不大于)试剂厂家数据，是否通过验证。

1.3.2正确度验证公式

1.3.2.2计算验证区间 设ɑ=0.05，自由度2n-1(2次重复，n批)=2×5-1=9，临界值t0.05，9=2.262，验证区间计算公式为：

2 结 果

2.1 精密度验证结果

本科新购置的日立7600全自动分析生化仪测定Urea、UA、Chol浓度水平精密度均达到了厂家声称的性能，并且均小于我国卫生行业标准，见表2。

2.2 正确度验证结果

Urea、UA、Chol浓度水平测定值均落在厂家设定的范围内，并且均小于我国卫生行业标准的要求，符合分析性能指标。见表3。

表2 三项目检测指标的精密度验证结果

表3 三项目检测指标的正确度验证结果

3 讨 论

3.1 精密度、正确性概念界定

精密度是评价随机误差的指标，批内精密度是指在时间、校准、操作者、仪器等条件一致的前提下获得的精密度，也称之为重复性[6-7]。实验室内精密度是指实验室、设备条件相同，但是操作者、操作时间不同获得的精密度，也称之为总精密度[8]。正确性是反映系统误差的指标，是多次测量(实际操作为10～15次左右的测量)均值与实际值的接近程度，又称之为真实度，用Bia表示[9]。

3.2 据CLSI EP15-A2文件验证精密度和正确性方法

验证原因：检测方法在首次引入实验室内、室间质量评价/能力经验证后未通过时并且实验室采取纠正措施后而实施的，具体实施步骤如下：(1)实验室参考我国行业标准等列出预期的精密度和正确性[10]；(2)实验室所选取的新方法要保证其声称的性能指标达到预期的实验室要求[11]；(3)验证实验室方法对声称性能指标的达标情况，若不能达标，则需要计算达标后是否满足实验室的要求[12]。

3.3 7600生化分析仪精密度、正确性验证结果分析

根据CLSI EP15-A2文件验证7600生化分析仪精密度，测定Urea、UA、Chol浓度水平精密度均达到了厂家声称的性能，提示精密度验证通过，并且厂家声称的性能均小于我国卫生行业标准。Urea、UA、Chol浓度水平测定值均落在厂家设定的范围内，并且均小于我国卫生行业标准的要求，符合分析性能指标，提示正确性验证通过。需要注意的是据CLSI EP15-A2文件验证精密度和正确性仅仅是性能验证，并不能得到精密度和正确性的数据，若要准确数据则需要进行要求更高的确认实验，主要依据CLSI-P5和EP9[13-15]。

综上所述，根据CLSI EP15-A2文件验证7600生化分析仪精密度和正确性是较为可靠的方法，其实验简单方便，适合方法的性能指标的验证，建议推广应用。