高效液相色谱法测定禽蛋中苏丹红残留量

2018-11-02◎苗翠

现代食品 2018年16期

◎ 苗翠

（辽宁省兽药饲料畜产品质量安全检测中心，辽宁沈阳 110016）

苏丹红是一种人工合成的偶氮类、油溶性化工染色剂，在食品中使用具有增色的作用。苏丹红有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ共4种，经毒理学研究表明，其具有造成人类肝脏细胞的DNA突变，具有致癌致突变的特性[1-2]，在我国禁止使用于食品中。由于在目前有不法养殖户为谋取利益在蛋禽饲养中违法添加，导致禽蛋中苏丹红残留的情况时有发生，自2005年起，类似肯德基、亨氏等一些大食品企业在北京、浙江等多省市均出现过苏丹红事件。北京市场上也曾出现“红心鸭蛋事件”，据报道这些红心鸭蛋是由于鸭农在饲料中加入苏丹红Ⅳ造成的[3]。

目前，针对禽蛋中苏丹红残留量检测尚无明确的检测标准，在监管过程中多依据国标GB/T 19681-2005《食品中苏丹红染料的检测方法高效液相色谱法》实施检测[4-5]，但该准标对于禽蛋检测中的阳性样品确证的准确性不足，存在一定风险，难以满足禽蛋中苏丹红残留量检测，本文研究建立了一种采用SDR专用固相萃取柱，回收率高、快捷、灵敏和稳定的适用于禽蛋中苏丹红残留的检测方法，为监管提供了有力技术支持。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

Agilent1100高效液相色谱仪；紫外测器；色谱柱：Athena C18-WP液相色谱柱4.6×150 mm，5 μm；Mettler NE260分析天平；Therom Biofuge离心机；J.Tbaker ASEMD 60固相萃取装置；Buchi V-700旋转蒸发仪；美国Orgaomation公司N-EVAP112氮气吹干仪；Stuart SA8涡旋混合器。

正己烷、丙酮、二氯甲烷、乙腈，均为色谱纯；苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ号标准品，购自Dr.Ehrenstorfer GmbH（苏丹红Ⅰ批号30619、苏丹红Ⅱ批号10615、苏丹红Ⅲ批号20619、苏丹红Ⅳ批号91102）；实验所用鸡蛋均为辽宁省兽药饲料畜产品质量安全检测中心日常检测样品；实验用水为一级水；固相萃取柱为安普公司的sudanred专用柱。

1.2 标准溶液的制备

分别取苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ对照品适量，精密称定，加甲醇溶解配制成苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ 0.1 mg/mL对照溶液。

1.3 样品制备

称取煮熟的蛋黄样品5 g于离心管中，加入10 mL正己烷匀浆5 min，3 000 r/min离心10min，吸取正己烷层，于下层中加入正己烷6 mL匀浆，离心，合并正己烷，加入5 g无水硫酸钠脱水，过滤后待用。固相萃取小柱依次用5 mL二氯甲烷，5 mL正己烷活化，备用液过柱，5 mL正己烷淋洗，5 mL二氯甲烷洗脱，洗脱液于40 ℃下氮气吹干，用流动相1.0 mL定容，0.22 μm滤膜过滤，上机。

1.4 色谱条件

色谱柱：Athena C18-WP液相色谱柱，4.6×150 mm，5 μm；流动相：乙腈∶水（95∶5，V∶V）；流速：1.0 mL/min；紫外检测器：波长500 nm；柱温：35 ℃进样量：20 μL。结果见图1。

图1 苏丹红标准品色谱图

2 结果与讨论

2.1 检出限和定量限的确定

按照1.3要求，取（5±0.5）g鸡蛋样品，分别制备成一系列浓度的苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ样品，按照本方法操作进行，结果显示5 ng/g的苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ样品，其检测图谱定量离子的信噪比总能大于3以上，10 ng/g的苏丹红样品，其信噪比在10以上，且其图谱清晰，分离效果较好，所以将苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ检出限和定量限分别定为5 ng/g和10 ng/g。