浓缩沼液对棉花黄萎病的防治作用及机理

冯自力 ，董泰丽 ，赵丽红 ，付传翠 ，李云卿 ，师勇强 ，冯鸿杰 ，魏锋 ，张东明 *，朱荷琴 *

（1.棉花生物学国家重点实验室/中国农业科学院棉花研究所，河南 安阳455000；2.山东民和生物科技有限公司，山东 蓬莱265600；3.中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室，北京100193）

在中国，棉花黄萎病是由大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）引起的1种土传维管束病害，是棉花产业可持续发展的主要障碍，每年造成巨大的经济损失[1-2]。大丽轮枝菌主要以菌核或分生孢子萌发产生菌丝对棉花进行侵染，其中微菌核是其主要的初侵染源，在没有寄主存在条件下，微菌核可以在土壤中存活10年以上[3]。黄萎病的发病情况有明显的累积效应，在连作地中尤为明显，发病情况与连作年限相关。随着棉花的区域化、集约化种植，棉花黄萎病造成的经济损失逐年增加，其防治是世界性难题。

目前，棉花黄萎病的防治方法有化学农药防治、培育抗病品种[2]、生物防治[4]等。其中，化学农药大量使用造成水体、土壤污染，土壤生物多样性锐减，病原菌产生抗药性等系列问题；培育抗病品种年限较长，黄萎病菌遗传分化严重，品种抗性易丧失；生防菌往往表现为定植能力差，对生存环境要求严格，在大田防治中往往难以取得预期防效。有机肥防治病虫害已经有不少报道，如防治黄瓜枯萎病[5-6]和抑制橄榄黄萎病[7]等，同时有机肥中含有大量的 N、P、K等大量元素及Fe、B、Zn等微量元素，不仅可以改良因长期使用化肥而引起的土壤板结、土壤有机质含量降低等问题，也可以改善因长期耕作而导致的土壤微量元素匮乏、病原菌数量增加等问题[8]，增强植物抗性[9]、增加作物产量[10-12]、为拮抗菌提供营养等。因此，有机肥防治土传病害已然成为1种重要的防治措施[13]。

生产上使用的有机肥大多为固体有机肥，虽然可以有效防治病害，但由于自身局限性不能采用灌根、喷施处理，在作物的生育期各阶段施用。随着大规模集约化养殖业的发展，沼液、沼渣、沼气逐渐进入人们的视野。目前，用沼液喷施、灌溉防治病虫害已有不少报道[14-16]。

棉花专用“新壮态”浓缩沼液（Concentrated biogas slurry）水溶肥是由中国农业科学院棉花研究所与山东民和生物科技有限公司共同研制生产的，主要成分为有机质（2.5%）、腐殖酸（10.2 g·L－1）、全氮（2.8 g·L－1）、硝态氮（1.7 g·L－1），并含有氨基酸及多种微量元素。本研究通过分析该产品对黄萎病初侵染源微菌核和分生孢子萌发的抑制作用，对棉花黄萎病的防治效果及防御相关基因在叶片中表达量的影响等，明确浓缩沼液防治棉花黄萎病的作用机理，为绿色高效防治棉花黄萎病奠定理论基础。

1 材料与方法

1.1 供试材料

浓缩沼液由山东民和牧业股份有限公司提供；试验所用棉花品种为“鲁棉研21”；棉花黄萎病菌株为大丽轮枝菌Vd080，菌种保藏号：CGMCC No.5904，为强致病力菌株，由本实验室保存。

1.2 浓缩沼液对棉花黄萎病菌的抑制效果测定

1.2.1菌落生长速率测定。采用生长速率法[17]：在超净工作台中，将浓缩沼液用灭菌水稀释成不同体积分数，每处理取2mL，与98mL冷却至60℃的马铃薯葡萄糖琼脂培养基 （Potato dextrose agar medium，PDA）混合均匀，倒入灭菌培养皿内，制成含浓缩沼液0.25%（体积分数，下同）、0.50%、1.00%、2.00%、4.00%、6.00%的培养基平板。每处理 4 个平板，空白对照（Control check，CK）用灭菌水代替。在超净工作台中，用打孔器（φ＝5 mm）在活化7 d的Vd080菌落边缘打取菌饼，然后把菌饼接入制备好的培养基平板中心，每个培养皿中接1个菌饼，放入25℃恒温培养箱中暗培养，分别于第5天和第9天采用十字交叉法测量菌落直径，计算各处理菌落直径抑制生长率。菌落生长抑制率（%）=[（对照菌落直径－菌饼直径）－（处理菌落直径－菌饼直径）]/（对照菌落直径－菌饼直径）×100。

1.2.2菌丝形态观察。用插片培养法[18]观察浓缩沼液中挥发性气体对Vd080菌丝形态的影响。将直径为40 mm、高10 mm的无盖培养皿置于直径90 mm、高15 mm的培养皿中，把冷却至60℃的PDA培养基倒入直径为40 mm的培养皿内，冷却凝固后，在培养皿中心处接种新鲜的Vd080菌饼（φ＝5 mm）。在距离菌饼 5 mm处，用无菌镊子取无菌盖玻片，以45°角斜插入培养基内。在直径为90 mm的培养皿内分别加入5 mL体积分数2.00%、4.00%、8.00%的浓缩沼液，以无菌水为对照。25℃暗培养5 d后观察菌丝形态。

1.2.3产孢量测定。参考张芸等[17]将Vd080接种于 Czapek 液体培养基中，25 ℃ 140 r·min－1震荡培养7 d。在超净工作台中，用3层无菌纱布过滤培养液，稀释至分生孢子含量1×107mL－1，备用。

将浓缩沼液稀释成一系列体积分数，每处理取1 mL与24 mLCzapek液体培养基混匀，使浓缩沼液的体积分数为 0.50%、1.00%、1.50%、2.00%、4.00%，每处理 3次重复，分别加入 100 μL的棉花黄萎病分生孢子悬浮液，25℃振荡培养，分别于4 d和6 d用血球计数板计数，计算分生孢子含量和产孢量抑制率。产孢量抑制率（%）＝[（对照分生孢子含量－处理分生孢子含量）/对照分生孢子含量]×100。

1.2.4分生孢子萌发率测定。采用凹玻片悬滴法[19]：棉花黄萎病分生孢子悬浮液用灭菌擦镜纸双层过滤，分生孢子体积分数稀释至1×106mL－1。将浓缩沼液按照一定比例加入到Czapek液体培养基中定容至1.3 mL，分别加入200 μL的分生孢子悬浮稀释液（1×106mL－1）充分混匀，配制成浓缩沼液体积分数为0.25%、0.50%、1.00%、2.00%、4.00%、6.00%、8.00%、10.00%的 Czapek液体培养基，重复3次。吸取20 μL的不同体积分数的Czapek液体培养基于盖玻片上，倒置于凹槽内，用无菌水密封。将凹玻片于25℃恒温保湿培养，3 h后镜检分生孢子萌发情况，每个重复5个视野，对照为Czapek液体培养基，计算分生孢子萌发率和抑制率。分生孢子萌发率（%）＝萌发分生孢子数/分生孢子总数×100，分生孢子萌发抑制率（%）＝[（对照分生孢子萌发率－处理分生孢子萌发率）/对照分生孢子萌发率]×100。

1.2.5微菌核萌发率测定。参考Wang等[20]制备pH 10.0的基础改良培养基 （Basal agar medium modified，BMM）[21]，在培养基表面铺 2 层灭菌的玻璃纸，用1×106mL－1的大丽轮枝菌分生孢子悬浮液涂布，每皿（φ＝90 mm）涂布 100 μL，23 ℃暗培养20 d，备用。将玻璃纸上的菌核和菌丝用盖玻片轻轻刮下，加水剧烈震荡，过筛（φ＝38 μm），充分洗涤，除去菌丝及分生孢子，用移液枪吸取微菌核和水的混合液并移至1.5 mL离心管中。菌核现洗现用。

将浓缩沼液按照一定比例加入到Czapek液体培养基中，充分混匀，使浓缩沼液的体积分数为0.25%、0.50%、1.00%、2.00%、4.00%、6.00%、8.00%和10.00%。将微菌核加入1.5 mL不同体积分数的浓缩沼液稀释液中，25℃ 150 r·min－1振荡培养24 h，在显微镜下观察菌核萌发情况。每个处理重复3次，每次观察100个微菌核的萌发情况。

1.3 浓缩沼液对棉花黄萎病防治效果测定

1.3.1温室喷雾浓缩沼液对棉花黄萎病防治效果测定。将无菌沙子与蛭石以体积比4∶6充分混匀，分装于直径6 cm、高10 cm的无底纸钵中；用50～60℃热水浸泡鲁棉研21号种子6 h后，每钵播种8～10粒，覆盖灭菌沙子厚2～3 cm。棉苗出齐后，每钵留5～6株长势相同的棉苗。在日光温室内，每个处理随机摆放，环境温度控制在25～28℃，土壤相对湿度控制在60%以上，光线良好。

棉苗第1片真叶露尖时，分别用体积分数为0.25%、0.50%、1.00%、2.00%、4.00%、6.00%、8.00%和10.00%的浓缩沼液稀释液对棉苗进行叶面喷施处理，每个处理30 mL，每6钵为 1个处理，每个处理重复4次，清水喷施为对照处理。4 d后，采用无底纸钵蘸菌液法[22]，接种Vd080分生孢子悬浮液（1×107mL－1），每钵 10 mL；接菌 4 d 后，对棉苗进行第2次喷施处理；25 d后根据实际发病情况进行调查，按5级分级标准进行病情指数调查，分级标准参考朱荷琴等[22]的方法，计算病情指数及防治效果。病情指数＝[Σ（各级病株数×相应病级）/（调查总株数×4）]×100；防治效果（%）＝（对照病情指数－处理病情指数）/对照病情指数×100。

1.3.2温室灌根浓缩沼液对棉花黄萎病防治效果测定。采用无底纸培育棉苗，方法同1.3.1，出苗后保留5～6株长势相同的棉苗，当第1片真叶露尖时，用体积分数 0.25%、0.50%、0.75%、1.00%、1.25%、1.50%和1.75%的浓缩沼液对棉花进行灌根处理，每钵16 mL，每6钵为1个处理，每个处理重复4次，清水灌根为对照处理，灌根处理4 d后接菌，接菌4 d后，对棉苗进行第2次灌根处理。25 d后调查病情指数及防治效果，调查方法和计算方法同1.3.1。

1.3.3重病田滴灌浓缩沼液对棉花黄萎病防治效果测定。浓缩沼液滴灌试验于中国农业科学院棉花研究所黄萎病人工病圃内进行。病圃统一施用底肥，2016年 4月下旬播种。于 5月30日、6月 15日、6月 21日、7月 14日、7月 29日和 8月5日对棉花进行灌根处理。其中，根部滴灌设置为4个剂量， 分别为浓缩沼液 （原液）45 L·hm－2、75 L·hm－2、120 L·hm－2、150 L·hm－2，随清水滴灌，对照为清水滴灌，每次滴灌用水量为150 m3·hm－2；每个处理行长3 m，行宽0.6 m，每行留苗 10～15株；每处理3行区，重复4次。

1.4 棉花种子萌发率及生物量的测定

用3%（体积分数）的H2O2浸泡鲁棉研21号种子 30 min，分别用体积分数 0.25%、0.50%、1.00%和2.00%的浓缩沼液对鲁棉研21号浸种处理8 h，再将种子均匀排列在垫有2层纱布的培养皿内，每个处理重复4次，每个重复30粒，置于25℃恒温培养箱保湿培养，3 d后统计萌发率、芽长，并种于灭菌的蛭石中，生长15 d后，分别测定其株高、根长和鲜物质质量。

1.5 棉花叶片活性氧含量观察

对脱绒的鲁棉研21号种子进行表面消毒，方法同1.4，无菌水浸泡12 h后，播种，方法同1.3.1。待2片真叶完全展开后，用1.25%的浓缩沼液进行灌根处理，4 d后接种Vd080，12 h后取样，清水灌根后接菌为对照处理，每个处理重复3次；将处理叶片用无菌水洗净后置于5 mL离心管内，取适量 3，3-二氨基联苯胺（3，3-diaminobenzidine，DAB）染液（1 g·L－1，pH 7.5）加入 5 mL 离心管，将叶片浸泡其中进行染色，室温避光保存8 h；去除染液后，加入95%（体积分数）乙醇去除叶绿素，沸水浴至脱色，用移液枪吸出管内液体，再加入无水乙醇继续水浴直至叶片绿色完全褪去，取出叶片，将叶片浸泡在70%（体积分数）甘油中，叶片软化后赶出气泡，移至载玻片上镜检、拍照，根据褐色沉淀颜色深浅比较活性氧的含量。

1.6 棉花防御基因表达量测定

棉种的处理、培育、0.50%浓缩沼液喷施和1.25%浓缩沼液灌根及Vd080的接种等，参考方法1.3。每个处理6个营养钵，每钵留苗5～6株，重复 3 次。 接种 Vd080 后 12 h、24 h、48 h、72 h和96 h取样。样品冲洗干净后，立即用液氮处理，－80℃冷冻保存，备用。采用RNAprep Pure Plant Kit（TIANGEN）提取棉花叶片总 RNA，检测RNA质量及质量体积分数，并将质量体积分数调制 1 g·L－1；RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit（Thermo）合成 cDNA 第 1条链，稀释 10倍，－80℃冷冻保存。利用Primer premier 5.0软件设计防御相关的过氧化物酶（Peroxidase，POD）、几丁质酶 （Chitinase，CHI）、β-1，3-葡聚糖酶（β-1，3-glucanase，GLU）、 杜松烯合酶 （Cadinene synthase，CAD）、 苯丙氨酸解氨酶（Phenylalnine ammonialyase，PAL）和多酚氧化酶（Polyphenol oxidase，PPO）编码基因的特异性引物，以棉花高度保守的ubiquitin基因为内参，特异引物序列参考卜冰武等[23]，见表1。实时荧光定量聚合酶链式反应 （Quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR）检测基因表达量，数据处理参考张芸等[17]的方法。

1.7 数据统计与分析

数据采用SPSS 17.0软件进行方差分析，采用最小显著差异法进行差异显著性检验 （α＝0.05）。

2 结果与分析

2.1 浓缩沼液对棉花黄萎病菌的抑制作用

2.1.1浓缩沼液对棉花黄萎病菌菌落生长的抑制作用。PDA培养基中加入0.25%～6.00%的浓缩沼液后，随着浓缩沼液体积分数的增加，棉花黄萎病菌的菌落直径逐渐减小；当浓缩沼液体积分数为6.00%时，棉花黄萎病菌的菌落直径为0 cm，生长抑制率达到100%。第9天与第5天测定结果一致（表2）。因此，浓缩沼液在一定体积分数范围内对棉花黄萎病菌具有较好的抑制作用。

表1 防御相关基因特异引物序列Table1 Specific primer sequences of resistance related genes

2.1.2浓缩沼液中挥发性气体对棉花黄萎病菌菌丝形态的影响。通过显微镜观察发现，经体积分数2.00%、4.00%、8.00%的浓缩沼液处理后，Vd080的菌丝明显畸形、断裂（其中4.00%浓缩沼液处理的菌丝形态见图1）。这些变化可能是由于浓缩沼液中某些挥发性气体干扰了菌丝生长及细胞壁合成相关酶的活性，从而导致菌丝畸形、断裂。

2.1.3浓缩沼液对棉花黄萎病菌产孢量的抑制作用。由表3可知，Czapek液体培养基暗培养4 d，对照组（CK）分生孢子含量为 1.55×107mL－1，当加入体积分数0.50%～4.00%的浓缩沼液后，各处理分生孢子含量均低于对照。高于1.50%的浓缩沼液处理分生孢子含量均显著低于对照；其体积分数在2.00%以上时，产孢量抑制率为100.00%。第6天分生孢子含量测定结果显示，除体积分数0.50%处理的产孢量抑制率较低外，其他处理的抑制率均较高（表3）。

2.1.4浓缩沼液对棉花黄萎病菌分生孢子萌发的抑制作用。悬滴法测定结果表明，不同体积分数的浓缩沼液处理Vd080分生孢子12 h后，分生孢子的萌发率显著低于对照，萌发抑制率为21.83%～92.96%，且抑制效果与浓缩沼液体积分数正相关。当浓缩沼液体积分数达10.00%时，分生孢子萌发抑制率为92.96%（表4）。

表2 浓缩沼液对棉花黄萎病菌的抑制作用Table2 Inhibition effect of concentrated biogas slurry on colony diameters of V.dahliae

图1 浓缩沼液对黄萎病菌菌丝形态的影响Fig.1 Effect of Concentrated biogas slurry on mycelia morphology of V.dahliae

2.1.5浓缩沼液对棉花黄萎病菌微菌核萌发的抑制作用。在加入不同体积分数的浓缩沼液Czapek 液体培养基中，25 ℃ 150 r·min－1振荡培养大丽轮枝菌微菌核24 h，对照组微菌核萌发率为98.67%，浓缩沼液处理的微菌核萌发率为2.34%～94.00%，均低于对照。当浓缩沼液体积分数高于0.25%时，微菌核萌发率均显著低于对照（表4）。

2.2 浓缩沼液对棉花黄萎病的防治效果

2.2.1温室叶面喷施浓缩沼液对棉花黄萎病的防治效果。体积分数4.00%和10.00%的浓缩沼液喷雾处理，影响棉花生长，导致叶片萎蔫；而 0.25%～2.00%浓缩沼液喷雾处理后，棉苗长势良好，未受影响。体积分数0.50%的浓缩沼液喷雾处理对棉花黄萎病的防治效果最好，为64.89%；随着浓缩沼液体积分数继续增加，防治效果逐渐降低（表5）。

2.2.2温室灌根处理对棉花黄萎病的防治效果。温室中，不同体积分数的浓缩沼液稀释液灌根处理棉苗对棉花黄萎病的防治效果为49.56%～78.01%。当浓缩沼液体积分数为1.25%时，防治效果最好；当浓缩沼液体积分数低于1.25%时，防治效果与其体积分数呈正相关；当浓缩沼液体积分数高于1.25%时，防治效果随着其体积分数增加而降低（表6）。

图2 浓缩沼液灌根后棉花叶片活性氧爆发情况Fig.2 Concentrated biogas slurry triggered ROS in cotton leaves

表3 浓缩沼液对棉花黄萎病菌产孢量的影响Table3 Effect of concentrated biogas slurry on conidia yield of V.dahliae

表4 浓缩沼液对棉花黄萎病菌分生孢子和微菌核萌发的影响Table4 Inhibitory effect of concentrated biogas slurry on conidia and microsclerotia germination of V.dahliae

2.2.3浓缩沼液滴灌对重病田棉花黄萎病的防治效果。在重病田的调查结果表明，6月28日，浓缩沼液不同剂量处理的棉花黄萎病病情指数均低于对照，但差异不显著；其防治效果为17.86%～31.76%（表7）。7月21日，浓缩沼液不同剂量处理的棉花黄萎病病情指数显著低于对照，防治效果最高达25.16%。3次调查结果表明，浓缩沼液滴灌对棉花黄萎病具有一定的防治效果，且以120 L·hm－2的防治效果最好。

2.3 浓缩沼液浸种对棉花种子萌发率及其生物量的影响

播种后3 d时萌发结果表明，随着浓缩沼液体积分数增大，种子萌发率逐渐增加，芽长呈现先升高后降低的趋势 （浓缩沼液体积分数为1.00%时，芽长最长），与对照均无显著差异（表8）。

播种15 d后，棉苗根长随着浓缩沼液体积分数增大呈先升高后降低的趋势，与对照相比均无显著差异；当浓缩沼液体积分数为2.00%时，株高最高，但与对照相比无显著差异；浓缩沼液处理组，鲜物质质量均高于对照，但与对照差异均不显著。

2.4 浓缩沼液灌根诱导活性氧爆发

图2显示，浓缩沼液灌根处理的棉花叶片中褐色沉淀较多（颜色深），而对照棉花叶片中褐色沉淀较少，表明浓缩沼液可以诱导棉花叶片的活性氧爆发。

表5 温室中浓缩沼液喷雾对棉花黄萎病的防治效果Table5 Control efficacy of concentrated biogas slurry on cotton Verticillium wilt by foliage spray in greenhouse

表6 温室中浓缩沼液灌对棉花黄萎病的效果Table6 Control efficacy of concentrated biogas slurry on cotton Verticillium wilt by irrigation in greenhouse

表7 不同剂量浓缩沼液滴灌对重病田棉花黄萎病的防治效果Table7 Control efficacy of concentrated biogas slurry on cotton Verticillium wilt in field by drip irrigation

表8 浓缩沼液浸种对棉花种子萌发率及其生物量的影响Table8 Effect of Concentrated biogas slurry on seeding germination rate and biomass of cotton

图3 浓缩沼液处理后棉花防御相关基因表达情况Fig.3 Expression levels of defense genes of cotton after treated with concentrated biogas slurry

2.5 浓缩沼液对棉花防御相关基因表达的影响

2.5.1浓缩沼液叶面喷施诱导棉花防御相关基因表达。图3A～E结果表明，喷施0.50%浓缩沼液4 d后再接种Vd080分生孢子悬浮液处理下，棉花过氧化物酶基因、β-1，3-葡聚糖酶基因、杜松烯合酶基因均在接菌后4 d时表达量最高，分别为对照的2.58倍、4.61倍、21.28倍；几丁质酶基因、苯丙氨酸解氨酶基因均在接菌后0.5 d时表达量达到最高，最高表达量分别达到对照的2.85、14.92倍。该结果说明浓缩沼液喷施能激活棉苗的防御体系，增强棉花防御相关基因的表达。

2.5.2浓缩沼液灌根对棉花防御相关基因表达量的影响。图3F～J结果表明，1.25%浓缩沼液灌根处理后，杜松烯合酶基因表达量在0.5 d时为对照的6.16倍，4 d时为对照的 1.52倍；过氧化物、多酚氧化酶基因表达量均在1 d时达到最大，分别为对照的 3.52倍、3.53倍；β-1，3-葡聚糖酶和几丁质酶基因表达量在0.5 d时最大，分别为对照的4.72倍和3.16倍。上述结果表明，浓缩沼液灌根处理，也可诱导棉花相关防御基因的表达。

3 结论与讨论

黄萎病为土传病害，主要以微菌核或分生孢子形式对作物进行侵染，因此其治理策略主要以抑制菌核萌发、分生孢子萌发[5]为主，同时抑制菌丝在植株体内的生长及提高作物对病原菌的防御能力。本研究表明，浓缩沼液可以显著抑制菌核萌发、分生孢子萌发、产孢量；黄萎病菌菌丝生长亦被显著抑制，最高抑制率为100.0%；浓缩沼液内挥发性气体可以使菌丝变形、断裂，菌丝结构发生明显变化；浓缩沼移浸种对出苗率、生物量均无副作用。说明浓缩沼液具有通过熏蒸、灌溉等方法减少土壤中菌核及分生孢子萌发率，从而减少病原基数，降低棉花黄萎病病情指数的潜力。

本研究中，浓缩沼液在温室喷施、灌根及病圃滴灌对棉花黄萎病均有一定的防治效果。其结果与有机肥可以有效防治土传病害[24]，如抑制黄瓜枯萎病[25]、甜瓜枯萎病和茄子黄萎病[5]、橄榄落叶型黄萎病[24]、丝核菌[25]等结果相似。

已有大量研究表明，植物在受到病虫害及不利环境因素，植物通过增加过氧化物酶、几丁质酶、β-1，3-葡聚糖酶、杜松烯合酶、苯丙氨酸解氨酶、多酚氧化酶活性的表达，来增强自身的抗病性。当病菌入侵植物时，过氧化物酶可以产生氧化酚等毒性物质杀死病原菌，同时也参与木质素合成阻止病原菌进一步侵染；几丁质酶和β-1，3-葡聚糖通过降解细胞壁抑制并杀死病原菌；苯丙氨酸解氨酶抗病机制是参与木质素和植保素的合成；杜松烯合酶是棉酚合成的关键酶；多酚氧化酶通过把植物体内相关酚生成醌类，阻止病原菌的侵染。本研究中，浓缩沼液叶面喷施或灌根后，再采用无底纸钵接菌法对棉苗进行接菌（Vd080），与空白对照相比可以大幅提高这些基因的表达量，说明浓缩沼液可以通过诱导部分防御酶基因的大量表达从而增强棉花对黄萎病的抗性。因此，进一步分析其诱导防御基因表达的关键成分及诱导防御基因大量表达的分子机制是非常必要的基础工作。

浓缩沼液是1种以鸡粪为原料，经中温发酵、过滤而得到的液态有机肥。本研究结果表明，浓缩沼液既可以用于叶面喷施，又可以根部滴灌，使用比固态肥更加方便快捷，因此具有较好的应用前景。