乌梅丸治疗溃疡性结肠炎的疗效分析及对T淋巴细胞的影响

孙盟朝，田晶晶，崔莉红

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是一种多病因引起的、免疫介导异常的肠道慢性炎症。起病多为亚急性，多起自直肠，可累及全结肠甚至末段回肠。病变主要局限于黏膜和黏膜下层，呈连续性弥漫性分布。临床主要以腹泻、黏液脓血便、腹痛为主要症状，有病程长、反复发作等特点，严重影响患者的生活质量。临床治疗主要采用氨基水杨酸类、免疫抑制剂、类固醇激素等药物治疗，但治疗周期长，不良反应大，易于复发。中医药能够有效缓解UC临床症状、降低远期复发率、显著改善机体免疫状态，具有疗效明显、不良反用小、安全性高等优点[1]。本研究采用回顾性分析，对60例活动期UC患者进行美沙拉嗪及联合乌梅丸治疗，观察两种治疗方法的临床疗效、复发率、外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的变化及不良反应发生情况，为中西医结合治疗UC提供参考依据。

1 资料和方法

1.1 研究对象 根据《对中国炎症性肠病诊断治疗规范的共识意见》中的诊断标准[2]，收集我院2016年1月—2017年12月住院的已确诊的初发型轻、中度活动期UC患者60例，按照随机数字表法分为联合用药组和美沙拉秦组各30例。联合用药组男13例，女17例；男性患者平均年龄为(46.5±9.1)岁，女性患者平均年龄为(40.6±8.9)岁，平均病程为(63.5±21.4)月。美沙拉秦组男14例，女16例；男性患者平均年龄为(47.3±10.9)岁，女性患者平均年龄为(43.4±6.5)岁；平均病程为(66.3±26.8)月。两组患者在年龄、性别、病程上无统计学差异( P均＞ 0.05)，具有可比性。所有受试对象均签署知情同意书，本次研究已获得医院伦理委员会审核批准。

1.2 研究方法 美沙拉秦组仅给予美沙拉秦肠溶片，即莎尔福(深圳市康哲药业有限公司，批准文号:H20150124)，1.0 g/次，3次/d，三餐前1 h口服；联合用药组在对照组基础上加用中药乌梅丸(由乌梅10 g，细辛3 g，桂枝10 g，黄连10 g，黄柏9 g，干姜10 g，当归10 g，附子6 g，蜀椒10 g，人参10 g组成)口服，将按照规定剂量的中药颗粒剂倒入容器内，加热水( 水温为 80～100℃) 400 mL，充分搅拌。每次200 mL，2次/d，早晚餐后30 min服用。同时依据病情，随症加减：腹部怕冷者加小茴香10 g；神疲乏力者加炙黄芪30 g；便血较著者，加地榆炭20 g；腹泻较重者，加石榴皮10 g治疗。两组疗程均为8周。治疗期间患者均进食高热量、高蛋白、易消化的食物，避免生冷辛辣刺激性食物，少食多餐，并予以静脉营养支持和对症治疗。治疗8周后，两组患者均进行临床表现、结肠镜、外周血T淋巴细胞亚群的检测，同时观察两组在治疗期间不良反应发生情况。

1.3 疗效评价及观察指标

1.3.1 临床疗效评价 参照中华医学会消化病学分会炎症性肠病学组制定的共识意见[3]，缓解指临床症状消失，结肠镜复查见黏膜大致正常或无活动性炎性反应；有效指临床症状基本消失，结肠镜复查见黏膜轻度炎性反应；无效指临床症状、结肠镜复查均无改善。总有效率=[(缓解数+有效数)/总数]×100%。复发指自然或经药物治疗进入缓解期后，便血、腹泻等UC症状再次出现。对治疗有效患者在疗程结束后6个月时进行随访，比较两组患者的复发情况。

1.3.2 改良的Mayo评分 根据《炎症性肠病诊断与治疗的共识意见》[3]的方法进行Mayo疾病活动性评分（具体标准见表1）。评分≤2分且无单个分项评分＞1分为临床缓解，3～5分为轻度活动，6～10分为中度活动，11～12分为重度活动。有效定义为评分相对于基线值的降幅≥30%及≥3分，而且便血的分项评分降幅≥1分或该分项评分为0分或1分。

表1 评估溃疡性结肠炎活动性的改良的Mayo评分系统

1.3.3 外周血T淋巴细胞亚群（CD3+/CD4+/CD8+） 采用美国BD公司生产的FACSCalibur流式细胞检测仪，Diva软件分析，实验试剂为TriTEST CD4/CD8/CD3试剂，材料选用BD Pharmingen流式抗体、PE mouse anti-human CD4、BV510 mouse anti-human CD8、FITC mouse anti-human CD3、 红 细 胞 裂 解 液 lying buffer、TruCOUNT绝对计数管。

1.3.4 不良反应评价 观察两组患者在治疗期间是否出现发热、皮疹、恶心、腹痛、腹泻等不良反应。

1.4 统计学方法 采用SPSS 19.0统计软件对数据进行分析。计量资料以（）表示，组间比较采用两独立样本t检验，治疗前后的比较采用配对t检验；计数资料采用χ2检验或Fisher精确检验，P＜0.05有统计学差异。

2 结果

2.1 临床疗效评价 联合用药组30例患者中缓解21例、有效7例、无效2例，总有效率为93.3 %；美沙拉秦组30例患者中缓解17例，有效5例，无效8例，总有效率为73.3 %。联合用药组明显高于美沙拉秦组，差异有统计学意义(χ2=4.32，P ＜0.05)，具体结果见表 2。

治疗结束后6月，对两组治疗有效的患者进行随访，了解复发情况。部分患者由于无法取得联系（3人）、不愿坚持随诊（4人）、因自身原因不能来医院（2人）、迁至外地居住（1人）失访。联合用药组随访28例，随访率93.3%，症状复发者4例，复发率14.3%，美沙拉秦组随访22例，随访率73.3%，症状复发者9例，复发率40.9%，两组复发率比较，差异有统计学意义(χ2=4.54，P ＜0.05)，具体结果见表 3。

表2 两组患者临床疗效比较 (n，%)

表3 两组患者复发率的比较（n，%）

2.2 Mayo疾病活动指数评分 治疗前两组患者疾病活动指数无统计学差异（P＞0.05），治疗后联合用药组Mayo疾病活动指数评分由（6.47±2.08）降至（1.03±1.00），美沙拉秦组由（7.17±2.10）降至（2.10±1.39），差异均有统计学意义 (P ＜0.05)。联合用药组治疗后疾病活动指数低于美沙拉秦组，差异有统计学意义(P＜0.05)，具体结果见表4。

表4 两组患者治疗前后Mayo评分（± s，分）

表4 两组患者治疗前后Mayo评分（± s，分）

注：与治疗前比较，aP＜0.05；与美沙拉秦组比较，bP＜0.05

组别 n 治疗前 治疗后联合用药组 30 6.47±2.08 1.03±1.00a、b美沙拉秦组 30 7.17±2.10 2.10±1.39a

2.3 外周血T淋巴细胞比较 治疗前，两组患者外周血T淋巴细胞各项指标均无统计学差异(P＞0.05)。治疗后，两组患者外周血CD3+、CD4+细胞百分比及CD4+/CD8+比值均高于治疗前，CD8+细胞百分比低于治疗前，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。联合用药组患者经治疗后，CD4+细胞百分比及CD4+/CD8+比值均高于美沙拉秦组，CD8+细胞百分比低于美沙拉秦组，差异均具有统计学意义(P＜0.05)，具体结果见表5。

表5 两组患者治疗前后外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞百分比(，%)

2.4 不良反应评价 治疗期间，两组患者均未出现发热、皮疹、恶心、腹痛、腹泻等不良反应。

3 讨论

中医无UC之病名，根据其主症可归属于“泄泻”、“痢疾”等范畴，其主要病位在肠，与肝脾肾密切有关，多由外邪侵袭、情志失调、饮食不节、或劳倦内伤，素体虚弱导致脾胃运化失常，湿热下注大肠，脉络瘀阻而发病，病久则伤及肾元，致脾肾两虚。本病多为虚实夹杂，本虚标实之证，多以脾胃虚弱、脾肾阳虚、肝郁脾虚为本，外感六淫、饮食不节、情志失调为标，治疗以平调寒热、温补脾肾、止泻止痢为主[4]。目前临床上多以西药治疗UC为主，但疗程长、病情易反复，而中药联合治疗可提高总有效率、降低复发率，因此中西药联合治疗UC已日渐受到临床的认可。

乌梅丸出自张仲景的《伤寒论·辨厥阴病脉证并治篇》，由乌梅、附子、干姜、黄连、当归、黄柏、细辛、桂枝、人参、蜀椒10味药物组成，止痛安蛔的要方。方中蜀椒、干姜、人参乃大建中之主药，大建中脏之阳，干姜、黄连、黄柏、人参寓泻心之意，具平调寒热之效；附子、干姜，乃四逆汤之主药，有回阳救逆之功。诸药相合，共奏收敛止泻，平调寒热之功效，对寒热错杂之久泻、久痢亦有显著疗效，是临床上治疗UC的常用方剂。本实验结果表明，两组UC患者治疗后Mayo疾病活动指数评分均较治疗前下降，且联合用药组治疗后活动指数评分明显低于美沙拉秦组，差异均有统计学意义(P＜0.05)。此外，联合用药组患者治疗后总有效率明显高于美沙拉秦组，而半年后复发率明显低于美沙拉秦组，差异均有统计学意义(P ＜0.05)。

多项研究表明[5-6]，乌梅丸能够通过修复黏膜上皮、抑制细胞凋亡、减轻炎症反应、免疫调节、改善胃肠道功能等机制治疗UC。细胞因子在UC发病中的作用已得到公认[7]，乌梅丸在上调抗炎细胞因子如IL-10、IL-13的同时，还能降低UC大鼠结肠组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8等促炎细胞因子的含量，从而恢复肠道正常的免疫功能，减轻炎症反应[8-10]。一项多中心、单盲、随机对照研究表明[11]，单用美沙拉秦缓释片及美沙拉秦肠溶片治疗活动期UC患者，总有效率分别为63.33%和66.94%，单用5-氨基水杨酸维持治疗UC的复发率为44.64%[12]，而采用乌梅丸为主方的配方颗粒口服联合灌肠对UC患者治疗1个疗程后，总有效率达93.9%，腹痛、腹泻及黏液脓血便明显改善，症状积分较治疗前明显下降[13]，与本研究结果一致。伍学兵[14]单用美沙拉秦治疗UC的有效率为74.29%，显著低于联合乌梅丸治疗的有效率94.29%，与本研究结论一致；且联合用药组IL-1G、TNF-a、CRP等炎症指标均较对照组明显改善。

此外，近年来普遍认为UC的发病与机体免疫异常及变态反应有关。T淋巴细胞在机体免疫应答中负责抗原递呈，同时也是重要的免疫调节剂。根据T淋巴细胞表面分化抗原的不同，可将其分为CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群。CD4+为辅助性T细胞亚群，具有调节免疫反应的活性，辅助和诱导其他免疫细胞发挥免疫作用；CD8+为细胞毒性T细胞亚群，它能清除产生特殊抗原反应的目标细胞。T淋巴细胞各亚群之间的数量和比值改变可反映机体细胞免疫功能的变化。UC患者的T淋巴细胞在抗原刺激下表现为亚群间比例失衡，进一步导致其他炎症细胞、细胞因子和炎症介质的异常，最终造成肠道黏膜炎症和组织损伤，这可能是UC的发病机制之一。国外有研究表明[15-16]，CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群比例失调与促炎因子IL-6、IFN-α及C反应蛋白相关，而且T淋巴细胞的活化和血清炎症标志物的升高与UC的病情密切相关。国内研究也发现[17]，UC患者外周血中CD3+、CD4+细胞百分比和CD4+/CD8+比值较正常对照组明显降低；而CD8+细胞百分比高于正常人群，且与CRP、血沉呈明显正相关，差异均有统计学意义[18]。本实验结果显示，两组患者在治疗后，外周血CD3+、CD4+细胞百分比及CD4+/CD8+比值均高于治疗前，CD8+细胞百分比低于治疗前；疗程结束后，相较于美沙拉秦组，联合用药组患者CD4+细胞百分比及CD4+/CD8+比值明显增高，CD8+细胞百分比明显降低，差异均具有统计学意义(P＜0.05)，此结果与国内外研究结论一致。

以上研究结果显示，乌梅丸和美沙拉秦联用治疗活动性UC疗效显著，能够有效控制疾病活动期症状，促进肠道黏膜的愈合，降低复发率，并且能够通过调节UC患者外周血T淋巴细胞亚群的比例改善细胞免疫状态，无明显不良反应，值得临床推广应用。