不同品种菊花总黄酮的含量比较
2018-10-24刘茂泉
摘 要:菊花有很好的药用和食用价值,在杭州也算特产,桐乡的种植面积较大。本文以杭州万向学院花圃采摘的九种菊花品种为实验材料,研究九种菊花的总黄酮含量,比较每个菊花品种的质量差异,为制定菊花的相关质量标准提供相应的理论参考,为选育菊花的优良品种提供科学依据。
关键词:不同品种菊花;总黄酮;含量比较
菊花,Dendranthema morifolium(Ramat. )Tzvel. 为菊科菊属多年生的宿根草本植物,是中国的传统花卉,有极高的观赏价值,也具有很高的药用价值。临床上多用于治疗风热感冒、头晕目眩、眼目昏花、目赤肿痛等疾病。除此之外菊花还具有抑菌消炎、调节免疫系统、抗疲劳等作用,近年来的新发现菊花对肝的保护作用、镇痛作用。黄酮成分具有抗衰老和抗菌抗病毒作用。
1.药用菊花的化学成分
菊花中的有效成分主要包括三类:黄酮类、挥发油、多糖等。随着近几年检测方法以及提取工艺的提高,对于菊花的黄酮类成分研究越来越深入。从菊花中已经分离得到的黄酮类成分有香叶木素、香叶木素 7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素、金合欢素7-O-β-D-葡萄糖苷、金合欢素 7-O-(6″-O-乙酰)-β-D-葡萄糖苷、金合欢素、木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素和异泽兰黄素。
2.菊花的总黄酮测定方法构建
2.1建立菊花的种质资源圃
菊花是药材,广泛应用于医药和生活等方面,本次研究的菊花样品是我院花圃种质资源圃中选取9个不同菊花花序的品种,进行总黄酮的测定,相对来说贮藏时间较短,成分较为完整。先是菊花杀青1分钟,然后放入烘箱干燥再粉碎,然后装袋标记。
2.2 菊花总黄酮的测定方法
不同栽培类型的品种中的菊花总黄酮含量存在明显的差异,因此采用高效的提取工艺是非常重要的。通常采用回流提取法、超声提取法和60℃水温恒温萃取法。除了这些提取方法还有一些别的提取方法,如索氏提取法、超临界流体提取法等等,而方法的选择是根据测定的化学成分而定的。测定总黄酮的最佳方法就是超声提取法。相比普通的回流提取更加节能、省时、高效等优点。
2.3 仪器与试药及菊花品种
紫外-可见分光光度计;精确到0.0001g的电子天平;芦丁对照品。1%氢氧化钠溶液,10%硝酸铝溶液, 5%亚硝酸钠溶液,70%乙醇溶液。所用的水均为蒸馏水,试剂均为分析纯。采集品种有锦菊1号(区试)、早小洋菊(区试)、金菊3号(区试)、金丝黄菊、婺源黄菊、大洋菊、金菊1号、小黄菊、早小洋菊。
2.4 定制标准曲线
首先要将芦丁对照品配成溶液浓度为0.1992mg/ml。精密称取芦丁对照品0.0996g,用无水甲醇溶解,转移入50ml容量瓶中,用无水甲醇定容至50ml刻度线,摇匀。精确移取5.0ml到50ml容量瓶中,用无水甲醇定容到50ml,摇匀。准确吸取该芦丁对照品溶液0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5ml分别移入10ml的容量瓶中,加甲醇至3.5ml,先加入5%亚硝酸钠溶液0.5ml,摇匀,放置6分钟后再加入10%硝酸铝溶液0.5ml摇匀,放置6分钟,最后加入1%氢氧化钠溶液5ml,摇匀,用水定容至10ml刻度线,放置12分钟后,以空白溶液(不加芦丁对照品,直接用无水甲醇)为参比,在波长510nm出测吸光度,得到方程式:Y=10.129C-0.0065(r=0.9992)。线性范围:0.212~0.742mg/ml。
2.5样品液的制备
实验所需的试液都要提前准备。取药材0.2500±0.0010g,精确称定重量,放入具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇25ml,密塞,称定重量,并记录,超声处理40分钟,放置冷却,再称定重量,用70%乙醇补足损失的重量,再摇匀,过滤,取续滤液1ml,用70%乙醇定容于10ml容量瓶至刻度线,从中取3.5ml,移入10ml的容量瓶种,分别加入5%亚硝酸钠溶液0.5ml,摇匀,放置6分钟后分别加10%硝酸铝溶液0.5ml摇匀,放置6分钟,再分别加1%氢氧化钠溶液5ml,摇匀,用水定容至10ml刻度线,放置12分钟后,以空白溶液(不加菊花超声过滤的续滤液,用70%乙醇代替)为参比,在波长510nm出测吸光度。并记录数据。
2.6重复性实验
精密称取同一样品2份,按含量测定方法,重复测定总黄酮的含量,结果RSD小于5%,实验重复性良好。
3.数据分析
每一种样品是称取2份做重复性实验,测定数据分别为重复1、重复2。结合重复1、重复2的数据RSD小于5%则为合格,并记录,若数据RSD大于5%则为不合格,样品需要重复实验,表格中的数据均为重复性实验合格。测定结果见表。
%,去掉最高值最低值,中间水平大约在7.2281%之间。其中每个品种都做了2份重复性实验,达到重复性合格才放到表格之中。
4.总结
所有样品的总黄酮含量在5.3899 %~9.6367%之间,以婺源黄菊最高,小黄菊最低,锦菊1号(区试)、早小洋菊(区试)、婺源黄菊、金菊1号、早小洋菊在7%以上,通過本研究,得出婺源黄菊的总黄酮含量上较有优势,为选育高总黄酮菊花的优良品种提供科学依据。
参考文献:
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作者简介:
刘茂泉(1968、2--),男,汉族,浙江杭州人,讲师,硕士,主要从事园艺植物生产技术研究。