微柱凝胶技术在新生儿ABO溶血病输血前检验中的应用

鲍瑞玲，王 闪

新生儿溶血病 （hemolytic disease of newborn，HDN）是母婴间血型不合引起的同族血型免疫反应，胎儿遗传了母体缺少的红细胞血型抗原，抗原通过胎盘侵入母体后刺激母体产生免疫抗体，抗体通过胎盘绒毛膜进入胎儿血循环，产生免疫应答反应，破坏红细胞引发溶血，以ABO血型不合最为多见［1］。ABO溶血病新生儿因体内红细胞被破坏会伴有不同程度的贫血，严重者可选择输血改善症状［2］，为避免血型不适加重溶血，出现严重并发症，输血前对患儿进行交叉配血检测十分重要。因为HDN患儿全部次侧交叉配型均不合，只行主侧交叉配血［3］。目前，HDN患儿实验室血清抗体检查主要有三项试验，即直接抗人球蛋白试验 （direct antiglobulin test，DAT）、游离抗体试验及抗体释放试验，抗体释放试验为确诊试验［4］。笔者在ABO溶血病患儿输血前采用微柱凝胶配血法 （micro－column gel test，MGT）进行检验，观察检验效果，探究其临床价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择笔者所在医院2017年5月—2018年1月收治的ABO溶血病新生儿40例作为研究对象，患儿血清胆红素水平迅速上升，发生黄疸，黄疸消退后出现严重贫血。其中男26例，女14例；平均日龄（2.5414±0.72） d；平均出生体重（3.21±0.98） kg。

1.2 方法 （1）对所有母亲及婴儿进行血型鉴定。（2） 使用聚凝胺配血法 （manual polybrene test，MPT）进行主侧交叉配血：采集患儿血样，与标准同型红细胞血样分别进行配血。取试管1只加入患儿血清或红细胞放散液2滴，配型红细胞悬液1滴，低离子介质 （low ionic medium，LIM）0.7 ml混合均匀，再加入聚凝胺溶液2滴混合均匀，用专用离心机离心10 s（1000 g离心力），倒掉上清液，轻轻摇动试管，观察红细胞是否凝集，无凝集重做。凝集后加入重悬液2滴，混合后观察结果。（3）应用MGT进行主侧交叉配血。采集患儿血样，准备微柱凝胶试剂卡做好标记，将血样分别加入凝胶试管中，用专用离心机离心 5 min （900 r/min，2 mn；1500 r/min，3 min）后取出观察结果。（4）对患儿行DAT、游离抗体试验及抗体释放试验。

1.3 统计学分析 运用SPSS 16.0软件对相关数据进行分析，计数资料用率（%）表示，行χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 母婴血型鉴定结果 患儿血型A型23例（57.50%），B 型 17 例（42.50%），母亲均为 O 型，患儿及其母亲Rh D血型均为阳性。

2.2 交叉配血及三项试验结果 40例患儿采用MGT、MPT进行的主侧游离血清及红细胞放散液交叉配血共200次。MPT为阳性时MGT均为阳性，MGT血清及放散液出现不合次数明显多于MPT（P＜0.05），见表 1。

2.3 交叉配血与DAT结果 DAT阴性时MPT血清及放散液均未能检出阳性，MGT血清及放散液检出部分阳性，且使用MGT时DAT阳性血清及放散液不合率（86.25%、75.00%）高于 DAT 阴性（65.00%、53.33%）（χ2=11.128、9.564，P＜0.05），见表 2。

3 讨论

发生ABO溶血病时以母亲血型O型，胎儿A、B型多见［5］，血型为O型者具有较多的抗A或抗B免疫球蛋白抗体，因A抗原较B抗原抗原性强，因此胎儿A型者患病概率更大［6］。该研究中血型鉴定结果显示，母亲均为O型，患儿A型（57.50%）多于B型（42.50%）。为避免加重溶血反应，ABO溶血病患儿输血前需进行血型免疫性抗体检测。MGT的本质是血凝试验，将抗原抗体反应与凝胶分子筛技术结合，抗原抗体在凝胶介质中可发生肉眼可见凝集反应［7］。该试验相较于MPT用时短，操作便捷。有研究显示，MGT在红细胞血型不规则抗体检测中相较于其余几种不同方式，对Rh系统红细胞不规则抗体的敏感度最高［8］。该次研究将MGT应用于ABO溶血病患儿输血前检验亦取得良好的效果。

表1 交叉配血及三项试验结果

表2 交叉配血与DAT结果

DAT可检测出患儿红细胞表面的不完全抗体，阳性结果提示患儿红细胞被抗体致敏［9］。该次研究三项试验结果中，DAT阳性率最低，因为ABO溶血病时，患儿结合足够抗体的红细胞大部分已被溶解，剩余红细胞上结合抗体数目较少，不足以产生明显凝集反应。游离抗体试验检测的是血清中游离抗体，阳性提示存在抗体但不一定致敏［10］。抗体释放试验是三项试验中敏感度最高的，该次研究中所有抗体释放试验结果均为阳性。从表1可知MGT血清及放散液出现不合次数明显多于MPT，MPT为阳性时MGT均为阳性，说明MGT敏感度高于MPT。但MGT中仍存在阴性，因为患儿红细胞抗原表达强度存在个体差异，且机体代谢变化不同，所以对交叉配血结果的准确性造成了干扰［11］。这也说明临床中不能单一以交叉配血阴性为标准，应配合其他项检查综合考虑最终确定输血方案。从表2可知，DAT阴性时MPT血清及放散液均未能检出阳性，MGT血清及放散液检出部分阳性，说明MGT在DAT阴性情况下敏感度比MPT高。使用MGT时DAT阳性血清及放散液不合率高于DAT阴性，说明MGT结果受红细胞表面的不完全抗体分子数影响。

综上所述，MGT在ABO溶血病新生儿输血前检验中相较于MPT灵敏度高且具有方便快捷等优点，可以为患儿输血方案的选择提供参考信息，值得临床推广。