羊茅属3份种质材料种子萌发期的耐盐性比较

李瑞静，石凤翎 ，谷 蕊，崔宇豪

(内蒙古农业大学草原与资源环境学院，内蒙古 呼和浩特 010019)

1 引言

盐碱地上盐度是影响植物生存、生长和繁殖的重要环境因子，在草坪上的具体表现就是造成泛斑、春季发芽晚、秋季早衰、生长不良等，影响草坪的美观，降低草坪的价值〔1〕。因此筛选和利用耐盐性坪用草变得尤为重要。

在我国常见的冷季型坪用草有草地早熟禾 (Poapratensis)、多年生黑麦草(Loliumperenne) 、苇状羊茅(Festucaarundinacea)、匍匐翦股颖(Agrostispalustris)、紫羊茅(FestucarubraL.)等，其中耐盐耐旱的坪用草种的开发利用研究较少。达乌里羊茅(Festucadahurica(St.-Yves) V.I. Krecz. &Bobrov)生于典型草原带的沙地及沙丘上，为禾本科多年生密丛型、沙生旱生植物。其植株低矮、叶窄、坚韧光滑等，可望作为耐旱坪用草种进一步开发利用。目前国内外对其研究少有报道。

一般耐旱性强的植物也具有一定的耐盐能力。因此，为了解羊茅属3份种质材料的耐盐性，在种子萌发时期，采用不同浓度的Nacl溶液进行胁迫处理，通过种子活力变化，综合评价获得耐盐性强的种质材料，为耐盐坪用草的选择育种奠定基础。

通过xt以及窗宽W采用式(3)对脉冲信号的形心进行初始定位，得到形心Xc.同时基于xt以及窗宽W计算其中位数Xm=median([xt xt+1…xt+W]),计算形心Xc和Xm的差值d=Xc-Xm，并根据差量与临界值ɛ的关系对形心计算结果进行修正得到Xnew

2 材料和方法

2.1 材料

羊茅属3份种质材料分别为达乌里羊茅、紫羊茅、紫羊茅-梦神(以下简称“梦神”)。达乌里羊茅2007年采集于浑善达克沙地，经多年驯化栽培，2017年收获于海流和沙尔沁基地；紫羊茅采集于辉腾锡勒草原的野生种质材料，与达乌里羊茅一同栽培驯化，详见表1。

表1 试验材料来源 Table 1 sources of test materials

2.2 方法

用模糊数学隶属函数法进行盐胁迫综合评价，公式为:X(μ)=(X～Xmin)/(Xmax～Xmin)，式中X为参试植物某一盐胁迫指标的测定值，X max为该指标中的最大值,X min为该指标中的最小值。先求出各材料各耐盐指标在不同盐胁迫下的隶属值，然后把每一指标下的隶属值累加求平均值，最后再将每一材料各耐盐指标的隶属值累加，求其平均值。通过比较各材料的耐盐隶属值的总平均值大小，确定各材料耐盐性的强弱。

3. 治疗方法：Lysholm评分60分以下、MRI显示有半月板损伤Ⅲ级以上的进行关节镜手术(52例)；60分以上者保守治疗(928例)。(1)保守治疗。主要为固定制动、药物治疗、关节穿刺抽液、物理疗法、中医针灸疗法以及功能锻炼。(2)手术治疗。腰部麻醉或硬膜外麻醉下，仰卧位，患肢用气囊止血带，取膝前内或前外侧入路，插入关节镜，按序检查整个关节腔，然后对内外侧半月板行全面探视，包括半月板上下面、前后角、体部及游离缘和附着缘，详细记录半月板形态、损伤部位大小及损伤形态，选择合适的手术方法。

发芽势 Gr=n/N×100% (式中n为8d后种子的发芽率，N为供试种子数)

发芽率 G=n/N×100% (式中n为14d后发芽种子数，N为供试种子数)

相对发芽率(%)=处理种子发芽率/对照种子发芽率×100%

从种子置床之日起开始观察, 每天定时记录每个培养皿内种子萌发数量，萌发结束后(萌发末期连续3d种子萌发粒数不足1%)，第8d统计发芽势，第14d统计发芽率。

相对活力指数(%)= 处理种子活力指数/对照种子活力指数×100%

相对发芽势(%)=处理种子发芽势/对照种子发芽势×100%

由图2可知，Nacl浓度为0.4%时达乌里羊茅发芽势与对照的发芽势无显著变化，而另2份材料的发芽势显著降低。Nacl浓度为0.4%-0.8%时达乌里羊茅发芽势显著高于另2份材料。由此进一步说明达乌里羊茅的耐盐力强于另2份材料。

相对发芽指数=处理种子种子发芽指数/对照种子发芽指数×100%在活力指数VI=Gi×S(式中：S表示幼苗的平均质量)

发芽受损率(%)=(对照发芽数量-处理发芽数量)/对照发芽数×100%

@春风过柳绿如缲：有关部门好好查一查，把赚到的赔偿金都弄到哪里去了?还有音集协收了钱真的交版权费了吗？

[9]〔德〕弗里德里希.卡尔.冯.萨维尼.历史法学派的基本思想[M].郑永流，译.北京：法律出版社，2009.

冰碛湖溃决风险评价指标体系大致可分为定性、半定量和定量三类。王欣根据McKillop等在筛选冰碛湖溃决参数时把评价指标分为冰碛湖参数、冰碛坝参数、母冰川、冰湖盆参数以及它们之间相互关系的思想，归纳得出冰碛湖溃决风险评价指标如表 1。

发芽试验方法参照GBT 2930.4-2001 《牧草种子检验规程》发芽试验〔2〕，胁迫试验采用纸上法，分别加入等量体积比分别为0.4%、0.8%、1.2%、1.6%、2.0%的Nacl溶液进行胁迫，以蒸馏水为对照。每个梯度3次重复，每次100粒。种子用0.1%的升汞进行消毒，之后用流水冲洗3-5次，常温自然光下培养14d，逐日记录发芽个数。

2.3 数据统计分析

数据使用Microsoft Excel录入并绘制柱状图、折线图。采用The SAS System for Windows9.0(简体中文)软件的GLM过程进行方差分析，Duncan进行多重比较。

3 结果与分析

3.1 Nacl胁迫对羊茅属3份材料种子发芽率的影响

不同浓度的Nacl溶液对羊茅属3份材料种子发芽率均具有抑制作用(图1)。其中在浓度为0.4% 的Nacl胁迫下达乌里羊茅与梦神的发芽率并无显著变化，而紫羊茅发芽率在此浓度下显著下降，至0.8%浓度后发芽率达到10%以下；当Nacl浓度增至0.8%时梦神的发芽率仍无显著性变化，而达乌里羊茅发芽率显著下降，且与梦神的发芽率无显著差异；在浓度为1.2%-1.6%的Nacl胁迫下达乌里羊茅的发芽率显著高于另2份材料，增至2%时，达乌里羊茅和梦神的发芽率亦降至10%以下。从Nacl胁迫下发芽率的结果初步分析说明3份材料的耐盐强弱顺序为达乌里羊茅>梦神>紫羊茅。

图1 羊茅属3份材料种子在不同浓度Nacl溶液下的发芽率(注：字母表示0.01水平下的差异显著性，下同)Fig. 1 Germination rate of three Festuca seeds in different concentrations of NaCl solution

3.2 Nacl胁迫对羊茅属3份材料种子发芽势的影响

发芽指数 Gi=∑Gt/Dt (式中Gt为在时间t日的发芽个数；Dt为相应的发芽日数)

图2 羊茅属3份材料种子在不同浓度Nacl溶液下的发芽势Fig. 2 Germination potential of three Festuca seeds in different concentrations of NaCl solution

3.3 Nacl胁迫对羊茅属3份材料种子发芽指数的影响

由图3可知，在 0.4%时达乌里羊茅发芽指数与对照间无显著变化，而在此浓度下的紫羊茅与梦神的发芽指数均显著下降。Nacl浓度为0.8%时达乌里羊茅及梦神之间无显著性差异，而浓度增至1.2%-1.6%时达乌里羊茅的发芽指数显著高于另2份材料。与上述两指标所得结果一致。

图3 羊茅属3份材料种子在不同浓度Nacl溶液下的发芽指数Fig. 3 Germination index of three Festuca seeds in different concentrations of NaCl solution

3.4 Nacl胁迫对羊茅属3份材料种子活力指数的影响

Nacl胁迫对羊茅属3份材料种子活力指数均具有明显抑制作用(图4)，主要表现为盐胁迫后幼芽长势变弱。Nacl浓度在0.4%-1.2%下达乌里羊茅的活力指数均显著高于另2份材料，增至1.6%后三份材料的活力指数均降为0.5以下。

图4 羊茅属3份材料种子在不同浓度Nacl溶液下的活力指数Fig. 4 Vigor index of three Festuca seeds in different concentrations of NaCl solution

3.5 Nacl胁迫对达乌里羊茅种子萌发进程的影响

由图5可知，随Nacl胁迫强度的增加，其种子开始萌发时间延迟。从置床第6d开始萌发且0.4%浓度下发芽个数高于对照，至第8d后日发芽个数趋于稳定；0.8%浓度下的萌发时间延迟1d ，至第11d后日发芽个数趋于稳定；1.2%-1.6%浓度下的萌发时间分别延迟3d和4d，其日发芽个数逐日增加，但幼芽长势却很弱。2%浓度下的萌发时间延迟6d，至14d时其萌发种子数仅4粒。

图5 不同Nacl浓度下达乌里羊茅种子萌发进程Fig. 5 Seed germination process of F.dahurica (St.-Yves) V.I. Krecz.&Bobrovv under different NaCl concentration

3.6 羊茅属3份材料种子耐盐性的综合评价

用模糊函数隶属法对 3份材料的相对发芽率、相对发芽势、相对发芽指数相对活力指数进行了综合评价,得到3份材料的隶属函数总平均值。由表2可知, 羊茅属3份材料种子耐盐性强弱表现为：达乌里羊茅>梦神>紫羊茅。

表2 羊茅属3份材料种子耐盐指标隶属值及耐盐性综合评价Table 2 Membership value of salt tolerance index and comprehensive evaluation of salt tolerance of 3 materials of Festuca L.

(注：同一列字母表示0.01水平下的差异显著性)

1)波速大小与冲击危险性的关系。波速大小与介质类别及密实程度密切相关，对于同一种介质而言，加载应力越大，介质的密实程度越高，波速越快。冲击地压是煤矿开采过程中煤岩体在采动支承压力、构造应力等作用下突然释放弹性能的现象，应力集中程度越高，冲击危险性也越大，反应在波速上就表现为波速越高，冲击危险性越大。

4 讨论

4.1 Nacl胁迫对羊茅属3份材料种子萌发的影响

盐分通过降低植株体内水势、产生离子毒害和影响离子吸收平衡来抑制植物生长〔3〕。随着Nacl溶液浓度的提高，羊茅属3份材料种子发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数整体均呈现下降趋势。这一结果充分证实盐分对非盐生植物最普遍和最显著的效应是阻止生长〔4〕。当Nacl溶液浓度为0.4%时，达乌里羊茅发芽势高于对照，起到“引发”的作用，但另2份材料在各盐浓度下的活力均低于对照。王娜等〔5〕研究表明: 盐浓度为0%～0.4%时对4种冷季型草坪草种子发芽有促进作用，与达乌里羊茅试验结果一致。而紫羊茅及梦神在本试验中未出现此现象的原因可能为：紫羊茅、梦神对Nacl溶液敏感，本试验Nacl溶液浓度梯度设置过大。尹卫等〔6〕研究表明，当盐浓度为300mmol/L(1.8%)时，紫羊茅种子失活，发芽率为零，与紫羊茅试验结果相近。当Nacl溶液浓度高于0.8%时，胁迫作用明显加剧，种子活力、发芽速度及生长势明显下降；Nacl胁迫下，达乌里羊茅种子萌发进程延缓，萌发延迟，在一定程度上反映出其对不同浓度Nacl溶液的适应〔7〕。

贵重的礼物老师或许不能接受，但是送几支红笔聊表心意却是非常合适的。身为老师，批改作业的时候难免用到红笔。所以说红笔是最合适不过的礼物了。

4.2 羊茅属3份材料种子萌发期耐盐性综合比较

有研究结果表明，不同草坪草或草坪草品种间耐盐性存在差异〔8-10〕。 在同一盐浓度下，不同品种对盐的响应不同，反映了不同品种间耐盐性的差异，耐盐性较强的种子，其相对发芽率、相对发芽势较高。因此，相对发芽率、相对发芽势可以作为种子耐盐能力评价指标〔11〕。利用隶属函数法求出耐盐性综合评价值，可以简单准确地对品种间耐盐性进行综合评价。本试验对羊茅属3份材料种子的相对发芽势、 相对发芽率等共4个指标进行综合评价。其耐盐性由强到弱为：达乌里羊茅耐盐性最强，梦神居中，紫羊茅最弱。

5 结论

不同浓度的Nacl溶液对3份羊茅属种质材料种子的萌发均存在显著抑制作用，同时延迟发芽。其中0.4%Nacl溶液对达乌里羊茅种子具有一定的引发作用；3份材料半致死盐浓度分别为： 达乌里羊茅为1.2%、紫羊茅为0.4%、梦神为0.8%，综合评价3份材料耐盐性为：达乌里羊茅耐盐性最强，梦神居中，紫羊茅最弱。