3项指标联合检测对PPROM孕妇绒毛膜羊膜炎的诊断价值

顾彦洁

(上海市长宁区妇幼保健院 200051)

未足月胎膜早破(PPROM)是指在临产前(妊娠28～36+6周)发生的胎膜破裂。目前我国PPROM发生率逐年上升，单、双胎发病率已达2.7%～17.0%[1]。其中PPROM合并绒毛膜羊膜炎(HCA)产妇占PPROM患者的15%～25%。据报道，PPROM合并HCA与胎儿早产、宫内及产后感染、围生儿死亡关系密切，是诱发脑性瘫痪、败血症以及肺炎等并发症的主要原因[2]。因此，有关PPROM合并HCA的早期诊断对于改善妊娠结局、提高母儿预后意义重大。血清降钙素原(PCT)是降钙素的前肽，β2防御素(HBD-2)为一种高效抗革兰阴性菌的多肽，白细胞介素-6(IL-6)则是一种炎症因子，三者均为炎性反应重要指标，并广泛应用于感染性疾病的诊断与鉴别。目前，已有报道采用PCT、HBD-2及IL-6诊断PPROM合并HCA[3-5]，但单独诊断的效能有限。本研究采用PCT、HBD-2及IL-6联合检测，探讨其在PPROM合并HCA早期诊断中的诊断价值。现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择本院2015年3月至2016年3月收治的65例PPROM患者为观察组，年龄22～36岁，平均(26.3±1.5)岁，孕周28～36+6周，平均(34.6±0.3)+6周。PPROM患者分娩后，取胎盘胎膜进行病理检查，依据病理切片镜检时，中性粒细胞浸润每高倍镜视野5个以上即可诊断为HCA这一标准，将PPROM患者分为HCA组(32例)和非HCA组(33例)。另选取本院同期接受产检并分娩的健康孕妇30例作为对照组，年龄21～35岁，平均(25.9±2.2)岁，平均孕周(34.0±1.7)+6周。3组孕妇年龄、孕周等基本资料差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究获得本院伦理委员会批准。PPROM患者纳入标准：(1)符合《胎膜早破的诊断与处理指南(2015)》中的诊断标准[6]；(2)无宫缩现象；(3)无感染现象，未使用抗菌药物；(4)单胎初产；(5)无其他母婴合并症；(6)对本研究知情并自愿签署知情同意书。排除标准：(1)合并感染性疾病，有明显的感染体征；(2)胎儿畸形；(3)合并糖尿病、妊娠高血压；(4)合并急性风湿性疾病；(5)合并恶性肿瘤；(6)合并肝、肾、心、脑血管疾病。

1.2方法 (1)PCT、HBD-2及IL-6水平测定。所有孕妇分娩后立即采集肘静脉血 4～5 mL，血清PCT、HBD-2及IL-6水平采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测，具体步骤如下：空白微孔→加入酶标记溶液→37 ℃孵育30 min→清洗酶标板→显色剂染色→37 ℃孵育30 min→加入终止液→酶标仪450 nm下检测。(2)研究方案。首先比较3组患者血清PCT、HBD-2及IL-6水平差异，然后对PCT、HBD-2、IL-6单独检测及三者联合检测的诊断效能进行比较。

1.3结果判定标准 (1)PCT：外周血检测水平>2.0 μg/L判定为阳性；(2)HBD-2：外周血检测水平>474.8 ng/L判定为阳性；(3)IL-6：外周血检测水平>7.9 ng/L判定为阳性；(4)平行联合检测判定：不同检测方法中，任何一个出现阳性，即判定为阳性；(5)系列联合检测：几个检测方法均出现阳性结果时，判定为阳性。各指标计算公式：敏感度=真阳性例数/(真阳性例数+假阴性例数)×100%；特异度=真阴性例数/(真阴性例数+假阳性例数)×100%；阳性预测值=真阳性例数/(真阳性例数+假阳性例数)×100%；阴性预测值=真阴性例数/(真阴性例数+假阴性例数)×100%。

2 结 果

2.13组患者血清PCT、HBD-2及IL-6水平比较 HCA组血清PCT、HBD-2及IL-6水平明显高于非HCA组和对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；非HCA组中除HBD-2水平明显高于对照组外，PCT及IL-6水平与对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 3组患者血清PCT、HBD-2及IL-6水平比较

注：与HCA组比较，*P<0.05；与非HCA组比较，#P<0.05

2.2单项检测诊断PPROM合并HCA的诊断效能分析 PCT、HBD-2、IL-6单项检测诊断PPROM合并HCA，特异度差异有统计学意义(P<0.05)，其中，HBD-2诊断的特异度明显高于PCT、IL-6，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.3联合检测诊断PPROM合并HCA的诊断效能比较 采用平行联合检测，PCT+HBD-2+IL-6诊断的敏感度和阴性预测值均明显高于PCT+IL-6、HBD-2+IL-6(P<0.05)；采用系列联合检测，PCT+HBD-2+IL-6诊断的特异度明显高于PCT+IL-6、HBD-2+IL-6(P<0.05)；采用PCT+HBD-2+IL-6诊断时，系列联合检测的敏感度明显低于平行联合检测(P<0.05)，特异度和阴性预测值明显高于平行联合检测(P<0.05)。见表3。

表2 单项检测诊断PPROM合并HCA的诊断效能分析[n/n(%)]

注：与PCT比较，*P<0.05；与HBD-2比较，#P<0.05

表3 联合检测诊断PPROM合并HCA的诊断效能比较[n/n(%)]

注：与PCT+IL-6比较，*P<0.05；与PCT+HBD-2+IL-6组比较，#P<0.05；与平行联合检测同指标比较，▲P<0.05

3 讨 论

据报道，炎性反应及生殖道感染是导致PPROM的主要原因，其中PPROM合并HCA为PPROM的重要并发症，是导致新生儿各种疾病发病和死亡的原因，严重危害母儿生命健康。由于多数HCA临床表现不典型或不明显，因此早期诊断在鉴别PPROM合并HCA亚临床症状时较为困难。常用的胎盘胎膜检查法滞后性强，而羊水穿刺法具有侵入性，对机体造成一定损伤，在临床PPROM合并HCA的早期诊断中效果不理想[7]。因此，高效、快速、灵敏且非侵入性的PPROM合并HCA检测手段成为研究热点。国内外研究人员正在尝试从母体血清中寻找合适的PPROM合并HCA预测因子，如C反应蛋白、防御素、炎症细胞因子、细胞因子等[8]，但尚无理想的研究结果。

PCT是由116个氨基酸残基组成降钙素前体蛋白质，近年来被誉为最理想的早期、特异性、全身系统性炎性反应诊断指标。其结构稳定，生成迅速，且对受体内激素不敏感。通常情况下，PCT在健康人体内水平不超过0.5 μg/L；而当人体出现脓毒症或全身炎性反应时PCT水平明显升高，并随着感染控制程度的升高而迅速降低[9]。HBD-2是一种高效抗革兰阴性菌的多肽，是妊娠期女性生殖道中抵抗微生物入侵的天然屏障，感染发生时，通过发挥抗微生物的免疫反应来抑制感染的进一步发展[10]。IL-6是一种免疫调节及炎症因子，能够促进免疫因子表达和细胞增殖[11]。此外，在感染状态下，IL-6可诱导肝脏细胞合成C反应蛋白，该物质能够诱发宫内感染。

研究表明PCT、HBD-2和IL-6均与细菌感染和炎症相关[12-14]。这点在本研究中也得到了证实。结果显示， HCA组其血清PCT、HBD-2和IL-6水平均明显高于非HCA组及对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。HBD-2是抵抗微生物入侵的重要屏障。当微生物入侵，羊膜腔的免疫屏障未能控制，就会发生感染，入侵微生物的产物如脂多糖等，通过TLR信号传导通路，上调HBD-2的表达并释放入血，导致患者血清HBD-2水平升高。有研究发现，HBD-2对于PPROM合并HCA具有一定的预测作用[15]。田丰等[16]认为，妊娠女性羊水中IL-6水平升高会明显增加PPROM和早产发生的风险。妊娠期间，当感染发生时，孕妇羊水中IL-6水平明显增加，与正常妊娠者相比差异有统计学意义(P<0.05)。据报道，当孕妇出现HCA时，大量的IL-6释放并进入羊水及血液，导致血清IL-6水平明显升高，因此IL-6作为亚临床感染的预测指标具有理论依据。

PCT、HBD-2和IL-6在炎症及细菌感染中的作用虽已明确，但目前多将三者单独检测作为PPROM合并HCA诊断标准，对于联合检测的诊断价值研究较少。本研究结果显示，HCA组血清PCT、HBD-2和IL-6水平明显高于非HCA组和对照组(P<0.05)，提示随着PPROM发生并发展为HCA，患者血清PCT、HBD-2和IL-6水平逐渐升高，表明血清PCT、HBD-2和IL-6水平可在一定程度上预测PPROM合并HCA。但采用单独的PCT、HBD-2和IL-6诊断PPROM合并HCA时，敏感度和特异度均低于82%，提示单项检测并无明显优势。这可能是PCT、HBD-2和IL-6三者仅与疾病单一方面有关：PCT及IL-6仅能反映炎性反应；HBD-2仅反映人体的防御系统。如若将三项指标联合诊断，则能从炎性反应和机体自身防御系统多层次反映疾病，其诊断的敏感度和特异度明显改善。故本研究中PCT+HBD-2+IL-6平行联合检测的敏感度明显高于PCT+IL-6、HBD-2+IL-6(P<0.05)；三者系列联合检测的特异度明显高于PCT+IL-6、HBD-2+IL-6。此外本研究还显示，三者联合检测时，系列联合检测的敏感度明显低于平行联合检测(P<0.05)，特异度和阴性预测值明显高于平行联合检测(P<0.05)。因此，在临床诊断中应有针对性地选择联合检测方法：对于门诊产前筛查，应选择敏感度高的平行联合检测，以防止PPROM合并HCA漏诊；对于住院的PPROM患者，应选择系列联合检测，以提高诊断的准确度和可信度，降低误诊率。

综上所述，PCT、HBD-2及IL-6平行联合检测可提高PPROM合并HCA诊断的敏感度，系列检测可提高PPROM合并HCA诊断的特异度，对PPROM合并HCA的早期诊断具有重要价值。