纳豆红曲葡萄籽组合辅助降血脂功能试验

王荣昌 朱勤 郁桦 李玲 王玉莹 甘露 汪普林 匡荣 朱社敏

摘 要 目的：研究纳豆红曲葡萄籽组合辅助降血脂功能。方法：辅助降血脂功能实验设0.33、0.67、 2.0g/kg·bw低、中、高三个剂量组，分别相当于人推荐量的5、10、30倍，同时设空白对照组、模型对照组。实验采用混合型高脂血症动物模型，连续30天经口给予大鼠不同浓度的受试样品液，空白对照组、模型对照组同时给予等量灭菌纯化水。实验结果：模型对照组与空白对照组比较，大鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）水平升高，高密度脂蛋白（HDL-C）水平降低，差异均具有显著性意义（P<0.01），模型成立；给予受试样品30天后，与模型对照组比较，低、中、高剂量组大鼠TC水平及TG水平均下降，差异均具有显著性意义（P<0.01），各剂量组LDL-C、HDL-C 水平均未见明显差异。结论：纳豆红曲葡萄籽组合在本试验条件下具有辅助降血脂功能。

关键词 纳豆；红曲；葡萄籽；辅助降血脂

1 综述

纳豆是大豆经过纳豆芽孢杆菌发酵而成，其含有的纳豆激酶能够有效清除人体血液内的血栓[1]，且研究表明纳豆可降胆固醇和甘油三酯。因此，纳豆具有溶解血栓、降血压、降血脂等功能[2-3]。红曲是首先发现具有降脂作用的中药，其降脂成分为洛伐他汀，洛伐他汀是胆固醇合成途径中HMG-CoA还原酶的竞争性抑制剂，可以有效减少或阻断内源性胆固醇的合成[ 4 ]， 葡萄作为药食兼用植物， 其医疗保健作用受到国内外预防医学领域的广泛关注。葡萄籽提取物的主要功能成分是原花青素 ，原花青素等具有降血脂、抗氧化、致突变等作用[5-6]。纳豆红曲葡萄籽组合物是由纳豆、红曲、葡萄籽提取物制成的保健食品，本文研究了该组合制剂对高脂血症模型大鼠TC、TG、HDL-C、LDL-C的影响，为其更好的开发利用提供理论依据。

2 材料与方法

2.1 样品与剂量：纳豆红曲葡萄籽胶囊样品由某生物科技有限公司提供，人用推荐剂量为66.67mg/kg.bw/日（人以60kg计）。按国食药监保化[2012]107号文附件6辅助降血脂功能评价方法，本实验设三个剂量组、空白对照组和模型对照组。空白对照组给予维持饲料，模型对照组及三个剂量组给予模型饲料，低、中、高三个剂量分别为0.33、0.67和2.0g/kg.bw/日（相当于人推荐量的5、10和30倍），最低剂量组折合成原药材：相当于纳豆0.25 g/ kg.bw/日、红曲0.033 g/kg.bw/日、葡萄籽1.410.033 g/kg.bw/日（该提取物得率3.5%）。

2.2 实验动物及设施：本实验由浙江省食品药品检验研究院操作，该机构为国家食品药品监督管理局遴选确定保健食品注册检验机构。实验用SD大鼠由昭衍（苏州）新药研究中心有限公司提供，生产许可证号为SCXK（苏）20130003，清洁级，雄性，购入时体重为150-170g，动物质量合格证号为No.201710087。维持饲料和模型饲料由江苏协同医药生物工程有限公司生产，生产许可证号为苏饲证（2014）01008，检测环境条件：实验动物使用许可证号为SYX（浙）2016-0009，饲养环境：温度范围20-25℃，相对湿度范围40-70%。

2.3 实验试剂与仪器：实验试剂：总胆固醇测定试剂盒（酶试劑法）、甘油三脂测定试剂盒（形试剂法）采购于德赛诊断系统（上海）有限公司；高密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒R1及剂盒R2、低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒R1及试剂盒R2均采购于日本和光纯药工业株式会社。试验仪器：株式会社日立制作所生产的日立全自动生化分析仪（7180型）；余姚市金诺天平仪器有限公司生产的电子天平（TD12001型）。

2.4 统计方法：实验数据以平均值±标准差（ x±s）表示，方差分析和统计学检验采用孙瑞元等编辑的DAS统计软件中多组均数分析。先对数据进行方差齐性检验，若方差齐，采用单因素方差分析进行总体比较，发现差异再用T检验法进行多个剂量组与一个对照组均数间的两两比较。若方差不齐则改用秩和检验进行统计。

3 实验方法

按国食药监保化[2012]107号文附件6辅助降血脂功能评价方法进行实验，具体如下：

3.1 造模：取适应期结束SD大鼠112只，体重180-220g，按体重随机取12只大鼠为空白对照，大鼠给予维持饲料；其众大鼠均给子定制的模型饲料。1周后，所有大鼠均不禁食眼内毗采血，采血后分离血清，用全自动生化分析仪测定血清TC、TG、HDL-C、LDL-C水平。选取造模成功大鼠48只，根据TC水平将大鼠随机分成低、中、高三个样品组和一个模型对照组，每组12只，分组后各样品组和模型对照组比较TC、TG、LDL-C 和HDL-C水平及初始体重差异应均无显著性，空白对照12只大鼠为空白对照组。

3.2 受试样品的给予：低、中、高三个样品组分别灌胃给予相应的样品液，模型对照组和空白对照组大鼠均灌胃给予灭菌的纯化水，每天一次，连续30天，试验期间，空白对照组给予维持饲料，模型对照组和各样品组给予模型饲料。

3.3 指标检测：在给受试样品第1、2、3、4周，称取大鼠体重。给受试样品第30天，在给予受试样品1h后，大鼠不禁食限内毗采血，采血后分离血清，用全自动生化分析仪测定血清TC、TG、HDL-C、LDL-C水平。

4 实验结果

4.1 造模后大鼠分组试验结果

结果见表1.原始数据均符合方差齐性要求，与空白对照组比较，模型对照组大鼠TC、TG、LDL-C水平升高，HDL-C水平降低，差异均具有显著性意义（P<0.01），说明模型成立，与模型对照组比较，各剂量组大鼠TC、TG、HDL-C、LDL-C差异均无品书性意义（P>0.05），即分组符合要求。

4.2 辅助降血脂功能评价试验结果

结果见表2.原始数据均符合方差齐性要求，与空白对照组比较，模型对照组大鼠TC、TG、LDL-C水平升高，HDL-C水平降低，差异均有显著性意义（P<0.01）， 说明模型成立。与模型对照组比较，低、中、高剂量组大鼠TC水平及TG水平均下降，差异均具有显著性意义（P<0.01），同时，各剂量组大鼠的HDL-C、LDL-C水平和模型对照组比较差异均无显著性意义（P>0.05），显示本试验组合具有辅助降血脂功能。

4.3对大鼠体重影响试验结果

结果见表3。原始数据均符合方差齐性要求。与空白对照组比较，模型对照组大鼠第2、3、4周体重升高，差异均有显著性意义（P<0.05或P<0.01）；与模型对照组比较，高剂量组大鼠第1、2、3、4周体重下降，差异均有显著性意义（P<0.05），高剂量组大鼠第1、2、3、4周体重与空白对照组比较，体重差异无显著性意义（P>0.05）。其余各剂量组大鼠体重差异均无显著性意义（P>0.05）.

5 小结与结论

实验结果表明：与空白对照组比较，模型对照组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平升高，HDL-C水平降低，差异均具有显著性意义（P<0.01），混合型高脂血症动物模型成立，且第2、3、4周体重升高（P<0.05或P<0.01）；给予受试样品30天后，与模型对照组比较，低、中、高剂量组大鼠TC水平及TG水平下降，差异均具有显著性意义（P<0.01），同时，各剂量组大鼠的LDL-C、HDL-C水平和模型对照，组比较差异均无显著性意义（P>0.05），高剂量组大鼠第1、2、3、4周体重下降，差异均有显著性意义（P<0.05）结论：纳豆红曲葡萄籽组合具有辅助降血脂功能。

参考文献：

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