猪场猪瘟免疫情况调查及首免日龄优化试验

卓婷

摘 要：目的：调查猪场猪瘟的免疫情况以及通过优化试验确定最佳首免日龄。方法本次论文选择对规模化猪场的猪瘟免疫的整体情况进行调查，在调查基础上，进行仔猪猪瘟首免日龄试验，得到仔猪最佳的首免日龄。结果：2017年整体的猪瘟抗体水平均不够理想，整体平均抗体水平阳性率只有66.45%，低于70%的阳性保护率水平。2018年，整体的猪瘟抗体水平有了大幅度的提高，平均阳性率达到了83.17%0最佳首免日龄试验，14日龄免疫组和21日龄免疫组的抗体水平在免疫一周后均出现较大幅度的下降。两周后，14日龄免疫组抗体水平仍在下降，21日龄免疫组上升缓慢。28日龄免疫组，在免疫后两周整体的抗体水平均有明显的上升，而35日龄免疫组两周内抗体上升较缓慢。结论：对不同阶段的猪群的抗体水平调查发现，哺乳仔猪、种公猪、后备猪、育肥猪的抗体水平較为理想，保育猪抗体水平阳性率为全场不同阶段猪群最低。为达到较为理想的免疫效果，最佳的首免日龄应是仔猪28日龄。

关键词：猪瘟；首免日龄；免疫情况；预防

中图分类号：S858.28 文献标识码：A 文章编号：1004-7344（2018）21-0247-02

猪瘟又叫烂肠瘟，是由猪瘟病毒引起的一种急性、热性、接触性传染病。该病是对猪危害较大的一种传染病。资料报导21世纪前五年猪瘟发病率20～25%，每年猪瘟死亡占饲养量的3～5%，占病死猪30%[1]。

1 猪瘟发病的特点

1.1 流行特点

不分品种、性别、年龄，一年四季发生。目前主要发生于免疫猪群，早的十几日龄，晚的成年猪。也可发生于初产和经产的母猪。据报导带毒母猪产出的仔猪有长期病毒血症，可持续排毒，病程缓慢，先后于2～11日龄引起死亡[2]。

1.2 症状特点

一般体温升高、稽留热，皮肤粘膜，尤其耳根、胸腹皮肤发绀呈败血经过（见图）。病程长的拱背，寒战，厌食，初便秘后腹泻、便秘交替发生，当粪便恶臭时附粘液，多在1周死亡，不死的转慢性，体温时高时低，食欲时好时坏，病程20d以上，多数转归死亡[3]。

2 猪瘟诊断

2.1 临床诊断

根据上述流行特点和临床症状，剖检变化及治疗情况进行综合诊断。

2.2 实验室诊断

（1）猪体免疫试验：用病料接种易感猪观察发病的情况，方法是取4只小猪，2只注免化弱毒苗，两只对照，注苗12～14d后接病料免疫猪不发病，未免疫猪发病则判猪瘟阳性[4]。

（2）兔体交叉免疫试验：根据猪瘟强毒不引起家兔的体温反应，但能使家兔产生免疫力，当用兔化弱毒攻击时不引起体温升高的表现，先用病料接种兔，再用兔化弱毒攻击。如病料含强毒可引起体温反应。

2.3 免疫程序

（1）常规免疫程序：配种前注射过猪瘟苗的母猪。含有母源抗体仔猪。首免日龄20～25日龄，二免为50～60日龄。体弱，食欲不正常，发病猪注苗效果不好[5～6]。

（2）超前免疫：初生仔猪在吃乳前1～1.5h首免，断奶后或60日龄2免。当猪场长期受猪瘟病毒严重污染时，仔猪免疫受到母源抗体影响，20日龄接种，使一部分猪成为易感猪，因个体差异母抗水平一致，如提前免疫受母抗干扰更多，推迟免疫得到抗体的保护降低。所以超前免疫是净化猪场的好办法，但母猪多在夜间分娩，同时产仔房温度高，给免疫接种带来一定困难[7～9]。

一般猪胎70日龄免疫系统对抗原刺激产生免疫应答，而仔猪获得的母源抗体3h产生，6～12h达高峰[10]。

3 猪场猪瘟免疫情况调查

3.1 材料与方法

3.1.1 血清的来源

2017～2018年间，随机采集11个规模化猪场，共6910份不同阶段猪群的血清样品，其中2017年3293份；2018年3617份。不同猪群采集记录如表1所示。对仔猪从前腔静脉进行采血，别的猪群要从耳缘静脉进行采血。对血样采集完成后，采取常规处理，将血清分离，并置于零下20℃保存，待测。

3.1.2 诊断试剂

采用美国IDEXX公司的猪瘟抗体阻断ELISA试剂盒。

3.1.3 仪器设备

96孔酶标仪（美国宝特BIO-TEK公司，型号ELX800）、台式离心机（上海安亭科学仪器厂，型号LXJ-IIC）、海尔冰箱（BCD-215KS）。

3.2 猪瘟抗体检测方法

3.2.1 样品和检测试剂

被检血清样品；CSFV抗原包被板：CSFV阴、阳性对照血清；样品稀释液；（10x）洗涤液；HRPO标记的CSFV酶标抗体；TMB底物和终止液等。

3.2.2 检测方法的原理

该检测方法主要是采用阻ELISA原理，通过被CSFV包被的微量包被板，来检测被测血清样品中的CSFV抗体。室温下，加入的被测样品经过孵育，如果被测样品中含有特异性的CSFV抗体，那么就会与CSFV抗原产生结合，继而会阻断HRPO标记的抗CSFV酶标抗体和抗原的结合。通过HRPO与TMB底物进行反应，反应后的显色的深浅程度，可以判断出酶标抗体和包被抗原的结合程度。

3.2.3 结果判断

结论成立的条件：阳性对照：阻断率>50%；阴性对照：平均OD值>0.500。

判断条件如下：

阳性判定：阻断率≧40%，被测样品中有CSFV抗体存在；

阴性判定：阻断率≦30%，被测样品中无CSFV抗体存在；

可疑判定：30%≦阻断率≦40%，该检测结果的样品来源动物要在数天之后进行抗体再次检测。

3.3 猪群的整体猪瘟抗体水平情况（见表2）

4 合适首免日龄试验

4.1 试验设计

在调查基础上，对规模化猪场进行仔猪猪瘟首免日龄试验，进而全面的了解哺乳仔猪母源抗体消长的规律，为确定最佳的首免日龄，制定科学合理的免疫程序提供依据。出生仔猪分别于0，1，7，14，21，28，35，42日龄从前腔静脉采血2～3mL，进行血清分离，检测抗体，每天对试验仔猪的精神状态，饮水、饮食，粪便、尿液进行观察，看是否出现明显的异常表现。

4.2 抗体检测结果

5 讨 论

通过对规模化猪场2017年和2018年共6910份的血清样品进行了抗体检测，结果表明，2017年的猪瘟抗体的水平都不理想，测试结果的整体平均阳性率要低于70%。2018年整体的猪瘟抗体的水平均有着显著的提高，对不同阶段的猪群，进行抗体水平调查，调查结果发现哺乳仔猪、种公猪、后备猪、育肥猪抗体水平都比较理想，其中保育猪的平均抗体水平是猪群最低。

首免日龄为28日龄的免疫组，免疫后两周内抗体水平明显上升，疫苗免疫效果比其他首免日龄免疫组要理想。结合哺乳仔猪在14日龄母源抗体水平开始下降，到35日龄时半数仔猪达不到临界保护值的母源抗体水平消长规律，认为以28日龄为首免日龄的免疫方案較适合C畜牧公司。为达到较为理想的免疫效果，最佳的首免日龄应是仔猪28日龄。

参考文献

[1]黄红梅，陈凤莲，华 俊，等.广西猪瘟病毒流行现状及与HCLU免疫原性比较分析[A].中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集，2015：105～109.

[2]罗 勇.陈刨夫，杨建疆，等.猪瘟疫苗超一前免疫效果观察[J].畜牧兽医杂志，2013，25（3）：6～7.

[3]黄 夏，覃芳芸，等.广西种猪场猪瘟免疫抗体调查与分析[J].中国兽医杂志，2016，42（1）：26～27.

[4]江明甫，杨 红，等.猪瘟免疫程序筛选优化研究[J].疫病防治，2015，1：29～30.

[5]丁明孝，陆 宁，陈建日.猪瘟病毒及其疫苗研究[C].谢庆阁，翟中和，主编.畜禽重大疫病免疫研究进展.北京：中国农业科技出版社，2016.

[6]吴建敏，蒋冬福，等.广西猪瘟流行现状的调查分析[J].中国兽医科技，2012，32（2）：16～18.

[7]王火平.仔猪猪瘟超前免疫的研究.[J].福建畜牧兽医，2015，27（4）：8～9.

[8]张 宇，张宪强.对仔猪猪瘟疫苗乳-前免疫技术的研究.民营科技，2017，7：17～19.

[9]陆文俊，黄 夏，等.广西部分种猪场猪瘟抗体监测和免疫效果分析[J].畜牧与兽医，2012.34（7）：26～27.

[10]刘 莉，金璐娟，杨 旭，等，规模化猪场仔猪猪瘟母源抗体消退规律[J].黑龙江畜牧兽医，2014（10）：46～47.

收稿日期：2018-6-12

作者简介：卓 婷（1979-），女，助理兽医师，主要从事动物检疫和动物防疫工作。