上海市甜菜夜蛾对虫螨腈的抗药性及风险评价

王 欣，高聪芬，何翠娟，杨银娟，黄 俭，李雅珍

(1.南京农业大学植物保护学院农药科学系/农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室，江苏南京210095;2.上海农业技术推广服务中心，上海201103;3.上海市奉贤区蔬菜技术推广站，上海201499;4.上海市金山区蔬菜技术推广中心，上海201599;5.上海市宝山区蔬菜科学技术推广站，上海200433)

甜菜夜蛾Spodoptera.exigua Hübner属鳞翅目，夜蛾科，是一种广泛性分布的多食性重要农业害虫，在我国南北各地均有发生，以幼虫为害［1，2］。虫螨腈是由美国氰胺公司上世纪80年代后期开发的一种新型杀虫剂，对作物安全，有效施用量低。该农药可防治包括鳞翅目、鞘翅目、半翅目和双翅目在内的多种害虫，还可防治多种害螨 (包括叶螨)，所以它被广泛使用在蔬菜、水果及作物上［3］。随着虫螨腈连续多年的使用，并且由于其使用范围比较广，其抗性的发展也成为人们逐渐关注的问题［4－7］。2010年前由于上海地区大量使用虫螨腈防治甜菜夜蛾，导致本地区甜菜夜蛾田间种群对虫螨腈的抗药性显著升高，田间防效差，因此自2010年之后逐渐停用，取而代之使用氯虫苯甲酰胺、甲氨基阿维菌素等药剂。但自2015年起部分地区在田间使用虫螨腈时发现其田间的防效又可达90%以上，故为进一步摸清上海地区甜菜夜蛾对虫螨腈的抗药性水平，为虫螨腈的合理使用和甜菜夜蛾的抗药性治理提供依据。本研究通过浸叶法监测了上海4个地区 (崇明、松江、奉贤及浦东新区)甜菜夜蛾对虫螨腈的抗药性并进行了虫螨腈防治甜菜夜蛾的大田药效试验。在室内抗性筛选的基础上，研究了上海甜菜夜蛾田间种群对虫螨腈的抗性现实遗传力。

1 材料与方法

1.1 供试甜菜夜蛾 田间监测种群:2016或2017年采自上海崇明、松江、奉贤及浦东新区，在室内用人工饲料饲养至3龄中期时供测定。

室内筛选起始种群:2015年8月采自上海的甜菜夜蛾田间种群在室内饲养9代后，采用人工饲料感染法在室内用虫螨腈对其进行抗性筛选。

1.2 供试药剂 94.5%虫螨腈原药，由巴斯夫欧洲公司提供;10%虫螨腈悬浮剂，巴斯夫欧洲公司生产，市售

1.3 室内毒力测定 采用中华人民共和国农业行业标准《农药室内生物测定试验准则杀虫剂第14部分:浸叶法》［8］进行室内毒力测定，根据药剂的作用特点，虫螨腈处理48 h后检查死虫数，计算死亡率。

1.4 田间药效试验 按照农药田间试验准则(GB/T17980.13－2000)进行田间试验。试验作物为甘蓝，制剂用量为50g/667m2，以低龄幼虫为主时进行喷雾防治，采用定点定株法，施药前调查虫口基数，施药后3 d和7 d查残虫数。

1.5 抗性筛选方法 甜菜夜蛾对虫螨腈的抗性筛选采用人工饲料感染法，以初孵幼虫测定的LC50值为参考，设定一定的筛选浓度，该浓度使甜菜夜蛾初孵幼虫48h后的死亡率保持在60%～70%左右。每个指形管内置混药饲料接初孵幼虫5～8头，每代的筛选量为800～1 000头左右 (根据虫量情况而定)。48h后将存活幼虫挑出转入到装有正常人工饲料的试管内继续饲养，直到化蛹。

1.6 抗性风险评估 根据阈值分析法［9］，抗性现实遗传力 (h2)可用公式h2=R/S计算:

式 (1)中R为选择反应(response to selection)，终LC50值为筛选n代后下一代的LC50值，始LC50值为筛选前亲代的LC50值;

式 (2)中σp为表现型标准差 (phenotypic standard deviation)，是由筛选各代毒力回归线的斜率值bi求得。

式 (3)中S为选择差异 (selection differential)，i为选择强度 (intensity of selection)，i可根据公式i﹦1.583–0.019 333 6P+0.000 042 8P2+3.651 94/P(10＜P＜80)(P=100－平均校正死亡率)计算求得。

2 结果与分析

2.1 甜菜夜蛾对虫螨腈的抗药性 用浸叶法监测了上海崇明、松江、奉贤及浦东新区4个地区甜菜夜蛾对虫螨腈的抗药性，结果表明:各种群对虫螨腈的抗性倍数为0.9～5.2，处于敏感至低水平抗性 (表1)。

表1 甜菜夜蛾对虫螨腈的抗药性监测

防治甜菜夜蛾田间效果表明 (表2)，虫螨腈对甜菜夜蛾具有良好的防治效果，2016年(2017年)药后3d的防效为80.1% ～100.0%(85.4% ～94.3%)，药后7d的防效为89.9% ～100.0%(90.2% ～95.3%)。

2.2 甜菜夜蛾对虫螨腈的抗性筛选 2015年8月采自上海的甜菜夜蛾田间种群在室内饲养9代后，用虫螨腈在室内连续筛选10代。在开始筛选的前4代，抗性水平呈下降趋势，F5代后抗性水平开始上升，至F8代时抗性倍数上升0.4倍，但由于F9代测定时天气突然变冷，并且有一部分感染病毒，导致活力下降，试虫受药剂影响的敏感性上升，抗性水平又有所回落。LC50值由筛选前的18.823 mg/L下降到筛选后的12.965 mg/L，筛选后抗性下降了30%，与敏感种群相比的抗性倍数为2.1倍，为敏感性水平(表3)。

表2 虫螨腈防治甜菜夜蛾的田间试验结果

表3 上海甜菜夜蛾种群对虫螨腈的室内抗性筛选

2.3 甜菜夜蛾对虫螨腈抗性现实遗传力估算 经过连续10代的抗性筛选，甜菜夜蛾对虫螨腈的抗性现实遗传力 (h2)为－0.041 4。由此推断连续筛选或田间连续几代用虫螨腈防治甜菜夜蛾，虫螨腈抗性发展缓慢，甜菜夜蛾对虫螨腈具有较低的抗性风险 (表4)。

表4 甜菜夜蛾室内筛选种群对虫螨腈的现实遗传力估算

3 讨论

从室内抗药性监测结果看，各监测地区甜菜夜蛾对虫螨腈的抗性倍数为0.9～5.2，处于敏感至低水平抗性。在田间推荐用药量50 g/667m2下，药后7d的防效也达到85%以上。其原因可能为近8年来上海市几乎停用虫螨腈防治甜菜夜蛾，使得甜菜夜蛾田间种群对虫螨腈的抗性下降所致。

从室内抗性风险评估结果来看，上海甜菜夜蛾种群对虫螨腈的抗性现实遗传力为－0.041 4，由此可见，甜菜夜蛾对虫螨腈具有较低的抗性风险，这与张文成研究结果一致［3］。综合以上结果可知，虫螨腈目前可作为上海地区防治甜菜夜蛾的优选药剂之一。

抗性风险评估一般用于特定环境中药剂使用后出现抗性可能性的预测，就是害虫对某一杀虫剂的产生抗性的能力作评估［11］。室内抗性筛选的结果用来评价田间的抗性风险具有一定局限性。一方面，为使筛选能够进行，室内筛选死亡率一般控制较低，并且室内仅限于3龄幼虫，每代次仅被筛选1次。而田间防效一般在90%左右，并且种群被施药时龄期并不一致，且被受药的次数因防效影响可能会增加，因此田间的h2可能更大［12］。另一方面，由于室内温度、湿度及光照周期等是相对稳定和可控的，而田间环境具有多样性，所以室内的遗传方差和环境方差相对田间的较小。同时，由于田间条件下敏感个体的迁入和抗性个体的迁出以及环境和选择压力、交替或轮换用药、基因突变等因素的影响，表现型变异的遗传方差和环境方差波动较大。因此，室内估算的h2值会偏高［13，14］。虽然室内研究结果不能直接用于田间，但此结果可以预示甜菜夜蛾对虫螨腈抗性发展的趋势，仍可作为田间防治的参考。