白藜芦醇和血根碱对2～6月龄犊牛生长性能和血清生化指标的影响

2018-10-15张卫兵毕研亮杜汉昌田忠红刁其玉

畜牧兽医学报 2018年9期

张卫兵，张蓉，毕研亮，屠焰，杜汉昌，田忠红，刁其玉*

(1. 中国农业科学院饲料研究所，农业部饲料生物技术重点实验室，奶牛营养学北京市重点实验室，北京 100081;2. 山东农业生物免疫技术工程实验室，山东银香伟业集团有限公司，菏泽 274500)

犊牛是奶牛场的未来，犊牛培育是牛场的关键环节。但犊牛出生后要经历营养、环境和心理的转变，由于消化酶分泌不足，胃肠道发育不全，免疫系统未建立，日粮形态变化等原因，在转变过程中会出现一些问题，如腹泻、呼吸道疾病和高水平氧化应激等，为犊牛的培育带来巨大挑战。为了应对这个挑战，传统做法是在犊牛培育过程中添加适当抗生素作为生长促进剂，在维持犊牛健康的情况下又能取得较理想增重。但在动物生产中使用抗生素的社会接受度越来越低，因此寻找经济、有效、有机的生长促进剂变得异常重要。植物提取物因具有天然性、多功能性、无抗药性等独特性质而逐渐成为抗生素作为生长促进剂的理想替代品。植物提取物在动物营养上已显示出具有提高饲料转化效率、促进动物生长、抗氧化应激、提高免疫力和调控瘤胃发酵等特性。白藜芦醇和血根碱就是两种天然的植物提取物。白藜芦醇(resveratrol, RES)是一种非黄酮类多酚物质，广泛存在于葡萄、花生及中药虎杖等植物中，RES及其衍生物具有许多生物活性和药理作用，包括抗氧化活性，神经保护活性，心保护能力[1]。血根碱(sanguinarine, SAG)是一种苯菲啶异喹啉类生物碱，主要存在于博落回、白屈菜、血水草以及紫堇中，具有抗菌、抗氧化以及抗炎症作用，也用来控制血吸虫，此外还具有抗肿瘤特性[2]。

RES和SAG作为饲料添加剂在单胃动物上进行了一些研究[3-6]，但在反刍动物上的研究很少[7-10]，尤其是在幼龄反刍动物的生长性能方面。因此，本试验研究了RES和SAG对2～6月龄荷斯坦犊牛生长性能和血清指标的影响，为RES和SAG在犊牛生产中的应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验时间与地点

试验于2015年11月—2016年2月在山东省菏泽市曹县银香伟业第二牧场进行。平均气温和相对湿度分别为5～30 ℃和30%～60%。

1.2 试验饲粮与试验设计

代乳粉(milk replacer, MR)，专利编号ZL 02128844.5，来自北京精准动物营养研究中心。

血根碱(sanguinarine, SAG)，纯度>99%；白藜芦醇(resveratrol, RES)，纯度>98%。二者均来自湖南美可达生物资源有限公司。

犊牛开食料来自牛场的饲料厂。

选用饲喂合格初乳、具有相似遗传背景、体重一致、健康的5日龄中国荷斯坦母犊牛54头，先在犊牛岛内饲养，每个犊牛岛(1.2 m×2.0 m，垫料为锯末)饲养1头犊牛。按照体重和日龄一致原则，将犊牛随机分为3组，每组18头。分别记为：MR组、RES组和SAG组。MR组为对照组单独饲喂MR；SAG组在饲喂MR的基础上每千克体重添加0.05 mg SAG；RES组在饲喂MR的基础上每千克体重添加4 mg RES。犊牛60～63日龄断奶，断奶后相同处理的犊牛放在同一牛圈，直到180日龄。SAG和RES在犊牛断奶前添加到代乳粉液体中饲喂犊牛，断奶后RES和SAG添加到犊牛料里面饲喂犊牛。随着犊牛体重增加，SAG和RES添加量每2周调整1次。

Vieira等[3]对博落回提取物(主要以SAG为主，其中SAG含量≥1.5%)在肉鸡日粮中的使用剂量范围为0.01～0.045 mg·(kg BW)-1，并且在0.035 mg·(kg BW)-1时饲料转化率和增重最好。饶华等[11]在8～25 kg仔猪饲粮中添加SAG量为0.021～0.023 mg·(kg BW)-1，本试验考虑到犊牛可能有部分的代乳粉液体进瘤胃，选择SAG的添加量为0.05 mg·(kg BW)-1。RES的添加量来自本实验室在绵羊上的推荐量。

1.3 饲养管理

试验开始前，用强力消毒灵溶液对整个圈舍进行全面的喷雾消毒，之后每周对所有栏位重复消毒1次，每隔2周用10%生石灰消毒牛舍。

MR中不添加抗生素等生长促进剂或抗球虫药物。断奶前所有犊牛均采食代乳粉，14日龄开始给所有犊牛提供0～3月龄开食料直到3月龄；断奶后提供优质粗饲料(苜蓿草和燕麦草)，4月龄开始由0～3月龄开食料换成4～6月龄开食料直到180日龄。开食料和干草以及清洁饮水均自由采食，MR的营养成分，开食料组成和营养水平见表1。

表1基础饲粮组成及营养水平(风干基础)

Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets(air-dry basis) %

1.预混料为每kg饲粮提供：维生素A 15 000 IU；维生素D35 000 IU；维生素E 50 mg；铜 12.5 mg；铁 90 mg；锌 90 mg；锰60 mg；碘 1.0 mg；硒 0.3 mg；钴 0.5 mg。2. 数据为实测值

1. The premix provided the following per kg of diets: VA 15 000 IU; VD35 000 IU; VE 50 mg; Cu 12.5 mg; Fe 90 mg; Zn 90 mg; Mn 60 mg; I 1.0 mg; Se 0.3 mg; Co 0.5 mg.2. Data are measured values

1.4 样品采集及分析方法

1.4.1 饲料样品采集每天进行代乳粉和开食料的样品采集，正试期内的样品混匀后储存在自封袋里，-20 ℃冷冻保存待测。

1.4.2 血液样品的采集犊牛60、180日龄时采集血样。每组选取10头牛，在早晨第1次饲喂前，由颈静脉采血约10 mL，倾斜放置至析出血清为止，3 000 r·min-1离心10 min，收集血清于试管中，-20 ℃保存，待测。

1.4.3 生长性能指标测定 56、90、120、150和180日龄在晨饲前称重，并在同日龄测量体高、胸围、体长、十字部高和十字部宽。

1.4.4 样品分析测定颗粒料中营养水平的测定：总能(GE)、干物质(DM)、粗蛋白质(CP)、粗脂肪(EE)、粗灰分、钙(Ca)、磷(P)和中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)含量参照张丽英[12]的测定方法进行。

血清指标包括血清生化指标、血清激素指标和血清免疫指标。游离脂肪酸(FFA)、免疫球蛋白A (IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、总抗氧化力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)用全自动生化分析仪(日立7160，日本)分析，试剂盒来自北京华英生物技术研究所。血清尿素氮(SUN)用全自动生化分析仪(日立7160，日本)分析，试剂盒来自中生北控股份有限公司。胰岛素(INS)、去甲肾上腺素(NE)用全自动放免计数仪(r-911，中国)测定，试剂盒来自北京华英生物技术研究所。皮质醇(COR)、白介素-1β (IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素(γ-IFN)、生长激素(GH)、类胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-1)、表皮生长因子(EGF)用全自动酶标仪(STAT FAX 2100，美国)检测，试剂盒来自北京华英生物技术研究所。

1.5 数据统计和分析

数据表示为“平均数和标准误(standard error of mean, SEM)”。数据采用SAS9.4统计软件中的MIXRD模型分析，犊牛个体作为误差项分析主效应，时间以及时间与主效应的交互作为残差。当主效应之间有交互作用时用最小显著差数法(least significant difference, LSD)比较平均数的差异。P<0.05表示统计差异显著，0.05≤P≤0.10表示有统计显著差异的趋势。

统计分析模型：Yijk=μ+Ti+Dj+TDij+C(T)ik+εijk，

式中，Yijk为因变量；μ为总体均值；Ti为处理(i=1,2,3)，固定效应；Dj为日龄(j=56、60、90、120、150、180),固定效应；TDij为处理和日龄的交互作用；C(T)ik(i=1,2…54)为受试犊牛，随机效应；εijk为残差。

2 结果

2.1 RES和SAG对犊牛生长性能的影响

由表2可以看出，试验开始时各组犊牛体重之间差异不显著(P>0.05)。RES和SAG组犊牛120和150日龄的体重均高于MR组，有达到显著水平的趋势(P=0.085 6和P=0.050 4)。RES显著提高180日龄犊牛体重(P=0.019 9)，SAG对180日龄犊牛体重提高也有达到显著的趋势(P=0.081 2)，3个组犊牛体重分别为182.14、196.28和192.70 kg。组间总增重差异不显著(P>0.05)，但RES组犊牛180日龄体重比MR组提高了14.14 kg。

体尺方面，日粮添加SAG促进犊牛体高和十字部高的增加，SAG对150和180日龄犊牛体高有显著的增加作用(P=0.029 5和P=0.012 3)，对180日龄犊牛十字部高也有显著的增加作用。RES有提高犊牛十字部宽增量的趋势(P=0.070 4)。RES和SAG对56～180日龄犊牛体长和胸围没有显著影响(P>0.05)。

2.2 RES和SAG对犊牛血清指标的影响

从表3可以看出，RES和SAG对60日龄犊牛血清FFA、INS、GH、EGF和IGF-1浓度产生显著影响(P<0.05)。与MR组相比，60日龄时RES和SAG显著降低血清FFA和INS浓度(P=0.001 0和P=0.007 0)，180日龄时差异消失(P>0.05)。RES显著提高60日龄犊牛血清GH、EGF和IGF-Ⅰ浓度(P=0.000 7、P<0.000 1和P=0.000 1)，180日龄时差异消失(P>0.05)。SAG显著降低60日龄犊牛血清EGF浓度(P<0.000 1)。RES和SAG对犊牛血清SUN、COR和NE浓度没有显著影响(P>0.05)。

由表4可知，体液免疫指标方面，与MR组相比SAG显著降低60日龄犊牛血清IgA(P=0.014 8)和180日龄IgM浓度(P=0.009 3)，对IgG影响不显著(P>0.05)。免疫因子中，60日龄SAG组犊牛血清TNF-α浓度显著低于RES组(P=0.031 3)，但与MR组无显著差异(P>0.05)。血清γ-IFN和IL-1β浓度不受RES和SAG影响(P>0.05)。RES和SAG对犊牛血清ALT和AST没有显著影响(P>0.05)。抗氧化指标方面，60日龄时SAG组犊牛血清MDA浓度显著高于MR组(P=0.001 1)，180日龄时组间无显著差异(P>0.05)；SAG组60日龄犊牛血清CAT浓度显著低于RES组(P=0.034 9)，但与MR组无显著差异(P>0.05)；RES和SAG对犊牛血清SOD、GSH-PX和T-AOC无显著影响(P>0.05)。

表2RES和SAG对犊牛生长性能的影响

Table2EffectsoftheRESandSAGongrowthperformanceofcalves

项目Item日龄Days of age处理TreatmentMRRESSAGSEMP值P-value处理Treatment日龄Days of age处理×日龄Treatment× Days of age体重/kg5667.0368.6469.414.0390.677 2<0.000 10.060 9Body weight9089.3394.3790.324.2820.392 5120114.32124.72121.204.4270.085 6150142.86153.21154.734.4270.050 4180182.14b196.28a192.70ab4.4270.019 9总增重Total weight gain114.73127.83123.815.0210.154 9体长/cm5687.5087.3787.591.3220.904 5<0.000 10.615 3Body length9090.9891.9393.781.6850.200 6120102.97104.29104.601.4970.421 0150112.02112.27114.971.4970.144 3180119.11120.51121.821.4970.181 8增长 Growth31.2333.4734.201.3620.230 6体高/cm5682.1183.5083.120.8930.261 2<0.000 10.011 8Body height9089.4789.3689.290.9300.888 012093.8694.8395.390.9620.244 515098.27b99.45ab101.17a0.9800.029 5180103.86b105.45ab107.17a0.9620.012 3增长 Growth21.9522.2724.060.8800.111 2胸围/cm 5694.2895.7296.471.3910.455 8<0.000 10.604 9Heart girth90106.97106.68107.241.5270.773 2120111.64114.74114.861.5080.118 8150118.28120.44120.551.5080.270 3180129.19131.54131.991.5080.174 6增长 Growth34.7036.5735.691.3670.534 0十字部高/cm5686.9288.8488.410.9220.138 9<0.000 10.086 1Hip height9094.9594.8395.020.9680.878 612099.6999.95100.851.0160.398 6150104.23105.45106.761.0170.067 8180109.86b111.42ab112.60a0.9990.045 7增长 Growth23.2022.9224.250.9670.475 5十字部宽/cm5623.6823.3123.650.4060.513 6<0.000 10.778 3Hip width9025.1125.6025.760.4610.285 812028.3728.4928.430.4500.841 215030.1130.0230.610.4610.329 118031.5232.2232.130.4610.259 0增长 Growth7.91b9.14a8.53ab0.5170.070 4

不同处理间，同行无字母或数据肩标相同字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。下表同

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference between the treatments (P>0.05), values with different small letter superscripts mean significant difference between the treatments (P<0.05). The same as the following tables

表3RES和SAG对犊牛血清营养物质代谢以及内分泌指标的影响

Table3EffectsoftheRESandSAGonlevelsofnutrientmetabolismandendocrineindexesintheserumofcalves

项目Item日龄Days of age处理TreatmentMRRESSAGSEMP值P-value处理Treatment日龄Days of age处理×日龄Treatment× Days of age血清尿素氮/ (mmol·L-1)607.747.927.502.3650.899 50.646 00.969 8Serum urea nitrogen, SUN1806.787.087.330.4280.375 8平均值 Mean7.267.507.411.1770.989 9游离脂肪酸/(mmol·L-1) 600.44a0.36b0.38b0.0150.001 00.803 40.100 5Free fatty acids, FFA 1800.410.400.390.0140.503 0平均值 Mean0.42a0.38b0.39b0.0090.003 5皮质醇/(ng·mL-1)6016.2316.2317.052.2340.799 00.803 50.544 5Cortisol, COR 1808.9216.8420.655.3140.126 3平均值 Mean12.58b16.53ab18.85a1.9550.083 3胰岛素/(uIU·mL-1)6015.29a8.61b10.12b1.2530.007 00.210 00.209 6Insulin, INS18013.8212.7712.381.5580.516 4平均值 Mean14.56a10.69b11.25b0.8710.008 2去甲肾上腺素/ (pg·mL-1)60398.74430.10370.6028.4720.592 80.713 50.269 3Norepinephrine, NE180411.55398.01409.5317.6870.151 1平均值 Mean405.15424.06390.0618.1020.643 0生长激素/(ng·mL-1)603.94b4.55a3.95b0.1120.000 70.879 70.388 0Growth hormone, GH1803.984.254.140.2360.416 4平均值 Mean3.964.404.050.1350.066 1表皮生长因子/(ng·mL-1)600.81b0.88a0.64c0.020<0.000 10.593 40.013 7Epidermal growth factor, EGF1800.870.730.800.0620.119 9平均值 Mean0.84a0.80ab0.72b0.0310.030 1类胰岛素样生长因子-Ⅰ/(ng·mL-1)60167.44b213.37a168.57b7.2090.000 10.517 20.036 9Insulin-like growth factor-I, IGF-I180195.43174.65203.1419.7320.316 3平均值 Mean181.44194.01185.8610.5210.695 7

表4RES和SAG对犊牛血清免疫和抗氧化指标的影响

Table4EffectsoftheRESandSAGonlevelsofimmunityandantioxidantindexesintheserumofcalves

项目Item日龄Days of age处理TreatmentMRRESSAGSEMP值P-value处理Treatment日龄Days of age处理×日龄Treatment× Days of age免疫球蛋白A/(g·L-1) 600.70a0.63b0.65b0.0180.014 8<0.000 10.130 3Immunoglobulin A, IgA 1800.740.740.720.0100.193 2平均值 Mean0.72a0.69b0.68b0.0100.022 0免疫球蛋白G/(g·L-1)6010.1210.049.720.3050.365 50.026 50.222 1Immunoglobulin G, IgG18010.1210.5310.490.1570.071 1平均值 Mean10.1210.2910.110.1870.746 6免疫球蛋白M/ (g·L-1)602.432.532.320.0740.054 70.047 60.814 5Immunoglobulin M, IgM1802.59a2.66a2.39b0.0690.009 3平均值 Mean2.51a2.60a2.35b0.0500.006 4肿瘤坏死因子-α/(pg·mL-1)6054.80ab57.90a51.55b1.9760.031 30.032 20.116 8Tumor necrosis factor α, TNF-α18053.1850.8551.151.5600.299 1平均值 Mean53.9954.3851.351.3500.243 7γ干扰素/(pg·mL-1)6034.0235.4233.640.9070.176 10.332 80.475 1γ interferon, γ-IFN 18037.9934.1836.172.8300.349 2平均值 Mean36.0134.8034.901.4320.805 1白介素-1β/(pg·mL-1) 6020.7721.1720.060.5640.369 10.679 80.888 4Interleukin-1β, IL-1β18020.6820.6720.080.4800.175 6平均值 Mean20.7320.9220.070.3400.200 9谷丙转氨酶/(U·L-1)6016.5422.5224.393.1540.089 90.615 40.344 4Alanine aminotransferase, ALT (U/L)18019.0021.8519.541.3780.156 2 平均值 Mean17.7722.1821.971.7010.137 8 谷草转氨酶/ (U·L-1)6054.0158.2362.945.7950.285 70.510 60.455 7Aspartate aminotransferase, AST18059.2650.5056.124.0500.137 7平均值 Mean56.6454.3659.532.9620.476 1超氧化物歧化酶/(U·mL-1)6049.3250.5948.261.7530.355 70.996 80.441 1Superoxide dismutase, SOD18052.6247.3648.163.1950.254 1平均值 Mean50.9748.9748.211.8640.563 7谷胱甘肽过氧化物酶/(U·mL-1)601 136.471 166.731 123.9758.5350.609 70.996 40.996 0Glutathione peroxidase, GSH-Px1801 129.881 172.811 125.2686.8610.701 7平均值 Mean1 133.181 169.771 124.6254.1110.822 8总抗氧化力/(U·mL-1)6010.8510.7810.860.4390.896 10.989 40.887 1Total antioxidant capacity, T-AOC18010.7411.1510.620.8480.663 3平均值 Mean10.7910.9610.740.4940.946 2过氧化氢酶/(U·mL-1)6042.68ab43.55a42.03b0.4840.034 90.997 40.253 2Catalase, CAT18036.5046.2345.514.3020.121 7平均值 Mean39.5944.8943.772.1010.189 9丙二醛/(nmol·mL-1)6037.61b35.06b44.87a1.9040.001 1<0.000 10.027 5Malondialdehyde, MDA1807.046.268.070.9610.194 0平均值 Mean22.33b20.66b26.47a1.0970.002 7

3 讨论

3.1 RES和SAG对犊牛生长性能的影响

RES和SAG用于反刍动物促生长剂的研究不多，其对单胃动物的促生长效果也未取得一致结果[12-15]。本试验中，添加RES提高了6月龄荷斯坦犊牛体重。这与Zhang等[13]在肉鸡上添加RES得到的结果相同。在应激条件下畜禽生产性能会降低，但是在热应激或者注射疫苗的情况下添加RES能提高生长性能[14]。此外，在猪和鹌鹑上添加RES对猪的体增重和采食量以及对鹌鹑的产蛋量影响不显著[4,15]，与本试验结论不一致。RES是有效的植物雌激素[16]，与雌二醇在结构上极为相似，都具有多酚结构，可通过下丘脑-垂体激素轴影响GH分泌，GH在直接促进机体蛋白质合成的同时促进生长激素受体发育，通过提高IGF-1分泌水平，发挥其对肌肉组织促生长作用，最终使动物生长速度加快[17]。这可能是RES促进动物生长性能的一个原因。RES提高动物生长性能，在不同动物表现形式不一样，可能是由于动物种类不同造成的。SAG或者类似物显著提高断奶仔猪[5]和鲤鱼[18]的生长性能，这与本试验结果趋势一致，但本试验条件下没有达到显著水平。在热应激条件下， SAG或者类似物也可提高绵羊的生长性能[9]。有研究报道，在产奶牛上添加博落回提取物(主要成分为SAG)，不影响奶牛增重、产奶量以及采食量[19]。尽管SAG对犊牛体重增加没有达到显著水平，但在180日龄时显著提高犊牛的体高和十字部高。可能是SAG具有一定的调控作用，使得更多的营养物质用于四肢骨骼发育，这为奶牛成年后具有优秀生产性能奠定了一定的基础。也有人认为是由于SAG在胃肠道内不可逆的抑制了L-氨基酸脱羧酶活性，减少芳香族氨基酸降解，提高了动物对色氨酸、苯丙氨酸在小肠中的利用效率和蛋白质的存留率，进而提高了动物生长性能[20]。也可能是由于RES和SAG都具有抗菌作用，保证了犊牛健康，促进了犊牛生长。

3.2 RES和SAG对犊牛血清指标的影响

血清生化指标经常用来反映动物机体健康状态，这些参数是动物生理、病理和营养状态的良好指标，并有可能用于阐明营养因素和饮食中添加剂对血清指标的影响。FFA是动物机体中重要的能量代谢物质，其代谢可以敏感地反映脂质代谢，并且其浓度变化反映机体的营养状况和体力活动[21]。Rivera等[22]在肥胖Zucker大鼠上的研究发现，RES导致FFA浓度显著降低，此外丁亚南等[23]在雄性SD大鼠上添加RES也显著降低血清FFA浓度，与本试验结论一致。Sergent等[24]在模拟肠脂肪消化的体外模型中，添加RES可以通过抑制三酰甘油消化降低肠细胞对脂肪酸的吸收，降低血清FFA的含量。Cho等[25]在仓鼠高能日粮中添加RES不影响血清FFA的含量，但是显著降低总胆固醇和三酰甘油的含量。SAG对动物血清FFA的影响尚未见报道，但是在蛋鸡[6]日粮中添加SAG对三酰甘油含量没有影响；而在蛋鸡[6]和猪[26]的研究中显著降低血清胆固醇含量，这种降低血清胆固醇的原因可能与通过肝HMG-COA还原酶抑制(胆固醇生物合成的限速酶)以及刺激肝胆固醇-7-羟化酶将胆固醇转化为胆汁酸的过程来刺激药用植物的低胆固醇血症活性有关[6]。此外，在比利时蓝牛公牛((131±3.5) kg)日粮中添加植物提取物香芹酚、肉桂醛和辣椒素的混合物，显著降低犊牛血清FFA浓度[27]。

胰岛素是营养物质分配稳态调节中的关键合成代谢激素，可以抑制脂肪酶的活性，减少体内脂肪的分解与动员，使血液中FFA减少，酮体生成减少[27-28]。在小鼠的高脂肪日粮中添加RES，显著降低血浆INS浓度[29-30]。RES改善人胰岛素敏感性，可能是由于RES诱导的氧化应激减少，导致通过蛋白激酶B(protein kinase B, Akt)途径产生更有效的胰岛素信号有关[31]。INS和FFA的变化一致也说明RES和SAG对INS和FFA的影响在正常范围内。

皮质醇是一种由肾上腺皮质分泌的类固醇激素，当动物处于应激状态时，它对动物体的松弛反应起作用；另外，动物体内皮质醇过量会引起血压升高，降低免疫力，炎症反应[32]。因此，维持皮质醇的最佳水平对于动物的生长非常关键。Balaji等[33]指出，体弱猪只免疫力低，血液中皮质醇浓度高。本试验在日粮中添加RES和SAG不影响犊牛血清皮质醇浓度。这也说明犊牛在该阶段的生长过程中没有遭受应激。GH是由脑垂体分泌的合成代谢关键激素，控制动物生长及营养物质代谢，促进机体核酸、蛋白质合成和脂肪分解[34]。IGF-I在反刍动物的体液内广泛存在，促进机体、器官、组织的生长发育，GH的合成代谢作用是通过在肝和骨骼肌中诱导IGF-I来实现的[35]。RES显著提高60日龄犊牛血清GH和IGF-I浓度，这可能是促进犊牛生长的原因，以至于在180日龄时RES组犊牛体重显著高于MR组。Zhang等[36]指出，添加桑叶黄酮能显著提高80日龄犊牛血清GH和IGF-I浓度。添加RES显著提高EGF浓度，这可能是因为白藜芦醇是有效的植物雌激素[16]，通过上调EGF及其受体，激活磷酸化细胞外调节激酶信号转导级联反应，促进胃肠道上皮细胞的增殖与分化，修复受损的黏膜，具有提高营养物质消化吸收的作用[37]。

在动物机体的免疫调节和防御感染中起重要作用的免疫球蛋白主要包括IgM、IgG和IgA。IgG是血清中主要的抗体部分，也是血清中主要的免疫球蛋白，在体液免疫中发挥重要作用；IgM是动物机体初次免疫应答早期阶段所产生的主要免疫球蛋白；IgA由动物肠系膜淋巴组织中的浆细胞产生，是机体防止病原微生物入侵的第一道防线[38]。本试验中，添加SAG对IgG浓度没有影响，但是显著降低IgM和IgA浓度。这与前人在仔猪[39]上添加主要成分为SAG的博落回提取物的结论不一致，他们都得出添加后显著提高IgG浓度的结论。但李会智等[40]在断奶仔猪上添加主要成分为SAG的博落回提取物显著降低IgG和IgA浓度，他认为是由于博落回提取物的添加产生了免疫抑制，也有可能是添加量不同，产生的结论也不一致。本研究结果表明，RES和SAG对犊牛免疫系统激活影响不大。

细胞因子是一种由造血系统和免疫系统激活，细胞产生的具有高活性的功能性肽、蛋白质或糖蛋白类物质[41]。细胞因子如IL-1β和TNF-α介导并在炎症反应中起作用[42]，并与营养物质吸收和利用改变有关[35]。Broussard等[43]报道，促炎性细胞因子诱导肝GH受体的抗性，导致具有促进人成肌细胞中蛋白质合成作用的血浆IGF-I显著降低。本试验中，SAG在60日龄显著降低血清的TNF-α浓度，但是不影响IL-1β和γ-IFN血清浓度，说明RES和SAG没有引起犊牛炎症的发生。

谷草转氨酶(AST)是反映心功能的重要指标，谷丙转氨酶(ALT)活性则是反映肝完整性以及功能的重要指标。当肝组织受到破坏时大量的转氨酶逸入血清，于是血清中的转氨酶活性增高。SAG和RES不影响这两种酶的活性，这说明在本试验条件下添加RES和SAG不影响犊牛的心和肝机能。给大鼠口服RES不影响这两种酶的活性[44]。此外在黄羽肉鸡日粮中添加主要成分为SAG的博落回提取物，也不影响这两种酶的活性[45]，这表明RES和SAG不会给机体代谢带来不良影响，也不会损伤肝细胞。

动物在正常生理过程中产生自由基，但过量自由基会破坏糖、蛋白质、核酸等生物大分子和膜的结构和功能，导致功能和代谢紊乱。T-AOC是衡量抗氧化物质总抗氧化能力的指标，MDA是脂质过氧化产物，可用作生物氧化应激的一般生物标志物[46]。GSH-PX被认为是防止氧化损伤的第一道细胞防御；作为生物体的主要抗氧化酶，CAT和SOD具有较强的自由基清除能力。自由基的形成和消除处于动态平衡状态[47]。从本试验结果可以看出，60日龄时，SAG组血清MDA浓度显著高于其余两组，这与Bavarsadi等[6]在蛋鸡日粮中添加SAG降低血清中的MDA浓度的结论不一致。这可能是由于动物品种和添加量不一致造成的，因为Bavarsadi等[6]在蛋鸡上添加的SAG低于一倍的量时对血清MDA浓度没有影响。前人认为，血根碱的抗炎和抗氧化活性与抑制直接清除活性氧引起的多形核中性粒细胞的氧化裂解和炎性因子的产生有关[48]或者与抑制细胞受体、G蛋白、磷脂酶C、胞浆Ca2+水平和蛋白激酶C的活性氧形成的信号通路有关[49]。SAG处理组犊牛血清CAT浓度显著低于RES处理组，与MR处理组相比，添加RES后也没有显著影响犊牛的血清抗氧化指标，这也与以前的研究结果不一致[4, 14-15, 50]，可能是由于动物品种和添加量不一致造成的。