辅助生殖技术治疗不孕不育症的研究

莎如拉 云志中 田潇峰 任宇 孙文芳 马玉珍

近年来不孕不育症患者呈逐年增长趋势, 给患者带来了巨大的精神压力和家庭的不稳定。自从1978年世界上首例“试管婴儿”诞生以来, 辅助生殖技术应用于不孕不育症的治疗, 到目前为止, 出生的试管婴儿已经达到500万人, 辅助生殖技术成为了不孕不育夫妇重要的治疗手段。本研究回顾性分析了2010年6月～2012年12月在内蒙古自治区人民医院用辅助生殖技术治疗不孕不育症患者的情况, 比较不同助孕方案下卵母细胞的成熟率、优胚率、着床率、妊娠率以及出生婴儿的健康情况, 研究辅助生殖技术治疗的优越性和安全性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2010年6月～2012年12月在内蒙古自治区人民医院就诊的不孕不育症患者118例, 其中63例行常规IVF-ET助孕；52例行单精子卵胞浆内注射(ICSI-ET)(其中15例行Half-ICSI)助孕, 其中3例取卵后卵母细胞未受精, 取消移植。115例辅助生殖助孕患者平均年龄为32.22岁,平均不孕年限为3.76年, 基础卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素 (LH)、雌二醇 (E2)平均值分别为 4.51 mIU/ml、3.37 mIU/ml、40.50 pg/ml；取卵日 E2平均为 2868.81 pg/ml。

1.2 实验方法

1.2.1 促排卵方案 控制性促排卵方案采用促性腺激素释放激素(GnRHa, 商品名：达菲林)长/短方案, 微刺激方案,促排卵药物为重组FSH(商品名：果纳芬)及尿促性腺激素(HMG)。1～2 个主导卵泡直径≥18 mm 时 , 注射 hCG 10000 IU或重组 hCG(商品名 ：艾泽 )250 μg, 34～36 h 行阴道 B 超引导下穿刺取卵。

1.2.2 体外受精 取出成熟卵母细胞复合体于1 ml受精液中, 5.5% CO2、37℃培养箱培养。同时取出精液梯度离心分离活精子, 将适量前向运动的精子加入卵母细胞中, 受精4 h,显微镜下去颗粒细胞, 将卵母细胞移到发育培养液中继续培养, 观察原核确定受精情况。

1.2.3 卵胞浆内单精子显微注射 取出成熟卵母细胞复合体于 1 ml受精液中 , 5.5%CO2、37℃培养箱培养 2 h, 10% 透明质酸酶去颗粒细胞, 再将卵母细胞培养2 h, 在显微镜下挑选前向运动精子尾部制动后, 将其注射卵母细胞胞浆中, 移入发育液中继续培养。

1.2.4 胚胎移植 根据胚胎中细胞数、胞质碎片以及细胞均一性将胚胎分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级。35岁以下患者移植胚胎2枚, 35岁以上患者移植3枚, 有卵巢过度刺激风险者,取消胚胎移植。

1.2.5 胚胎的冷冻保存 移植后剩余胚胎经玻璃化冷冻技术冷冻保存于液氮中。

1.3 观察指标 胚胎移植后14 d测血hCG, 确定是否妊娠,移植后28～30 d B超确定孕囊。并且对于试管婴儿进行随访。

1.4 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差(±s)表示, 采用t检验；计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 辅助生殖助孕患者的基本特征 卵母细胞成熟率为 85.77%, 受精率为 79.78%, 优胚率为 61.21%, 着床率为35.66%, 妊娠率为 55.65%, 累积妊娠率为 62.61%, 其中生化妊娠为5例, 流产7例, 宫外孕1例, 持续妊娠率为51.30%,至2013年8月56例孕妇出生试管婴儿72例, 双胎率为28.57%, 活产率为 97.22%, 男婴 34 例 , 女婴 38 例 , 所有婴儿均身体健康, 发育正常。

2.2 不同助孕方式胚胎及妊娠情况分析 115例患者在助孕方式上分别选择了IVF、ICSI或IVF/ICSI三种方案, 三种助孕方案患者在卵母细胞成熟率、受精率、优胚率比较差异均无统计学意义(P＞0.05)。IVF/ICSI方案着床率、妊娠率和持续妊娠率均显著高于IVF方案和ICSI方案, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

2.3 不同促排卵方案助孕患者胚胎及妊娠情况 三种促排卵方案患者卵母细胞成熟率、受精率、优胚率、着床率比较差异均无统计学意义(P＞0.05), 长方案和微刺激方案妊娠率和持续妊娠率明显高于短方案, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。微刺激方案与长方案妊娠率、持续妊娠率比较差异均无统计学意义 (P＞0.05)。见表 2。

表1 不同受孕方式辅助生殖情况比较(%)

表2 不同促排卵方案辅助生殖情况比较

2.4 试管婴儿出生情况比较 56例患者经辅助生殖技术生产试管婴儿72例, 双胎率为28.57%, 其中早产4例, 56例分娩患者中, 剖宫产47例。胎儿平均体重2911.06 g, 平均身长50.04 cm, Apgar评分 8.46 分。

3 讨论

IVF和ICSI是目前人类辅助生殖领域最常用的技术。通过数据比较发现IVF、ICSI以及IVF/ICSI方案在受精率、优胚率和胚胎着床率等方面没有显著性差异, 而IVF/ICSI方案的妊娠率显著高于IVF和ICSI方案, 因此, 针对获卵数较多且不明原因不孕多年以及IVF受精失败的患者采用部分ICSI, 避免了周期失败率 , 获良好的临床妊娠结局［1-3］。

临床上常用的超促排卵方案包括长、短、超短、超长、1/5长方案各有其优势［4,5］。长方案因其对LH的抑制迅速并持久而被用于年轻、月经周期规律的妇女；短方案因其有上调节作用而用于年龄偏大和既往有排卵障碍的妇女。但短方案促排卵周期中卵泡发育同步性较差, 可能造成获卵数较少；微刺激方案不抑制内源性FSH的升高, 模拟生理状态下卵子的生长, 减少外源促性腺激素(Gn)的作用, 降低卵巢过度刺激综合征(OHSS)的发生, 减少出生缺陷及出生后的远期风险, 是卵巢储备能力不足患者的优先之选；在本中心115例试管婴儿周期中长、短、微刺激方案的采用率分别为79.46%、8.93%和6.25%, 在获卵数方面长方案显著优于短方案、微刺激方案, 在妊娠率、持续妊娠率方面短方案较长方案与微刺激方案更高, 长方案与微刺激方案之间比较, 差异无统计学意义(P＞0.05)。由此可见长方案的使用具有优越性,获得了55%以上的临床妊娠率, 而在处理特殊患者时采用个体化的短方案、微刺激方案等能够很大限度地改善助孕效果,使更多患者获得生育的机会。

试管婴儿的健康状况是人们关注的焦点。目前, 国外的研究认为试管婴儿的生长和健康与自然受孕儿并无显著性差异, 慢性疾病和常见病的发生率未见增加, 其智力、情感和心理发育也与自然受孕相似；同时, 临床数据统计显示试管婴儿的早产率和流产率也接近自然妊娠, 但多胎妊娠率较高［6,7］。本中心 56例分娩患者出生试管婴儿 72例 , 其中男婴34例, 女婴38例。双胎率为28.57%, 高于自然受孕。新生试管婴儿的平均出生身长, 体重均达到正常标准, 并且胎儿出生后的生长及健康状况良好。与同期出生的自然受孕胎儿比较均没有显著性差异。双胎率显著高于自然受孕妇女。

综上所述, 试管婴儿技术作为一种积极的人工助孕手段不仅能够实现不孕不育夫妇孕育生命的愿望, 而且能够获得一个与自然受孕儿童相同的健康后代。