子宫内膜异位患者血清血管内皮生长因子、胰岛素样生长因子-I表达特征及其临床应用价值*

刘泽慧，杨晓杰

（1.河南省焦作市孟州市人民医院 妇产科，河南 焦作 454750；2.河南省焦作煤业集团中央医院 妇产科，河南 焦作 454000）

子宫内膜在正常情况下，生长于子宫内腔面，多种原因可使子宫内膜生长到子宫附件、子宫被覆面或机体其他部位，此种病理现象即称作子宫内膜异位症（endometriosis, Ems）[1-3]。这种种植在异位的子宫内膜组织不但具备内膜间质的围绕且具有内膜腺体的生长，异位的内膜组织还具有类肿瘤生长之特性，多发生于30～40岁左右的女性，发病率大约在12%左右。EMs虽为良性妇科疾病，但内膜组织由于雌、孕激素的刺激，其增殖能力很强并具备向周围器官转移的能力，从而产生多种病理反应。Ems的发病机理目前虽未完全明了，但普遍认为其与新生血管的增殖具有密切关系[4-6]。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF），早期也称为血管通透因子，有诱导血管新生的作用，集结于腹腔液中，促进新血管的生成。类胰岛素生长因子-I（insulin-like growth factor-I, IGF-I）亦称作“生长激素介质”，IGF-I是促进细胞生长、起到类胰岛素效应的因子。其在新陈代谢、内分泌疾病、肿瘤等生理病理过程中起到重要作用，可较强地诱导血管、淋巴管的新生。本次研究旨在通过检测患者VEGF和IGF-I于血清中的表达数值，观察其在EMs中的表达特征及其对于EMs诊断与病情评估的价值，以为本病的临床诊断与病情评估提供数据化支持，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院2015年1月‐2016年6月收治的67例子宫内膜异位症的患者作为观察组。观察组入选患者均经本院病理化验明确诊断；患者均可见痛经表现，盆腔检查时可见非活动型囊性肿物。观察组患者年龄为22～43岁，平均（35.42±8.22） 岁。依据美国生育协会（American Fertility Society,R-AFS）临床分期标准对观察组患者进行分期[7]。观察组患者R-AFS分期为：I～II 期32例，年龄为 24～43岁，平均（35.13±8.51）岁，III～IV期35 例，年龄为22～43岁，平均（35.24±8.19）岁，比较差异无统计学意义（t =0.937，P =0.352）。以本院同期收治的48例卵巢良性成熟畸胎瘤非EMs患者作为对照组，患者年龄为21～44岁，平均（34.96±8.53）岁。一般临床资料比较差异无统计学意义（P ＞0.05），可满足对比研究要求。两组患者均在完全知晓本次研究内容与目的的基础上自愿加入，并签属知情同意文件。本次研究向本院伦理委员会申报并获得批准及全程监督。两组入选的患者中均排除入选前6个月内有激素应用史者，合并其他相关内分泌类疾病、子宫肌瘤等子宫病变、乳腺增生等疾病的患者，输卵管结扎者及有重症器质性病变患者，有原虫病史患者，肝肾等重要脏器功能异常者。

1.2 方法

两组患者均采集空腹外周静脉血样3 ml，于24～26℃无菌环境中静置30 min，使用离心机按2 500 r/min的速度离心10 min，取得上层血清后于-80℃条件下储存。检测前于4℃条件下自然融化，如有杂质按上述方法二次离心；试剂静置30 min；将血清样品与试剂分别充分混匀，按1︰50比例使用蒸馏水稀释；按照试剂盒说明书步骤检验，将空白孔作为基准调零，使用全自动生化分析仪以免疫酶联吸附法（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）测定各个样品孔的吸光度值（OD值），得出VEGF和IGF-I的浓度，按稀释倍数计算出样品当中的VEGF、IGF-I的表达水平。

1.3 观察方法

将对照组与观察组患者VEGF、IGF-I的检测结果进行对比；对比观察组中I～II期亚组与III～IV亚组VEGF、IGF-I检测结果的差异。分析VEGF、IGF-I与EMs患者病情既R-AFS分期的相关性；计算VEGF、IGF-I表达水平对于子宫内膜异位症的诊断、临床分期的应用价值及尤登指 数。

1.4 统计学方法

使用SPSS 22.0软件进行统计学数据处理。其中计量资料用均数±标准差（±s）表示，对比采取t检验，相关性分析采取Spearman分析，诊断价值分析使用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve, ROC曲线）曲线下面积（area under curve, AUC）分析，诊断、分期临界值使用ROC曲线尤登指数分析。P＜0.05为差异有统计学意义。AUC标准：0.5～0.7诊断价值较低，0.7～0.9诊断价值中等， ＞0.9诊断价值较高。相关性标准：0.3＜ |r| ＜0.5为低度相关，0.5＜|r| ＜0.8为中度相关，|r|≤0.8为高度相关。

2 结果

2.1 血清VEGF、IGF-I表达水平对比

观察组患者血清VEGF、IGF-I表达水平均显著高于对照组，比较差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 血清VEGF、IGF-I表达水平统计对比 （±s）

表1 血清VEGF、IGF-I表达水平统计对比 （±s）

组别 例数 VEGF/(pg/ml) IGF-I/(ng/ml)对照组 48 117.69±30.16 77.84±11.93观察组 67 188.25±30.42 125.49±12.19 t值 12.310 20.855 P值 0.000 0.000

2.2 不同分期对比

III～IV亚组患者血清VEGF、IGF-I表达水平均显著高于I～II期亚组，比较差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 不同分期VEGF、IGF-I表达水平对比 （±s）

表2 不同分期VEGF、IGF-I表达水平对比 （±s）

组别 例数 VEGF/(pg/ml) IGF-I/(ng/ml)I～II期 32 151.02±34.89 95.82±10.53 III～IV 期 35 202.35±37.97 139.06±9.92 t值 5.744 17.306 P值 0.000 0.000

2.3 相关性分析

临床分期赋值：I级为1，II级为2，III级为3，IV级为4；血清VEGF、IGF-I表达水平与临床分期间具有高度正相关性，0.8＜ r ＜1，比较差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 EMs病情与VEGF、IGF-I水平相关性分析

2.4 对于EMs诊断的价值分析

血清VEGF、IGF-I检测对于EMs诊断均具有较高诊断价值，AUC＞0.9，VEGF最佳诊断值为145.50 pg/ml，IGF-I最佳诊断值为 87.90 ng/ml，差异具有统计学意义（P＜0.05）；见表4，ROC曲线图见图1。

表4 ROC诊断价值分析

图1 EMs诊断ROC曲线图

2.5 对于EMs病情评估的价值分析

血清VEGF、IGF-I检测对于EMs病情评估均具有较高诊断价值，AUC＞0.9，VEGF最佳诊断值为164.50 pg/ml，IGF-I最佳诊断值为107.50 ng/ ml；差异具有统计学意义（P＜0.05）；见表5，ROC曲线图见图2。

表5 ROC诊断价值分析

图2 EMs病情评估ROC曲线图

3 讨论

EMs是比较常见的妇科病，发病高峰为30～40 岁左右的女性。临床主要症状有痛经、性交痛，盆腔部位可扪及包块且有压痛等，严重者会导致不孕[8-10]。不孕女性中EMs的发病率约为29%。由于EMs具有类肿瘤样转移的特点，愈后患者复发率较高，给育龄妇女的身心带来极大的负担。虽然目前EMs的形成与演进机制尚未完全明晰，但多认为其发生与激素分泌异常、免疫功能调节异常、血管生成因素活跃有关。子宫内膜的转移种植、浸润生长特性与恶性肿瘤细胞类似。子宫内膜在异位种植且生长的前提是在原有的毛细血管动脉端或静脉端的血管丛中生长新的血管[11-13]。毛细血管外基质的降解，血管内皮细胞的增殖，形成血管芽胚，使新生血管达成联通。EMs发病最初的病理表现主要为血管生成活跃，因此遏制血管异常生长是临床治疗EMs的关键。VEGF的本质属于二聚体糖蛋白分子有关，可对血管的内皮细胞形成刺激，从而发挥促使其异常分裂增殖的作用。IGF-I为肝细胞分泌形成的小分子多肽物质，能够显著促进细胞的分裂与增殖。VEGF、IGF-I均具有较强的促血管生成作用，因此其在EMs的形成与进展过程均发挥重要促进作用[14-15]。

本次研究中，观察组VEGF、IGF-I表达水平显著高于对照组，观察III～IV亚组VEGF、IGF-I表达水平显著高于观察I～II亚组，同时VEGF、IGF-I表达水平与临床分期间具有高度正相关性。提示VEGF、IGF-I在EMs患者可见显著升高表达，并且可随病情进展而进一步升高表达。笔者对全部入选病例患者血清的VEGF、IGF-I表达水平进行了ROC曲线分析，结果表明血清VEGF、IGF-I检测对于EMs诊断具有较高诊断价值；本组数据表明当血清中VEGF≥145.50 pg/ml、IGF-I≥87.90 ng/ml时结合临床表现、医学影像学检查等可作出EMs初步诊断，通过病理检查确诊。通过对不同临床分期患者血清的VEGF、IGF-I表达水平进行ROC曲线分析证明，其对于EMs的病情评估具有较高的诊断价值，本组数据表明当血清 中 VEGF≥164.50 pg/ml、IGF-I≥107.50 ng/ml时结合患者临床表现等可评估为III～IV期EMs患者。由于本次研究共涉及67例EMs患者、48例非EMs患者，病例数较少，因此研究所得的诊断临界值与病情评估临界值仍有待于进一步大数据研究校正。

综上所述，EMs患者血清中的VEGF 和IGF-I的表达水平均可见明显升高，并可随病情进展而进一步升高；血清VEGF 和IGF-I表达水平的检测对于EMs临床诊断与病情评估均具有较高价值。鉴于血清VEGF 和IGF-I水平检测具有较为便捷的操作性，建议将此项检查作为EMs筛查、初诊、病情或疗效评估等的参考检查手段应用于临床，以提高EMs早期诊断率，为临床准确分期、正确制定治疗方案等提供数据化支持。