血液分析仪散点图法检测异型淋巴细胞的价值探讨

丁 飞，杨 洋，熊 林，唐诗凤，王晓珊，朱 欢

(遵义市第一人民医院检验科,贵州 遵义 563000)

近年研究表明，异型淋巴细胞(以下简称异淋)是由药物或病毒等刺激导致应激反应而产生幼稚细胞化或原始细胞化等形态变异的一类非典型淋巴细胞。已有研究证实[1]，EBV感染引起的传染性单核细胞增多症(IM)患者，其外周血异型淋巴细胞显著升高，甚至超过20.0%。异型淋巴细胞的大量出现对诊断IM有重要意义[2]，对于筛查病毒感染性疾病类型有辅助意义。 异淋检测的传统方法是显微镜检查(镜检)，其准确率高，但随着检验标本量的不断增多，若仅凭镜检，准确性虽高，但耗费人力、物力，且检测时限长。全自动血液分析仪通过复检规则部分减少了血液标本涂片的镜检率，大大减轻了检验人员的工作量。但血液分析仪不能对相关异淋细胞形态进行有效识别，极易造成漏诊和误诊。本研究对232例作异淋检测的血常规标本进行仪器法检测和血液标本涂片复检的同时，作血液分析仪散点图分析，现将结果分析如下。

1 资料与方法

1.1一般资料：2016年6月～2016年12月我院收治的、已行仪器检测、血液分析仪散点图分析和血液标本涂片镜检以检测异淋的发热患儿共232例，其中男109例,女124例，年龄2～14岁。

1.2材料：①仪器设备：显微镜(型号：OLYMPUS CX31，日本奥林巴斯株式会社)；全血细胞分析仪(型号：Sysmex 800i，日本森美康株式会社)。②试剂：瑞氏染液(珠海贝索生物技术有限公司)。

1.3方法：选择232例要求作异淋检测的血常规标本，均以血液标本涂片瑞氏-姬姆萨染色后镜检为标准。同时，用血液分析仪散点图法与复检规则法检测异淋结果，复检规则法异淋阳性报警见图1。

图1 含异淋的复检规则报警

1.3.1仪器检测：取患者EDTA-K2抗凝血，用Sysmex 800i血液分析仪于1 h内检测，通过观察是否出现Lymph%-1 /Atypical Variant lymphs(-)报警而提示异淋的有无。

1.3.2血液分析仪散点图分析：通过观察在单核细胞散点图的上方是否出现异常均匀分布的、呈椭圆形或近似长方形的典型散点图，或在淋巴细胞和单核细胞所在区域融合成灰白色并且向上延升的典型散点图，从而判断异淋的有无。

1.3.3血液分析仪涂片镜检：取EDTA-K2抗凝血制成涂片进行瑞氏染色，在显微镜下用油镜做WBC分类计数，观察异淋的有无并计算其阳性率。

1.4统计学方法：采用SPSS13.5统计软件对数据进行处理，计数资料用百分比(%)表示，采用四格表，行χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

散点图法和复检规则法检测异淋结果比较：散点图法检出真阳性83例，假阳性7例，假阴性2例，真阴性140例，该方法灵敏度为97.65%，特异度为95.24%，阳性预测值为92.22%，阴性预测值98.59%; 样本总符合率96.12%，阳性提示复检89例，复检率为38.79%；血液分析仪复检规则法检出真阳性84例，假阳性48例，假阴性1例，真阴性99例，该方法灵敏度为98.82%，特异度为67.35%，阳性预测值为 63.63%，阴性预测值99.00%; 样本总符合率78.88%，阳性提示复检132例，复检率为56.90%。经统计学处理，散点图法与复检规则法比较，其特异度、阳性预测值、样本正确率、复检率结果差异有统计学意义(P<0．05)，其灵敏度 、阴性预测值结果相比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1、表2。

表1散点图法与复检规则法与直接镜检法检测结果比较(例)

镜检结果例数散点图法 阳性 阴性 复检规则法 阳性 阴性 真阳性85832841真阴性14771404899合计23290142132100

表2散点图法与复检规则法检测效能比较(%)

方法SNSPPPVNPVRETCR散点图法97.6595.242.2298.5938.7996.12复检规则法98.8267.3563.6399.0056.9078.88

注：SN:灵敏度；SP：特异度；PPV:阳性预测值；NPV:阴性预测值；RE：复检率；TCR:总符合率

3 讨论

异型淋巴细胞根据形态不同,分为幼稚型异型淋巴细胞、浆细胞型异型淋巴细胞和单核细胞型异型淋巴细胞[3]，其多见于病毒感染的外周血中，其中以传染性单核细胞增多症、流行性出血热、病毒性肝炎、流行性上呼吸道感染、带状疱疹、流行性腮腺炎、风疹等较多见，正常人偶可见到。显微镜检查法作为异淋检测的传统方法，要求检验人员能够熟练掌握血片的制作和染色,并能掌握镜下正常及病理状态的不同细胞形态,能综合运用血液分析、显微镜检查、其他实验室检查与临床表现等才能对相关疾病作出明确的判断。因此，该法准确率虽高，但对检验人员的形态学知识和经验要求较高，且费人力物力，对所有待检血常规标本均行镜检将无法实现。

全自动血液分析仪运用复检规则部分减少了血液标本涂片的镜检率，减轻了人员的工作量,但血液分析仪不能有效识别相关异淋细胞形态。近年来，随着全自动血液分析仪的不断升级运用，血涂片复检率的降低，导致异淋的检出率明显下降，特别是临床医师未申请检查异淋的标本，其检出率更低，造成较多误诊和漏诊。Sysmex血液分析仪由日本希森美康公司采用4-DIFF和WBC/BASO两个通道进行白细胞计数和分类。4-DIFF通道采用流式细胞术、核酸荧光染色技术，使用专一溶血剂溶解红细胞，用聚次甲基核酸荧光染料与白细胞内的DNA和RNA结合，从而使之着色。当细胞通过激光束被照射时，细胞因其体积大小、染色程度、细胞质成分浓度或细胞核密度等不同，而产生与其特征相应的各种散射光和荧光，以侧向散射光(SSC)作为横坐标来反映细胞内容物的多少；以侧向荧光(SFL)作为纵坐标来反映细胞内核酸的含量，并得到白细胞4-DIFF散点图[4]。

从表1可见，散点图法与复检规则法比较，其方法特异度(95.9%)、阳性预测值(92.1%)、样本正确率(96.6%)、复检率(38.4%)与复检规则法的特异度(67.3%)、阳性预测值(63.6%)、样本正确率(78.9%)、复检率(56.9%)比较，结果均差异有统计学意义(P<0.05)。提示血液分析仪散点图法更为准确；其复检率较复检规则法低，可明显缩短检测时限。两种方法比较，散点图法的灵敏度(97.6%)、阴性预测值(98.6%)与复检规则法的灵敏度(98.9%)、阴性预测值(99.0%)结果相比较，差异无统计学意义(P>0.05)。因此，对于采用仪器法的复检规则和散点图法同时判定为阴性的病例，可结合临床资料初步筛查有无异淋细胞，从而大大减低了异淋检验的复检率，达到了快速筛检,提高工作效率的目的。

本研究中，对于仪器法复检规则132例异型淋巴细胞阳性病例，采用散点图法观察，仅89例阳性，镜检的真阳性为85例,散点图法的识别率与镜检法较为接近。工作中，对于仪器法复检规则阳性病例，应结合散点图观察，后者阳性再进一步结合显微镜复检。仪器法和血细胞形态学检查联合应用，不但保证了检验结果的准确性，还有效降低了异淋检验的漏诊和误诊率，为相关疾病的诊断提供准确的依据。