慢性HBV感染者外周血细胞亚群的特点及意义

2018-09-14史新原李绍民

吉林医学 2018年9期

史新原，马雷，李绍民

(佳木斯大学附属第一医院，黑龙江佳木斯 154000)

1 资料与方法

1.1一般资料：选取2017年2月～2017年8月在我院就诊的慢性HBV感染者(HBsAg和HBV-PCR检测阳性，且超过半年[3]，近半年来未接受抗病毒治疗；排除合并HAV、HCV、HDV、HEV、EBV、CMV感染者，排除合并脂肪肝、药物肝及肝癌患者)76例作为研究对象，其中肝功能正常高病毒载量组8例，肝功能异常高病毒载量组26例，肝功能正常低病毒载量组26例，肝功能异常低病毒载量组16例。76例患者年龄22～61岁，平均(43.55±9.46)岁，其中男50例，女26例。肝功能情况以丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、胆碱酯酶(ChE)三个指标界定。高病毒载量：HBsAg阳性，HBV-DNA 20×103；HBsAg阴性，HBV-DNA 2×103。低病毒载量：HBsAg阳性，HBV-DNA<20×103；HBsAg阴性，HBV-DNA<2×103。同时选取21例年龄相匹配的健康体检者(无肝病病史，无肝病症状及体征，病毒性肝炎血清标志物阴性、生化学指标正常)作健康对照组。

1.3所用仪器及试剂：雅培ARCHITECH I2000SR生化分析仪，BECKMAN COULTER Au5800生化检测仪，BD FACSCantoTMⅡ流式细胞仪，Scientific Industries Vortex Genie 2T漩涡震荡仪， LC-4012低速离心机。流式抗体、对照抗体及红细胞裂解液购自 BD公司。

1.4试验方法：肝功能及HBV-DNA检测由我院检验科完成。T细胞亚群的检测：取两支试管，标记为Ⅰ、Ⅱ。两管均加入100 μl抗凝全血，Ⅰ管加入20 μl荧光标记抗体，Ⅱ管加入等量对照抗体，在漩涡震荡仪上震荡10 s，室温避光孵育15 min；两管均加入1 ml经10倍稀释配比的红细胞裂解液，同法震荡10 s，室温避光裂解15 min；两管均添加鞘液2 ml，低速离心机(设定1 200 r/min)离心5 min，取出两管，一次性倾倒上清液，在吸水纸上蘸干管口残液；添加500 ul鞘液，同法震荡10 s，上流式细胞仪进行检测。

1.5统计学方法：流式数据应用BD FACSDiva Software分析。最终数据应用SPSS19.0分析，检验各组的正态性，两组间比较应用两独立样本t检验，多组间比较先进行单因素方差分析，而后应用q检验(方差不齐时应用校正方法)。P<0.05为差异有统计学意义。