银杏叶总黄酮类成分提取工艺研究进展

罗泰然

（成都七中嘉祥外国语学校，四川 成都 610023）

银杏科植物银杏（Ginkgo biloba L.），又名白果树，是古老的珍稀树种，被誉为地球的“长寿树”“活化石”。银杏叶是银杏的干燥树叶，黄酮类化合物是其主要的活性成分之一。银杏叶总黄酮不仅具有润肺、止痛、平喘等功效[1]，还具有降血脂、抗凝结、脑保护等作用[2]，常用于咳嗽、肺虚、心绞痛等疾病的治疗，还广泛运用于化妆品和食品添加剂等领域的工业生产[3]。因此，近年来国内学者对银杏叶总黄酮的提取工艺进行了大量的研究。

1 提取工艺

根据文献报道，银杏叶总黄酮提取方法主要有水浸法、酮类提取—氨水沉淀法、乙醇溶剂提取法、负压沸腾提取工艺、微波提取工艺、超声提取工艺等。

1.1 水浸法

闫高颖等[4]用水作为提取溶剂，对银杏叶总黄酮成分的提取工艺参数进行了考察，并采用正交设计优化，得出提取银杏叶总黄酮的最佳条件为：用26倍量的水在100℃条件下提取3次，每次1 h，该条件下银杏叶总黄酮的提取率达0.59%，这种方法可降低生产成本。

1.2 酮类提取—氨水沉淀法

李雨蔚等[5]采用酮类提取—氨水沉淀法，对金叶银杏落叶中总黄酮成分的提取进行了研究，并应用响应面分析法对其总黄酮的提取条件进行了优化，得出最佳工艺条件为：液固比13.5 mL/g、丙酮与水的比例为70∶30、提取温度55℃、提取时间3 h。鉴于目前我国对于以丙酮—水为提取溶剂的研究报道较少，此工艺能为银杏叶总黄酮的提取提供新的思路。

1.3 乙醇溶剂提取法

鲍宇茹等[6]采用乙醇溶剂提取法，对采集于河南工业大学校园的银杏叶中黄酮类物质进行提取，并通过正交试验得出最佳的提取工艺参数为：提取温度80℃、乙醇体积分数70%、提取时间120 min、液固比5∶1，该条件下银杏叶总黄酮提取率为89.8%。

1.4 负压沸腾提取工艺

负压沸腾提取工艺的原理是溶剂的沸点会随外界大气压的降低而降低，所以在负压条件下，可在较低的温度下使溶液处于沸腾状态，然后进行提取。周昊等[7]为减少银杏叶中总黄酮等有效成分的热分解，采用负压沸腾提取工艺，提取采自邳州银杏叶生产基地的银杏叶（银杏黄酮质量分数为9.80%）中的总黄酮等热敏性成分，并通过响应面分析法优化后得出最佳的提取工艺参数为：乙醇体积分数60%、提取压力-0.08 MPa、提取时间70 min、提取温度50℃、液固比10 mL/g、提取2次，该条件下银杏叶总黄酮提取率为93.55%。

1.5 微波提取工艺

微波提取工艺的原理是细胞吸收微波能后内部温度迅速上升导致细胞破裂，使细胞内有效成分自由流出，随后在较低的温度条件下被萃取、过滤和分离。王卫华等[8]为优化银杏叶总黄酮的提取及纯化的最佳方法，以采自山东菏泽郊区的银杏叶为原料，通过微波提取工艺，以银杏叶中总黄酮提取液在510 nm所测吸光度为参考指标，确定以银杏叶为原料微波提取总黄酮的最佳工艺条件为：乙醇体积分数80%、料液比1∶40、提取1次、提取时间1 h，该条件下银杏叶总黄酮提取率为91.4%。

1.6 超声提取工艺

申伟培[9]等以银杏叶中总黄酮醇苷和银杏内酯类成分含量的综合评分为指标，以超声提取工艺辅以正交设计优化，得出最佳提取工艺为：用70%乙醇超声提取1次，每次20 min，超声提取功率为150 W。崔润丽等[10]通过正交试验与超声提取工艺研究银杏叶中总黄酮类化合物的最佳提取条件，结果表明，超声波辅助提取法仅用10 min，其提取效率比乙醇浸提5 h的提取率高出9%，比微波辅助提取工艺高出6.1%。

1.7 酶辅助提取法

张伟等[11]发现银杏叶中的黄酮类化合物主要包裹在以纤维素为主构成的细胞壁内，溶出存在阻力，影响了提取效果。而纤维素酶是一类复合酶，可逐级降解纤维素而破坏细胞壁骨架结构，增加细胞内黄酮类化合物的溶出。张伟等采用纤维素酶辅助提取法，在酶解温度为45℃、酶处理pH值为4、酶用量为0.3 mg/mL的条件下酶解2 h，银杏叶总黄酮提取率为2.80%，与未添加纤维素酶相比，总黄酮提取率增加了45.83%。

1.8 超临界流体CO2萃取法

该萃取法利用超临界流体替代常规有机溶剂来对有效成分进行萃取和分离。在超临界状态下的CO2性质介于液体和气体之间，此时传质能力和溶解性能较好。张玉祥等[12]使用超临界CO2萃取技术提取银杏叶有效成分，发现其最佳工艺条件为：20 MPa的压力下，夹带剂15%，50℃萃取40 min，该条件下所得银杏叶提取物黄酮含量可达27%。该方法操作方便，并实现了萃取和分离过程的一体化。

2 小结

水浸法具有工艺和设备简单、操作方便、产品安全、无环境污染等特点，但提取效率低、杂质含量高、后续处理复杂、耗时长、产品不易保存和干燥。乙醇溶剂提取法具有无毒、安全性高、产品易保存和干燥的特点，但该方法乙醇溶剂用量较大，易燃且回收操作复杂。酮类提取—氨水沉淀法是有机溶剂提取法的改进，不仅具备了有机溶剂提取法的优点，而且还利用氨水沉淀法提高了提取银杏叶中总黄酮的产量，所得提取率较高，提取工艺流程独特。负压沸腾提取工艺可以较好地保护热敏性成分且减少淀粉、蛋白质等大分子杂质；微波提取工艺操作简便、成本低且污染较小，但是这两种方法的研究不够系统和深入，且对设备的要求较高。超声提取工艺所用仪器简单，自动化程度极高，便于大规模生产使用，而且提取时间短、成本低、提取率高。酶辅助提取法的优点在于酶解法专一性强、效率极高，对环境污染较小，但酶对温度和pH值要求十分严格，对设备要求也较高。超临界流体CO2萃取法不仅节能、省时，而且这种低温、高压的条件尤为适宜热不稳定和易氧化物质的提取，但其投资费用较高，目前较难以推广。

总之，相对于水提法和乙醇提取法等基本提取方法，超声提取法在银杏叶总黄酮提取中有着较好的工业应用前景。而负压沸腾提取法、酶辅助提取法、超临界萃取法等新技术在保护热敏性成分、减少环境污染等方面具有一定的优势，需要进行进一步、系统的研究，以推广应用。