马方综合征临床表现及FBN1基因检测5例分析

杨明烽 楼杨勇 吕小辉 王朝辉 陈立军

马方综合征是一种常染色体显性遗传病，人群发病率约为6.5/10万[1]。因15号染色体上的FBN1基因突变导致其编码的原纤维蛋白1缺陷，引起心血管、眼、骨骼等多系统病变，主动脉瘤/夹层为其主要致死病变。诊断上目前多采用2010年的修订版Ghent方案[2]，除根据临床表现外，FBN1基因检测已经成为一项重要的诊断手段。笔者对本院近年来诊治并作FBN1基因检测的5例马方综合征患者的临床表现资料进行了整理和分析，现将结果报道如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料 本院2014年1月至2016年12月收治并完成FBN1基因检测的5例马方综合征患者，男3例，女2例，年龄19～37岁；就诊原因皆为主动脉病变，患者的一般资料见表1。

表1 5例马方综合征患者的一般资料

1.2 诊断方法

1.2.1 采用修订版Ghent诊断方案[2]根据这一方案，若患者无马方综合征家族史，但主动脉根部直径Z值≥2，合并晶状体脱位、FBN1基因突变、系统评分＞7分，3者之一，或晶状体脱位合并FBN1基因突变并主动脉病变，则马方综合征诊断成立；对于有家族史的患者，具有晶状体脱位、系统评分≥7分、主动脉根部直径Z值≥2，三者之一诊断即成立。修订版Ghent方案系统评分共13项，腕征和拇指征（两征均阳性评3分，仅其中一征阳性评1分）、胸廓畸形（鸡胸2分、漏斗胸或胸部不对称 1分）、足跟畸形（2分，若仅平足1分）、气胸（2分）、腰骶部硬脊膜囊扩张（2分）、髋臼内陷（2分）、身体下部/上部或臂展/身高过大（1分）、脊柱畸形（侧凸或胸腰的脊柱后凸，1分）、肘关节外展受限（1分）、面部特征（1分）、皮肤牵拉纹（1分）、近视＞3屈光度（1分）、二尖瓣脱垂（1分）。

1.2.2 其他检查方式 采用主动脉CTA检查评估主动脉病变，采用超声检查评估心脏情况，由眼科医师检查晶状体是否脱位及视力情况，详细询问每例患者的家族史并记录直系亲属的医疗情况。

1.3 FBN1基因检测和分析方法 取患者外周静脉血2 ml，置于乙二胺四乙酸抗凝管，外送深圳华大基因研究院提取基因组DNA，根据美国国立生物技术信息中心数据库中FBN 1基因的序列设计引物PCR扩增该基因的全部外显子及剪接位点区域，后采用芯片捕获高通量测序，检查获得的FBN 1基因致病突变，根据患方意愿，取患者和家系成员血样，采用Sanger法验证是否具有该突变。对比人类基因突变数据库进行分析，错义突变另利用Polyphen 2软件及SIFT软件预测其致病性并检索参考文献作判定，根据修订版Ghent方案，将无义突变、碱基缺失、碱基插入、剪接突变直接判定为致病突变。基因变异命名根据人类基因组变异协会建议的规则描述。

2 结果

2.1 5例马方综合征患者的系统评分结果 见表2。

表2 5例马方综合征患者的系统评分结果（分）

由表2可见，除例5外，其他4例患者系统评分总分均＞7分。

2.2 5例马方综合征患者的FBN1基因检测结果 见表3。

表3 5例马方综合征患者的FBN1基因检测结果

由表3可见，例1、5为碱基缺失，例2为剪接突变，故直接判定为致病突变。例3、4为错义突变，根据Polyphen 2软件及SIFT软件预测，均为致病突变。例2和例3的FBN1基因突变既往文献已报道为致病突变[3-4]。例3的c.5540G＞T突变使得原纤维蛋白-1的1847位氨基酸由半胱氨酸变为苯丙氨酸，鉴于该蛋白的半胱氨酸序列高度保守[5]，具有重要功能，故该突变为有害。

其中例2、4、5进行了Sanger法验证，其测序峰图见图1。

由图1可见，例2、例5具有芯片捕获高通量测序发现的FBN1基因突变，例4经过包含其父母的家系验证，可见其父母都不具有c.4022A＞G突变，故为新生突变。

图1 FBN1基因突变位点的Sanger法测序峰图（箭头指示突变的碱基，a：例2患者；b：依次为例4患者本人、其母亲、其父亲；c：例5患者）

3 讨论

马方综合征，最早由法国儿科医生Antoine Marfan所描述，并逐渐认识到马方综合征具有骨骼、眼、心血管三大系统病变，并阐明了其具有常染色体显性遗传方式，1991年Dietz等[6]确立了马方综合征由FBN1基因突变导致，在这一过程中，马方综合征的诊断标准也一直在演进，从主要根据临床表现的1988年柏林方案，到1996年Ghent方案，直至最新的2010年修订版Ghent方案，FBN1基因检测已经成为诊断马方综合征的重要手段。

分析本组患者，例5若不进行FBN1基因检测，则尚不能建立马方综合征诊断。且FBN1基因检测，除用于明确诊断外，对于有生育意愿者，如例1，还可以明确其是否适宜生育，避免将疾病遗传至下一代[7-8]，这对于马方综合征这一重大遗传疾病具有显著意义。例2、3、4通过基因检测，不但查明了其致病突变，而且可用于明确家系中的其他成员的FBN1基因型，若通过费用低廉的针对该位点的Sanger法测序明确其具有该致病突变，则可在致死性主动脉病变发作前提前获得诊断，以进行相应的预防措施，包括服用β受体阻滞剂或血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂类药物以延缓主动脉根部扩张[9]，若排除FBN1基因突变，则可避免相应的恐慌，此点对于家系中的幼儿尤其重要，因其可能尚无马方综合征的相关外显病变，无法进行临床诊断。

我们发现了3种鲜有文献报道的FBN1致病突变，进一步丰富了对于马方综合征和FBN1基因的认识。例1、5为碱基缺失形成框移突变，例2为剪切突变，都可造成原纤维蛋白1部分缺失，致严重功能障碍，这与既往报道相符[9]，即与无主动脉病变的马方综合征相比，患有主动脉瘤/夹层者，FBN1基因的突变类型中相对严重的框移突变和剪切突变的比例更高。

本组中病例较少。芯片捕获高通量测序准确性相当高，但最好进行Sanger法验证，本组患者有2例未进行。此外，本组患者仅1例进行了家系验证，其余病例待后续进一步随访完善。