高效液相色谱分析中污染峰的分析

陈志会

高效液相色谱分析法是现在药品检验含量有关物质的常用方法，在色谱图中出现异常峰的情况比较多，下面我就拿就高效液相色谱分析中出现的污染峰这一情况来谈一下其出现的原因和應对方法。

1.概念及工作原理

高效液相色谱法是采用高压输液泵将特定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱然后对供试品溶液进行分析测定的色谱方法。注入的供试品溶液经流动相进入色谱柱，在色谱柱中实现其各组分的分离，分离的各组分在依次进入检测器，由数据处理系统将其处理成为色谱信号，所以高效液相色谱仪一般由储液器、高压泵、进样器、色谱分离柱、检测器、记录仪等几部分组成（如图一所示）。

2.引进污染的途径

药品的质量控制一般包含五个方面：人员、机器、原料、方法、环境。所以如果高效液相色谱分析中所检验的药品溶液出现了污染峰，引入污染的途径就可以从检验员的理论素质、高效液相色谱的运行状态、物料的清洁程度、人员操作的规范以及实验环境的清洁这五大方面入手，抓到引进污染的病灶。

3.原因

3.1高效液相色谱仪引进的污染

若高效液相色谱仪出现污染从而导致检验的药品溶液出现了污染峰，我们就必须从其组成结构出发，考虑是否是管路污染、色谱柱污染、进样器污染、进样垫污染或者是检测器污染。

3.2 人员操作过程中引进的污染

说到人员操作引进的污染我们就不是不把高效液相色谱分析药品的检验过程做一下简单回顾：配制供试品溶液所需溶剂的配制→样品处理→样品称量→供试品溶液的配制→供试品溶液倒入进入高效液相色谱仪所需的进样小瓶→高效液相色谱仪分析。

人员操作过程中引进的污染，最终环节就是导致供试品溶液的污染，如果供试品溶液出现污染我们就必须反推到整个配制过程，分析得出的引入污染原因如下：

3.2.1配制样品所需的溶剂出现了问题

配制样品所需的溶剂一般都需要用试液、试药、超纯水来配置，所以如果是溶剂出现问题，首先要排查的就是上述三个物质，另外要考虑的就是溶剂配制过程中引进了污染，如配制过程中与试药接触的工具以及配制溶剂过程中所需的器皿，是否是他们的污染导致溶剂的问题。还有就是排查是否是溶剂在滤过装置以及最终的溶剂存放装置中出现了的污染。

3.2.2样品处理和称量过程出现了问题

样品的处理最常见的就是研细，所以研细所用的研钵就是我们关注的重点。另外就是称样过程中引进的污染，如称样勺、称量纸、手套、天平托盘等的污染，造成了称样的样品的污染，最终导致供试品溶液污染，高效液相色谱分析中污染峰的出现。

3.2.3供试品溶液的配制过程出现了问题

存放样品的称量瓶、盛放溶剂的烧杯、定容配制供试品溶液的滴管、需要转溶时所用的移液管，哪个环节出现污染都可以导致配制的供试品溶液的污染。

3.2.4其他

此外，我们所检验的样品一般都需要部分取样才来送检，取样工具的洁净度以及存放样品的包装也是引进污染的风险因素。此外，存放供试品溶液的进样小瓶及其瓶盖这两者的污染也可以在高效液相色谱的分析实验过程中引入污染峰。

4.应对方法

4.1针对高效液相色谱污染采取的措施有：

冲洗高效液相色谱整个管路系统；冲洗或者更换色谱柱；冲洗进样器；更换进样垫；以及清洗检测器。

4.2针对人员操作过程中引进的污染采取的措施有：

规范各类器皿的清洗操作，确保器皿的清洁性；可采用一次性产品尽量用一次性产品如进样小瓶、瓶盖还有滴管，避免因清洁不干净而引进污染；规范实验员的操作：如试药称取时多称出来的试药不可以放回原瓶；大瓶试液使用时要倒出一部分，不可以直接用滴管等取用，倒出的溶剂仍然不可以倒回原瓶等；还有定期清理天平以及实验室，确保实验环境的整洁。

5.总结

质检工作是一项繁琐而精准的工作，需要我们时刻保持谨慎、细致，认真分析和排查出现问题的原因，保证实验顺利进行，确保数据能的真实反应药品的状态，最终保障药品的质量。

（作者单位：天津药物研究院药业有限责任公司）