半夏与虎掌南星、天南星的鉴别研究

黄雍 刘梦娇 张琴 张裕民 张志国 杨磊

〔摘要〕 目的 探索半夏与虎掌南星、天南星的鉴别特征，确保临床用药安全有效。方法 采用性状鉴别、薄层定性鉴别以及HPLC指纹图谱进行研究。结果 半夏呈类球形，偶有1～2个小侧芽，无序着生；虎掌南星呈扁半圆形，侧芽数量1至多个，且与主块茎多在一个平面，排列有规律，形如虎掌；天南星呈扁球形，少有侧芽；薄层鉴别结果显示三者在Rf值0.05、0.23和0.99处显相同颜色斑点，虎掌南星在Rf值0.91左右处的斑点随着侧芽数量的增多，逐渐趋向天南星，与半夏存在一定差别；指纹图谱结果显示虎掌南星在20.38 min和55.79 min处比半夏新增2个峰，与半夏指纹图谱相似度在0.88左右，天南星在6.663 min、20.858 min、42.412 min和63.287 min处比半夏新增4个峰，与半夏指纹图谱相似度为0.697。结论 半夏、虎掌南星、天南星在性状鉴别、薄层鉴别、指纹图谱鉴别均存在较大差别，其变异品种也存在差异，建议临床区别应用。

〔关键词〕 半夏；虎掌南星；天南星；性状鉴别；TLC；HPLC

〔中图分类号〕R285.5 〔文献标志码〕A 〔文章编号〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2018.04.010

〔Abstract〕 Objective To explore the identification characteristics of Pinelliae Rhizoma （Banxia）， Pedate Pinellia Rhizoma （Huzhangnanxing） and Arisaematis Rhizoma （Tiannanxing）， and ensure safe and efficacy of clinical use. Methods This three kinds medicines were identified by using character identification， thin layer qualitative identification and HPLC fingerprints. Results Banxia was spherical， with occasionally one to two small buds， growing disorded. Huzhangnanxing was flat semi-circular， with one to more lateral buds， and with the main tuber in a plane， arranged in a regular， shaped like a tiger palm. Tiannanxing was flat spherical with few lateral buds. The TLC of this three medicines showed same spots at Rf values of 0.05， 0.23 and 0.99. With the increase of lateral buds， the spot of Huzhangnanxing at Rf 0.91 gradually tend to Tiannanxing， and was different with Banxia. The fingerprint of Huzhangnanxing showed two new peaks at 20.38 min and 55.79 min compared with Banxia， their similarity was 0.88. Tiannanxing added 4 peaks at 6.663 min， 20.858 min， 42.412 min and 63.287 min than Banxia. And the similarity of fingerprint of Tiannanxing and Banxia was 0.697. Conclusion The morphological identification， thin layer identification and fingerprint identification of Banxia， Huzhangnanxing， Tiannanxing are significantly different， and their variants also have some differences. So it is suggested that clinical application should be different.

〔Keywords〕 Pinelliae Rhizoma； Pedate Pinellia Rhizoma； Arisaematis Rhizoma； character identification； TLC； HPLC

半夏来源于天南星科半夏Pinellia ternate （Thunb.）Berit.的块茎，性温、味辛、有毒，具有燥湿化痰，降逆止呕，消痞散结的功效[1]。

虎掌南星来源于天南星科半夏属掌叶半夏Pinellia pedatisecta Schott.的块茎，性温，味苦、辛，有小毒，具有降逆止呕，燥湿化痰，消痞散结等功效[2-3]。天南星来源于天南星科天南星属天南星Arisaema erubescens（Wall.）Schott、异叶天南星Arisaema heterophyllum BL.或東北天南星Arisaema amurense Maxim.的块茎，性温，味苦、辛，有毒，具有消肿散结的功效[1]。近年来，半夏临床需求较大，野生资源日益枯竭，更由于环境因素的影响，半夏属植物形态变异丰富[4]，部分人工栽培品生有不规则小侧芽，个体细小的虎掌南星外型与之极为相似，常误做半夏用，从而影响半夏质量及临床用药安全。本实验采用性状鉴别、薄层定性鉴别以及HPLC指纹图谱研究对半夏、虎掌南星、天南星以及临床收集的一些疑似品种进行鉴别，以期为三者鉴别方法的建立提供实验数据，为临床用药安全提供保障。

1 仪器与试药

1.1 仪器

LC-20AT型高效液相色谱仪（日本岛津），AL204型电子天平（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司），HX-06型超声清洗器（武汉恒信世纪科技有限公司），HY-SY4型水浴锅（长沙汇一仪器有限公司）。

1.2 试药

乙腈（色谱纯，ACE），乙醇（安徽安特生物化学有限公司），硫酸（衡阳市凯信化工试剂有限公司），石油醚（天津市恒兴化学制造有限公司），乙酸乙酯（天津市大茂化学试剂厂），丙酮（衡阳市凯信化工试剂有限公司），甲酸（成都市科龙化工试剂厂），甲醇、磷酸（湖南汇虹试剂有限公司），以上试剂均为分析纯，水为娃哈哈纯净水。半夏对照药材购自中国药品生物制品检定所（121272-200401），1～8号供试品按外观侧芽数量由无到多排列（见图1）。经湖南省药品检验研究院方石林教授鉴定1号为半夏，4～6号为虎掌南星，8号为天南星，2、3、7号为临床上遇到但无法确定品种的药材。40 ℃低温干燥后粉碎过80目筛，备用。

2 方法与结果

2.1 性状鉴别

采用传统经验鉴别方法对半夏，虎掌南星和天南星的性状、直径、表面、颜色、质地、断面、气味等特征进行观察和比较。见表1。

2.2 薄层定性鉴别

2.2.1 对照药材溶液的制备 取半夏对照药材粉末1 g，加乙醇10 mL，加热回流1 h，滤过，滤液浓缩至0.5 mL即可。

2.2.2 供试品溶液的制备 分别精密称取1～8号供试品粉末1 g，按“2.2.1”项下方法制成供试品溶液。

2.2.3 色谱条件与方法 吸取对照药材溶液及1～8号供试品溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯-丙酮-甲酸（30∶6∶4∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰[1]。见图2。

2.3 HPLC指纹图谱研究

2.3.1 色谱条件 色谱柱Sepax C18（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B），梯度洗脱：0～55 min 5%～55%A，55～70 min 55%～65%A，70～80 min 65%～80%A，80～90 min 80%～90%A。检测波长270 nm，流速1.0 mL·min-1，柱温26 ℃。

2.3.2 精密度实验 取半夏对照药材溶液，按“2.3.1”项下色谱条件重复进样6次，计算各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积，RSD分别为1.70%、2.30%，表明仪器精密度良好。

2.3.3 稳定性实验 取半夏对照药材溶液，按“2.3.1”项下色谱条件，分别于室温下0、2、4、8、12、24 h进样分析，计算24 h内各色谱峰相对峰面积，RSD 1.40%，表明样品24 h内稳定性良好。

2.3.4 重复性实验 取半夏对照药材约1 g，精密称定，按“2.2.1”项下方法制备供试液，平行6份，按“2.3.1”项下色谱条件进样，计算各色谱峰相对峰面积，RSD 1.69%，表明方法重复性良好。

2.3.5 指纹图谱的建立 精密吸取半夏对照药材溶液及各供试品溶液10 μL注入高效液相色谱仪，按“2.3.1”项下色谱条件测定。见图3。

2.3.6 指纹图谱相似度评价 采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A版）进行数据处理分析，以半夏对照药材为参照图谱计算相似度。见表2。

3 讨论

3.1 性状鉴别

半夏部分栽培品长有少数不规则小侧芽，易与较为细小的虎掌南星混淆，经查阅大量文献和实物考证，归纳出两者主要鉴别点：半夏呈类球形，质地呈粉性，在茎痕周围，半夏密布的根痕为明显的凹点状，偶有1～2个小侧芽，无序着生，常不在一个平面。虎掌南星呈扁半圆形，由主块茎及多数附着的小块茎组成，每一块茎中心都有一茎痕，侧芽数量1至多个，且与主块茎多在一个平面，排列有规律，形如虎掌。天南星呈扁球形，少有侧芽，无序着生。因此，性状鉴别着重观察侧芽的数量和着生方式，可作为半夏、虎掌南星、天南星鉴定和质量控制的依据之一。

3.2 薄层定性鉴别

薄层定性鉴别结果显示半夏、虎掌南星、天南星在Rf值0.05，0.23和0.99处显相同颜色斑点，虎掌南星在Rf值0.91左右处的斑点随着侧芽数量的增多，逐渐下移并趋向天南星，与半夏存在一定差别，但差别不明显，尚不能作为区分三者的鉴别方法。

3.3 HPLC指纹图谱鉴别

本实验在指纹图谱建立时，分别考察了Generall C18AQ（250 mm×4.6 mm，5 um）和Sepax C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，其中Sepax C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱所得谱峰最多，分离度较好。在选择流动相过程中分别考察甲醇-水、乙腈-水、乙腈-0.1%冰醋酸、和乙腈-0.1%甲酸等流动相，结果乙腈-0.1%甲酸水溶液的洗脱效果最好，故选择此作为流动相。分别考察254 nm和270 nm波长，结果表明在270 nm处各色谱峰峰形较好，色谱信息较为丰富，分离度较好，故选用270 nm作为检测波长。

虎掌南星指纹图谱在20.38 min和55.79 min处比半夏新增2个峰，与半夏相似度在0.88左右，天南星指纹图谱在6.663 min，20.858 min，42.412 min和63.287 min处比半夏新增4个峰，与半夏的相似度为0.697。2、3、7号药材是在临床上遇见，但不能确定品种的药材，根据专家推测为半夏的变异品种，其指纹图谱与半夏对照药材指纹图谱对比，2号在41.006 min；3号在41.603 min各新增1个峰；7号在30.893 min，38.274 min，45.406 min新增3个峰。因半夏和虎掌南星为同科同属植物，亲缘性较大，半夏属植物形态变异丰富，临床上出现很多变异品种，且半夏、虎掌南星和天南星均有小毒，为保障用药安全性，临床应该严格区分。指纹图谱研究中新增的色谱峰以及相似度均表明各样品之间化学成分存在显著差异，临床疗效也将不同[5-7]，新增的色谱峰可为半夏、虎掌南星、天南星及变异品种的鉴别提供参考依据。

参考文献：

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