非洲紫罗兰的组织培养和快速繁殖

●杨凉花（陕西省安康市农业科学研究所 陕西 安康 725021）

紫罗兰又名非洲堇，为苦苣苔科多年生常绿草本花卉，叶片呈椭圆形，花色有白色、紫色、粉色等，有单瓣和重瓣，品种繁多，花期长，花和叶均有较高的观赏价值，是优良的室内装饰花卉，也可用来净化室内空气，近年来深受人们喜爱。常规繁殖方法是扦插，因受繁殖材料和季节的限制，繁殖速度较慢，不容易进行大批量的规模生产，难以满足人们对市场的需求，采用组织培养方法可以进行快速繁殖，在短时间内获得大量成苗，并且保持其优良品性。

1 材料与方法

1.1 外植体的选择

选择健壮植株的幼嫩茎段。

1.2 培养条件

温度：一般用25℃恒温培养。

光照：光照时间为每天12小时，光照度为1 800Lx。

灭菌前pH为5.6～5.8，蔗糖浓度为30g/L，琼脂浓度为0.68g/L。

2 生长与分化情况

2.1 外植体的处理

于晴天选取健壮、无病虫害植株的幼嫩茎段，置入烧杯中，滴入少许洗涤剂，在流水条件下冲洗1小时，送入无菌接种间，在超净工作台上先用75%的酒精浸泡30秒，无菌水冲洗，再用0.1%升汞灭菌10～12分钟，无菌水冲洗4～5次，无菌滤纸吸干表面水分，用解剖刀切去基部受损的组织，然后用剪刀剪成0.5～1.0cm的小段备用。

2.2 诱导分化培养

将经过无菌处理好的外植体材料分别接种在培养基MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L上，经过20天培养以后，基部开始萌动，陆续产生愈伤组织；再经过10天以后，愈伤组织开始逐渐膨大变绿，并形成大量密集的小芽。

2.3 继代增殖培养

在诱导分化培养基上培养约40天以后，将诱导出的愈伤组织从培养瓶中取出，用解剖刀将其分开，分别转接到培养基MS+BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L上进行培养，每瓶接种4～5个，经过15天以后，开始形成绿色丛生芽，逐渐展开伸长，并开始长出新叶，增殖倍数达到5倍以上。每隔20～25天将丛生芽分瓶转接，进行继代增殖培养，从而扩大培养规模，建立快速繁殖体系。

2.4 生根培养

在增殖培养基中继续培养，大约25天以后，基部开始陆续生成少量的白色细根，但是速度较慢，将已经长成的 2～3cm高的幼苗分别转接到培养基1/2MS+IBA0.05mg/L中进行生根培养，约12天以后，幼苗基部开始生根，18天以后，幼苗的根数平均达到3条以上，并且逐渐变粗，生根率达到85%以上。

3 瓶苗的移栽

生根的组培苗由于长期生长在恒温无菌的条件下，不能直接移栽到大田，必须经过一段时间的炼苗。选取生长健壮的瓶苗，从无菌培养室中取出，置于普通室内，自然温度和自然光照炼苗5天左右，再去掉瓶盖炼苗；如果培养基干裂，可以注入少量清水，再炼苗5天，用镊子从培养瓶中取出小苗，放入提前准备好的28～30℃的温水中，小心洗去根部附着的培养基，用生根粉浸沾幼苗根部，即可进行移栽。移栽非洲紫罗兰的苗床用珍珠岩和腐叶土混合细沙土合成的基质，先用多菌灵处理苗床，再用水浇透，过一天以后再进行瓶苗移栽。小苗移栽于苗床后，再浇一遍水，然后用塑料薄膜覆盖苗床，搭成拱棚，温度应保持在20～22℃，还要注意补充水分，避免阳光直射，如果阳光较强，还需要加盖遮阳网，并且把塑料薄膜两头揭开，保持通风，10天以后揭去塑料薄膜，移栽成活率在90%以上。