胸腔积液γ-干扰素释放试验在结核性胸膜炎诊断中的价值*

曾 君，王光明△，王 港，吴本清，张润玲，汤冬娥，戴 勇，朱 鹏

(1.深圳市光明新区中心医院检验科，广东深圳 518107；2.深圳市人民医院临床医学研究中心，广东深圳 518020；3.深圳市坪山区人民医院中心实验室，广东深圳 518000)

结核性胸膜炎是一种常见的结核分枝杆菌感染疾病，可在任何年龄段发病，胸腔积液是主要并发症之一。近年来结核病的发病率呈明显上升趋势，有研究报道渗出性胸腔积液中约有54.8%为结核性胸膜炎引起，对该病的诊断主要依靠影像学、实验医学、病理学等检查，但实际临床工作中存在诸多难题[1]。近年来，体外γ-干扰素释放试验(IGRA)受到国内外临床医务工作者的高度重视，它是一种结核分枝杆菌感染的体外免疫检测新方法，灵敏度和特异度均较高。本研究通过分析105例疑似结核性胸膜炎患者的胸腔积液IGRA检测数据，综合评价胸腔积液IGRA在结核性胸膜炎患者中的诊断价值，为IGRA用于临床诊断结核性胸膜炎提供依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2016年1-12月胸腔积液患者105例为研究对象，年龄19～92岁，其中男69例，女36例。结核性胸膜炎的诊断标准参考中华人民共和国卫生行业标准《肺结核诊断》(WS 288-2008)。经临床诊断为结核性胸膜炎患者52例纳入结核组；非结核性胸膜炎患者53例，其中IGRA结果阴性的42例患者纳入IGRA阴性-非结核组；IGRA结果阳性的11例患者纳入IGRA阳性-非结核组。非结核组包括肺部感染性疾病、胸腔积液、胸膜炎、癌性胸腔积液患者，均否定既往有结核感染史。

1.2仪器与试剂 本研究的主要仪器是ESCO-170B型二氧化碳培养箱，中科中佳SC-3612型低速离心机，雷杜RT6500酶标仪，上海力康生物安全柜；检测试剂盒由武汉海吉力生物科技有限公司提供，阴性刺激剂为磷酸盐缓冲液(PBS)，结核刺激剂为PBS加ESAT6-CFP-10融合抗原，阳性刺激剂为PBS加外源凝集素。

1.3胸腔积液IGRA检测 收集无菌操作穿刺胸腔积液20～50 mL，置于无菌离心管中，3 000 r/min离心5 min，去上清液，并留取1.5 mL的沉淀悬液，混匀后分别加入到阴性对照管(N)、阳性对照管(P)、结核刺激管(T)3种培养管中，每管0.5 mL，并加入对应的刺激剂；轻柔混匀后放入37 ℃二氧化碳培养箱培养(22±2)h，培养后的胸腔积液以3 000 r/min离心5 min；吸取上清，以ELISA 方法检测人γ干扰素(IFN-γ) 水平，所有操作均严格按照IGRA诊断试剂盒说明书进行。IGRA检测阳性判断标准是结核刺激剂干扰素水平减去阴性对照干扰素水平大于或等于0.35 IU/mL，并且阳性对照干扰素水平减去阴性对照干扰素水平大于或等于0.50 IU/mL；IGRA检测阴性判断标准是结核刺激剂干扰素水平减去阴性对照干扰素水平小于0.35 IU/mL，并且阳性对照干扰素水平减去阴性对照干扰素水平大于或等于0.50 IU/mL。

2 结 果

105例胸腔积液患者胸腔积液IGRA全部检测成功，其中IGRA阳性结果63例，阴性结果42例；结核组中阴性对照干扰素水平明显高于IGRA阴性-非结核组(t=0.001 6)和IGRA阳性-非结核组(t=0.001 7)阴性对照干扰素水平；且结核组结核刺激剂干扰素水平明显高于IGRA阴性-非结核组(t=6.327 61×10-8)和IGRA阳性-非结核组(t=5.906 37×10-7)结核刺激剂干扰素水平，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 各组胸腔积液IGRA干扰素水平比较(IU/mL)

3 讨 论

IGRA在结核病的实验室诊断中广泛开展，受到国内外临床医务人员的高度重视。IGRA的原理是结核分枝杆菌感染患者的体液中存在结核特异效应淋巴细胞，该细胞受到结核分枝杆菌特异抗原刺激后分泌IFN-γ，实验室通过检测刺激培养后的体液IFN-γ水平来判断机体结核分枝杆菌感染情况[2]。WILKINSON等[3]的研究表明结核性患者的胸腔积液中，抗原特异性T淋巴细胞比外周血中高出10倍，理论上讲是有希望通过IGRA将其与非结核性胸腔积液鉴别开来。ARIGA等[4]的研究结果表明，胸腔积液IGRA检测能够准确迅速地诊断活动性结核性胸膜炎。

目前，国内外有大量的文章讨论IGRA检测结果对结核病诊断的价值[5-6]，诸多文献表明IGRA的特异度及灵敏度都较高[7-8]，也有文献报道IGRA联合结核分枝杆菌-DNA或腺苷脱氨酶检测结果能够有效提高诊断率[9]。而极少有研究报道IGRA检测值在结核性胸膜炎中的诊断价值，本研究显示结核性胸膜炎患者胸腔积液IGRA检测阴性对照干扰素水平明显高于非结核性胸膜炎患者(P<0.05)，说明结核性胸膜炎患者胸腔积液中存在分泌干扰素的细胞，使结核性胸膜炎患者胸腔积液干扰素基础水平增高，与石瑞如等[10]的研究报道相同。本研究结核性胸膜患者胸腔积液IGRA检测结核刺激剂干扰素水平明显高于非结核性胸膜炎患者(P<0.05)。因此，通过综合分析胸腔积液IGRA检测阴性对照及结核刺激剂干扰素水平能够有效诊断结核性胸膜炎，体现胸腔积液IGRA检测值的临床应用价值。