异烟酸-巴比妥酸分光光度法测定土壤样品中氰化物方法试验

马恒

（新疆维吾尔自治区有色地质勘查局测试中心 乌鲁木齐 830026）

试样中的氰离子在弱酸性条件下与氯胺T反应生成氯化氰，然后与异烟酸反应，经水解后生成戊烯二醛，最后与巴比妥酸反应生成紫蓝色化合物，该物质在600nm波长处有最大吸收。

1 试剂及器皿

⑴ 酒石酸溶液ρ（C4H6O6）＝150g/L：称取15.0g酒石酸溶于水中，稀释至100mL，摇匀。

⑵ 硝酸锌溶液ρ[Zn(NO3)2·6H2O]＝100g/L：称取10.0g硝酸锌溶于水中，稀释至100mL，摇匀。

⑶ 氯化亚锡溶液ρ（SnCl2·2H2O）＝50g/L：称取5.0g二水合氯化亚锡溶于40mL盐酸溶液（1mol/L）中，用水稀释至100mL，临用时现配。

⑷ 硫酸铜溶液ρ（CuSO4·5H2O）＝200g/L：称取200gCuSO4·5H2O溶于水中，稀释至 1000mL，摇匀。

⑸ 氢氧化钠溶液ρ（NaOH）＝10g/L、15g/L、20g/L、100g/L：称取10.0g、15.0g、20.0g、100.0g氢氧化钠溶于水中，稀释至1000mL，摇匀，贮于聚乙烯容器中。

⑹ 氯胺 T溶液ρ（C7H7ClNNaO2S·3H2O）＝10g/L：称取1.0g氯胺T溶于水中，稀释至100mL，摇匀，贮存于棕色瓶中，现用现配。

⑺ 磷酸二氢钾溶液（pH=4）：称取136.1g无水磷酸二氢钾（KH2PO4）溶于水中，加入2.0mL冰乙酸（C2H4O2），用水稀释至1000mL，摇匀。

⑻ 异烟酸-巴比妥酸显色剂：称取2.50g异烟酸（C6H6NO2）和1.25g巴比妥酸（C4H4N2O3）溶于100mL氢氧化钠溶液（15g/L）中，摇匀，现用现配。

⑼磷酸盐缓冲溶液(pH=7)：称取34.0g无水磷酸二氢钾(KH2PO4)和35.5g无水磷酸氢二钠（Na2HPO4）溶于水中，稀释至1000mL，摇匀。

⑽异烟酸溶液ρ（异烟酸）＝15g/L：称取1.5g异烟酸（C6H6NO2）溶于25mL氢氧化钠溶液（20g/L）中，加水稀释定容至100mL。

⑾吡唑啉酮溶液：称取0.25g吡唑啉酮（3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮，C10H10ON2）溶于20mLN,N-二甲基甲酰胺[HCON(CH3)2]中。

⑿异烟酸-吡唑啉酮溶液：将吡唑啉酮溶液和异烟酸溶液1:5混合，现用现配。

⒀ 氰化钾标准溶液ρ（KCN）＝0.500μg/mL：吸取10.00mL氰化钾标准溶液（50μg/mL）于1000mL棕色容量瓶中，用氢氧化钠溶液（10g/L）稀释至标线，摇匀，现用现配。

⒁分析天平：精度0.01g。

⒂U-3010紫外可见光分光光度计，带10mm比色皿。

⒃ 恒温水浴装置，控温精度±1℃。

⒄500mL蒸馏瓶；100mL接收瓶；25mL具塞比色管；250mL量筒。

2 试验方法

称取约10g干重的样品于称量纸上（精确到0.01g），略微裹紧后移入蒸馏瓶。连接蒸馏装置，打开冷凝水，在接收瓶中加入10g/L氢氧化钠溶液作为吸收液。在加入试样后的蒸馏瓶中依次加200mL水、3.0mL氢氧化钠溶液和10g/L硝酸锌溶液，摇匀，迅速加入5.0mL酒石酸溶液，立即盖塞。打开电炉，由低档逐渐升高，馏出液以2～4mL/min速度进行加热蒸馏。接收瓶内试样近100mL时，停止蒸馏，用少量水冲洗馏出液导管后取出接收瓶，用水定容（V1），此为试样A。蒸馏瓶中只加200mL水和3.0mL氢氧化钠溶液，按试样A的蒸馏步骤操作，得到空白试验试样B。

取6支25mL具塞比色管，分别加入氰化钾标准溶液0.00mL，0.10mL，0.50mL，1.50mL，4.00mL和10.00mL，再加入氢氧化钠溶液至10mL。标准系列中氰离子的含量分别为 0.00，0.05，0.25，0.75，2.00，5.00μg/mL。向各管中加入5.0mL磷酸二氢钾溶液，混匀，迅速加入0.30mL氯胺T溶液，立即盖塞，混匀，放置1～2min。向各管中加入6.0mL异烟酸-巴比妥酸显色剂，加水稀释至标线，摇匀，于25℃显色15 min（15℃显色25min；30℃显色10min）。在600nm波长下，用10mm比色皿，以水为参比，测定吸光度。以氰离子的含量（μg/mL）为横坐标，以扣除试剂空白后的吸光度为纵坐标，绘制校准曲线测定试样A和空白试验试样B。

3 结果计算与表示

氰化物含量ω（mg/kg），以氰离子（CN-）计，则：

式中：ω为氰化物或总氰化物（105℃干重）的含量，mg/kg；a为试料A的吸光度；A0为空白试料B的吸光度；α为校准曲线截距；b为校准曲线斜率；V1为试样A的体积，mL；V2为试料A的体积，mL；m为称取的样品质量，g；Wdm为样品中干物质含量，%。

4 结果与讨论

4.1 方法检出限、测定下限

本试验在其他条件不变的情况下，对空白进行了测定，空白试样中未检出氰化物，将10个空白试样中加入1.00mL0.50μg/mL氰化物标准溶液测定。由测定结果求得标准偏差为0.003mg/kg，方法的检出限由3倍标偏差表示为0.009mg/kg，方法的测定下限由4倍标偏差表示为0.036mg/kg。如表1所示(空白试样中未检出氰化物，将每一个试样中加入1.00 mL0.50μg/mL氰化物标准溶液。)。

表1 方法检出限、测定下限

4.2 方法精密度分析

应用本方法对3个样品做方法的精密度分析，均平行测定6次，计算相应的相对标准偏差(RSD)，测定值的相对标准偏差(n=6)在1.97%～5.21%之间。试验结果表明，试验样品相对标准偏差允许范围内。结果见表2所示。

表2 方法精密度试验(n=6)

4.3 方法加标回收率

为确定方法的可行性，对1个土壤样品进行加标回收率试验(表3)。加标回收率为85%（试样含量未检出，按二分之一检出限0.005mg/kg参与计算），满足土壤样品相关技术要求。

表3 方法加标回收率