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蔬菜农药残留快速检测技术与应用实践研究

2018-08-03朱建恩

现代食品 2018年11期
关键词:氨基甲酸酯静置底物

◎ 朱建恩

(广东产品质量监督检验研究院,广东 佛山 528300)

我国是一个农业大国,随着人们生活水平的不断提升,食品安全问题逐渐成为普遍关注的话题。近年来,我国人口持续增长,农业种植面积也得到扩张,随之而来的便是果蔬质量问题。农业生产中,农药是必不可少的化学药品,其使用程度的增加,严重危害了蔬菜质量、粮食产量。农药的过度使用,导致其在蔬菜中形成残留,继而引发中毒的现象,这是当前非常严重的问题,必须应用农药残留快速检测技术加以解决。

1 农药残留快速检测技术概述

1.1 应用原理

当前农药残留最为严重的是蔬果残留,比较常见的农药有有机磷农药、氨基甲酸酯农药等。其中,有机磷农药若在种植中使用不规范或者频率过高,会影响蔬果质量,因此农药残留检测的重点便是有机磷、氨基甲酸酯这两类农药。

一般检测时比较常用方法包括酶抑制法、免疫分析法、生物传感器法、酶抑制分光光度法。酶抑制通过是通过有机磷与氨基甲酸酯农药本身所带有的可特异性,抑制昆虫中枢神经系统中的乙酰胆碱酯酶活性,使其无法正常传导,最终中毒而死。一般实验过程中,通过碱酯酶、有机磷(氨基甲酸酯农药)之间的反应抑制酶活性,使用胆碱酯酶将靛酚乙酸酯进行水解,使其在催化作用下成为乙酸、靛酚,从而对样品内是否有农药残留进行判断[1]。

1.2 检测设备

常用的农药残留速测仪以多通道光路设备为主,该设备可以同时检测若干个样品,且操作简单、成本低,检测完毕之后可以直接显示出检测结果,并且具备数据接口。此外,农药残留检测实验过程中,比较常用的设备也包括安鑫宝WT-51A、欧达科仪PR-202、CNY-817C等。试剂以酶为主,如乙酰胆碱酯酶(AChE),底物则多使用硫代乙酰胆碱、碘化代丁酰胆碱、碘化硫代乙酰胆碱。显色剂主要是二硫代二硝基苯甲酸、2,6-二氯靛酚。经过一段反应时间之后通过分光光度法,按照吸光值的变化,计算ChE抑制率,根据最终计算结果判断有机磷氨基甲酸酯农药的残留量[2]。抑制率如果≥50%,且呈阳性,则可以判定其超标。如果检验时使用比色法,也就是分光光度法,其检出限时间以3 min为准。

2 农药残留快速检测流程

蔬菜中一旦有农药残留,必然会影响人们的身体健康,必须使用可行的检测技术展开农药残留检测,检验蔬菜是否符合食品安全标准,从根本上解决食品安全问题。现如今,农药检测所使用的方法主要有生物测定法、化学分析法、生物与化学相融合的综合检测法,这3种方法可以更加准确且全面地检测、分析蔬菜中农药残留。所选择的检测技术不同,操作方式也不尽相同。为了快速、准确的完成蔬菜农药残留检测,检测人员必须选择最合适的快速检测技术。同时,实际选择过程中,必须要对蔬菜特性进行考虑[3]。蔬菜的储存时间较短,检测期间务必要提高效率,在有限的时间内快速、高效地完成检测。所以,此次分析中主要围绕酶法快速检测技术展开分析。实际检测时,农药残留快速检测流程分为采样、提取液、选择实验试剂、明确静置时间、确定检测时间这几个步骤。

2.1 取样

所选择的叶类蔬菜主要选取叶尖部分,果菜选取果皮,使用剪刀将其剪为1 cm左右的试样,重量以2 g为最佳。针对汁液内包含酶破坏性、深色物质褪色元素的果蔬(如辣椒、萝卜、番茄)以及可以使最终结果呈现假阳性的蔬菜(如芹菜),取样时需要将整株浸泡于器皿中,或者采用淋喷的方式。

2.2 提取液

使用提取液来提取样品内农药溶解,提取时间以2~10 min为最佳。

2.3 选择试剂

蔬菜农药残留快速检测中比较常用的快速检测试剂有提取液、酶底物以及显色剂。一般所采用的试剂均是从仪器的生产厂家直接选购、配送[4]。

2.4 明确静置时间

静置时间是掺入酶与显色剂之后到掺入底物中的时间。实验过程中发现,静置时间如果维持在6~12 min,最终获得的检测结果并不明显差异。

2.5 确定检测时间

检测时间是比色皿放置于比色池中,将盖板盖在上方,按下启动键直到显示最终检测结果的这一段时间,一般设置为3 min。

3 蔬菜农药残留快速检测技术实践

3.1 应用范围与类型

使用酶法进行蔬菜农药残留快速检测,其适用范围包括叶菜类、果菜类、瓜菜类等,这些种类的蔬菜中含有有机磷类以及氨基甲酸酯类农药残留,有机磷类农药主要包括倍硫磷、氧化乐果和辛硫磷,而氨基甲酸酯类农药则包括残杀威、克百威、速灭威以及灭多威。

3.2 检测设备和样品的处理

检测设备包括GDYN-110SB型农药残毒快速检测仪、天平、振荡器、魄力器皿、检测酶、移液枪、缓冲液、底物与显示器等。当完成设备的准备工作之后,必须处理实验所需样品,将准备好的蔬菜样品称取1 g放置于烧杯内,并且在烧杯中注入5 mL缓冲液,以湿震荡法持续60~120 s,将提取液倒出之后静置3~5 min即可。

3.3 培养样品溶液

在干试管内放入容量为2.5 mL的样品提取液,选择相对应的对照液,分别在样品提取液和对照液中注入0.1 mL的酶液与显色剂,将试管摇晃均匀之后,放置在温度为37 ℃的恒温箱内15 min,随后在试管内注入容量为0.1 mL的底物,随后观察显色是否出现反应,放置到快速检测仪器内,根据仪器操作要求完成蔬菜农药残留快速检测工作。

3.4 检测结果

最终所得出的结果判断可以通过抑制率进行判断:

公式中,Δ0代表对照液反应3 min之后,吸光度所呈现的变化值,Δt是3 min之后样品所呈现的吸光度变化值。

对最终检测结果进行分析,以抑制率为最终结果,设置50%为界限。若蔬菜样品计算后的抑制率<50%,证明蔬菜农药残留率满足食品安全要求,即蔬菜样品安全;若≥50%且多次试验之后结果依然不变,则证明蔬菜样品农药残留超标,即蔬菜本身不安全。为了深入展开残留超标样品,建议试验气相色谱仪以及高效液相仪这两个设备展开详细检测,如此便可以得知蔬菜内农药残留含量。

通过上述分析可知,使用酶法可以快速且高效地完成蔬菜农药残留快速检测,试验所消耗的时间小于20 min,且经过验证最终试验准确性较高,可以保证检测后蔬菜安全性。

4 结语

蔬菜农药残留快速检测是保证蔬菜食品安全以及人体健康的重要举措,应用可行的蔬菜农药残留快速检测技术,有利于解决市场上蔬菜农药残留问题,并且推动我国农业发展。

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