高效液相色谱法测定胃痛舒片中厚朴酚与和厚朴酚含量

2018-07-31张火旺黄潇潇邓淑芳

中国药业 2018年14期

张火旺，黄潇潇，邓淑芳

（广东省河源市药品检验所，广东河源 517000）

胃痛舒片收载于《卫生部药品标准·中药成方制剂（第十四册）》[1]，由猪胃黏膜、厚朴、海螵蛸、甘草、颠茄(浸膏)5味中药组方，具有健脾和胃、理气止痛功效，用于脾胃虚弱引起的胃烷胀痛、嘈杂吞酸、消化性溃疡和慢性胃炎等症。厚朴作为主成分，对腹胀、便秘、食积、气滞具有很好疗效。目前，未对该制剂中的特定药材进行专属性成分含量测定。本研究中选取厚朴中的厚朴酚与和厚朴酚作为指标性成分，采用高效液相色谱法测定胃痛舒片中厚朴酚与和厚朴酚的含量，为质量标准的建立和完善提供参考，现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

LC-20AT型高效液相色谱仪（日本岛津公司）；CPA225D型电子分析天平（德国赛多利斯公司）；KQ-250DA型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

1.2 试药

甲醇（色谱纯，TEDIA），水为超纯水；厚朴酚对照品（批号为110729-201513，供含量测定用），和厚朴酚对照品（批号为110730-20161，供含量测定用），均由中国食品药品检定研究院提供；胃痛舒片（批号分别为160503，160401，160101，河北金兴制药厂，依次编号为1，2，3）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：InertSustainC18柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇 -水(78∶22)；检测波长：294 nm；流速：1.0 mL/min；进样量：20 μL；柱温：30 ℃。以峰面积外标法定量[2]。

2.2 溶液制备

对照品溶液：称取厚朴酚对照品10.06 mg，精密称定，置50 mL容量瓶中，用甲醇溶解至刻度，作为厚朴酚对照品贮备液。称取和厚朴酚对照品10.94 mg，精密称定，置50 mL容量瓶中，用甲醇溶解至刻度，作为和厚朴酚对照品贮备液。再精密量取厚朴酚对照品贮备液与和厚朴酚对照品贮备液各2.00 mL，置25 mL容量瓶中，用甲醇溶解至刻度，各用0.45 μm微孔滤膜滤过，即得。

供试品溶液：取本品20片，去糖衣，研细，精密称取1.0 g，置具塞锥形瓶中，精密量取25.00 mL甲醇溶液，密塞，称定质量，超声处理（16 kHz，296 W）30 min，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，用微孔滤膜（0.45 μm）滤过，取续滤液，即得。

阴性对照品溶液：按其质量标准中处方比例，同法制备不含厚朴的阴性样品，按供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

系统适用性试验：按2.1项下色谱条件，精密吸取混合对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，结果见图1。可见，厚朴酚与和厚朴酚分离好，阴性无干扰。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察：分别精密量取对照品溶液2，5，10，15，20，25 μL，按 2.1 项下色谱条件分别进样，测定峰面积，以峰面积（A）为纵坐标、厚朴酚与和厚朴酚对照品进样量（C）为横坐标绘制标准曲线，得回归方程，厚朴酚为 A=1 410 362.384 6 C-1 677.166 6，r=0.999 9(n=6)；和厚朴酚为 A=1 399 145.802 0C+686.7147，r=0.9999(n=6)。结果表明，厚朴酚与和厚朴酚进样量分别在 0.032 19～0.402 4 μg和0.035 00～0.437 6 μg范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验：取同一混合对照品溶液，连续进样6次，进样量为 20 μL，测定峰面积。结果的 RSD分别为0.90%和0.80%（n=6），表明仪器精密度良好。

重复性试验：取同一批样品，精密称取6份，按样品测定方法平行测定两组分的含量。结果厚朴酚与和厚朴酚的 RSD分别为1.21%和1.14%(n=6)，表明方法重复性良好。

稳定性试验：取同一供试品溶液，每隔2 h测定1次，连续测定6次。结果厚朴酚与和厚朴酚含量的 RSD分别为1.15%和1.09%(n=6)，表明供试品溶液在12 h内稳定。

加样回收试验：精密称取已知含量的样品（批号为160503，平均每片质量为0.312 5 g，厚朴酚含量为每片0.080 2 mg，和厚朴酚含量为每片0.083 1 mg）适量，共6份，分别精密加入混合对照品溶液1.0，2.0，3.0 mL（分别精密量取厚朴酚贮备液与和厚朴酚贮备液各3.00 mL置10 mL容量瓶中，用甲醇溶解至刻度，作为混合对照品溶液，厚朴酚质量浓度为0.060 36 mg/mL，和厚朴酚质量浓度为0.065 64 mg/mL），按供试品溶液制备方法制备。按2.1项下色谱条件分别进样，记录色谱图，计算厚朴酚与和厚朴酚的回收率。结果见表1。