渔药的给药方法与技术（5）

孟思妤 孟长明 陈昌福

（1.河南省新乡市康大消毒剂有限公司，453700；2.华中农业大学，430070）

将稀释后的药物加入试管，或加入冷却至45～55℃ M-H培养基中，立即在无菌条件下制作系列药物浓度梯度的药敏试验试管（图2）。

图2 试管内药敏试验的试管内药物添加方法（仿日本化学疗法学会，1975）

用无菌生理盐水或M-H肉汤培养基，将菌液配置成106个/mL浓度的菌悬液。在配制好的含药浓度梯度液体培养基试管中加入上述供试致病菌的菌悬液。制备好的药物敏感测试试管放置于培养温度为28℃条件下（注意根据致病菌的特性选择培养适宜温度），培养一定的时间后，再观察试验结果。

液体培养基稀释法获得的是供试药物对致病菌的最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration，MIC）和最小杀菌浓度（minimal bactericidal concentration，MBC）。MIC的判读即为肉眼观察无致病菌生长试管中的最低药物浓度，为该该供试药物的MIC。MBC的判读即为供试药物杀灭99.9%或以上受试致病菌所需的最低浓度。具体做法是将高于MIC 1～3个稀释度的试管中的培养液，转接种于相应的培养基平皿上，在28℃恒温条件下培养18～24小时，与无致病菌生长的平皿对应的药敏试管中的药物浓度，即判为杀灭99.9%或以上受试菌所需的MBC。

如果选用的抗菌素对某种致病菌没有抑制作用，使用后就不可能获得对疾病的治疗效果。然而，即使某种抗菌素能抑制某种致病菌，不同的致病菌对同一种抗菌素的感受性也是存在差异的。因此，为了达到药到病除或者获得对疾病比较好的治疗效果，筛选病原菌敏感的抗菌素作为治疗养殖鱼类疾病的药物是很有必要的。现在，研究者们采用在养殖现场分离到的养殖鱼类致病菌进行药物敏感性试验时，已经发现有些菌株对某些抗菌素失去了敏感性，或者感受性已经下降了，这就是因为病原菌对这些抗生素产生了抗药性。

病原菌对药物的感受性一般都是采用最小抑菌浓度（MIC）表示。即每升（L）培养基中的抗菌药物以毫克（mg）表示，作成倍比稀释系列，当接种在培养基中的病原菌被完全抑制的最低药物浓度，即为表示药物对致病菌菌株的最小抑菌浓度。

测定从患病养殖鱼类中分离病原菌对各种抗菌药物的敏感性，是保证药物治疗效果的关键。但是，开展这个工作要求有一定的试验条件，而且要求操作者具备一定的专业知识和试验技能，因此，尚不具备这种试验条件的养殖单位和个人可以委托有条件的研究单位协助完成这项工作。

3 抗菌素的作用方式

在药物疗法中使用的各种抗菌药物都是能对细菌的细胞产生作用，而对养殖鱼类和人体的细胞不会产生危害的，这是因为药物具有选择性毒性的缘故。在选择抗菌素类药物作为养殖鱼类疾病的药物时，首先要了解这种药物的作用原理。除了要明确该药物的作用原理外，还应该弄清楚药物对病原菌究竟是抑菌作用还是杀菌作用，这些问题对于确定药物的投予量和投予方法都是非常重要的。

药物对病原菌的抑菌和杀菌作用的机制有所不同。使用具有抑菌作用的药物后，病原菌的数量不会减少，药物在养殖鱼类体内以有效的药物浓度并保持一定的时间，因为药物只能抑制病原菌的增殖，最终还要依靠机体的免疫防御机能的作用使疾病痊愈。而具有杀菌作用的药物则是通过直接杀死养殖鱼类体内的致病菌而产生治疗效果的，当然，最后清除死亡的致病菌也是需要免疫系统参与的。

由于抑菌和杀菌药物的作用机制不同，使用具有抑菌作用的药物就必须要使药物的有效浓度在养殖鱼类体内维持一定的时间，需要准确计算初次用药量和再次使用的维持量。使用杀菌作用的药物，则不需要考虑药物在养殖鱼类体内维持一定时间的杀菌浓度。

在抗菌类药物中，通常将磺胺类和抗生素类药物定为具有抑菌作用的药物，而将呋喃类药物定为具有杀菌作用的药物。不过，当大剂量的使用抑菌性药物时，其药物也会显示出杀菌效果。所以，药物的抑菌和杀菌作用只是使用剂量的差异，而不存在本质的不同。

（未完待续）