曲妥珠单抗联合TC方案治疗HER—2过度表达乳腺癌的效果及安全性

王晓梅　王松芝　欧江华

[摘要] 目的 探讨曲妥珠单抗联合多西他赛、环磷酰胺化疗方案（TC）治疗人类表皮生长因子受体2（HER-2）过度表达乳腺癌的效果和安全性。 方法 选取2015年10月～2016年10月于新疆医科大学附属肿瘤医院就诊的79例乳腺癌患者作为研究对象，采用随机数字表法分为研究组与对照组，其中研究组38例，对照组41例。对照组患者在乳腺癌根治术前采用TC联合化疗，研究组在对照组基础上采用曲妥珠单抗治疗。治疗18周后，比较两组患者的治疗效果、不良反應发生率，比较两组治疗前后HER-2蛋白、B7同源体（B7-H1）及白细胞介素-2（IL-2）表达情况。 结果 治疗后研究组的总有效率显著高于对照组（P < 0.05）；治疗后两组HER-2过表达率均显著降低（P < 0.05），且研究组治疗后HER-2过表达率显著低于对照组（P < 0.05）；研究组治疗后B7-H1、IL-2阳性表达率均较治疗前显著降低（P < 0.05）；两组患者治疗后不良反应发生率差异无统计学意义（P > 0.05）。 结论 曲妥珠单抗联合TC方案可有效降低HER-2过度表达乳腺癌患者的HER-2蛋白、B7-H1和IL-2表达含量，提高临床治疗效果，且不会增加用药风险。

[关键词] 曲妥珠单抗；HER-2过度表达；乳腺癌

[中图分类号] R734 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2018）04（b）-0104-04

[Abstract] Objective To investigate the efficacy and safety of Trastuzumab combined with Docetaxel and Cyclophosphamide chemotherapy in the treatment of HER-2 overexpression breast cancer. Methods From October 2015 to October 2016， 79 cases of breast cancer patients in Cancer Hospital Affiliated to Xinjiang Medical University were selected. The patients were divided into the study group （38 cases） and the control group （41 cases） according to the random number table method. The control group was treated with TC combined chemotherapy before radical mastectomy. The study group was treated with Trastuzumab on the basis of control group. After 18 weeks of treatment， the curative effect and adverse reaction rate of the two groups were compared. The results of HER-2 protein， B7-H1 and IL-2 expression before and after treatment were compared. Results After treatment， the total effective rate （RR） of the study group was significantly higher than that of the control group （P < 0.05）. After treatment， HER-2 overexpression rates of the two groups were significantly reduced than before treatment （P < 0.05）， and the overexpression rate of the study group was significantly lower than that of the control group （P < 0.05）. The positive expression rates of B7-H1 and IL-2 in the study group after treatment were significantly lower than those before treatment （P < 0.05）. Adverse reactions occurred in both groups after treatment had no significant difference （P > 0.05）. Conclusion Trastuzumab combined with TC regimen in the treatment of patients with HER-2 overexpression breast cancer can effectively reduce the expression of HER-2 protein， B7-H1 and IL-2， improve the clinical curative effect， which can not increase the risk of medication.

[Key words] Trastuzumab； HER-2 overexpression； Breast cancer

在我国乳腺癌的发病率在近十几年总体呈现上升趋势，流行病学数据显示，全国城市地区女性乳腺癌每年新发病例约为15.8万，位居城市女性发病癌症之首[1]。因此，如何有针对性的治疗乳腺癌是临床工作中亟待解决的重要课题。有文献报道，20%～25%的乳腺癌患者呈表皮生长因子受体-2（human epidermal growth factor receptor 2，HER-2）的过度高表达状态，HER-2的表达与肿瘤的强侵袭性、高复发率和高死亡率有关[2]。多西他赛和环磷酰胺（Docetaxel and Cyclophosphamide，TC）联合化疗是以紫杉类为基础的化疗治疗方案，属于新辅助化疗的给药方案[4-5]，联合化疗方案多用于术前控制乳腺癌的发生发展，但对HER-2阳性的乳腺癌患者因耐药对化疗药物不敏感，导致治疗效果不理想。曲妥珠单克隆抗体是以HER-2为靶向目标来抑制肿瘤细胞增殖并诱导肿瘤细胞死亡的生物制剂[3]，其用于转移性乳腺癌的治疗和术后的辅助治疗，与TC化疗方案联合应用理论上可以提高HER-2过度表达乳腺癌患者的治疗效果。本文旨在探讨曲妥珠单抗联合TC辅助化疗方案对HER-2过度表达型乳腺癌患者病灶组织中相关指标的表达结果，评估该治疗方案对HER-2过度表达型乳腺癌的临床治疗效果。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年10月～2016年10月于新疆医科大学附属肿瘤医院（以下简称“我院”）就诊的79例乳腺癌患者作为研究对象。纳入标准：①符合中国抗癌协会《乳腺癌诊治指南与规范（2013版）》[6]中对乳腺癌的相关诊断标准；②经病理与免疫组化联合荧光原位杂交技术检测确诊结果为HER-2过度表达的乳腺癌患者；③患者知情同意并签署知情同意书。排除标准：①入组前有放化疗治疗史；②合并乳腺组织慢性炎症、其他脏器病变、自身免疫性疾病、原发性恶性肿瘤和凝血功能障碍；③合并有精神疾病。采用随机数字表法将患者分为研究组与对照组，其中，研究组38例，对照组41例。研究组患者平均年龄（40.5±4.7）岁；平均肿瘤大小（4.8±1.2）cm；浸润性导管癌16例，浸润性小叶癌13例，黏液腺癌8例，髓样癌1例；TNM分型为Ⅰ级5例，Ⅱ级25例，Ⅲ级8例；对照组患者年龄（43.2±3.6）岁；肿瘤大小（4.4±2.5）cm；浸润性导管癌14例，浸润性小叶癌15例，黏液腺癌9例，髓样癌3例；TNM分型为Ⅰ级4例，Ⅱ级26例，Ⅲ级11例。两组患者的年龄、肿瘤大小、肿瘤类型、TNM分型比较，差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。本研究经我院伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法 两组患者采取相同的术式且由同一手术组医师操作。两组患者均采用PICC管行深静脉管化疗。对照组采用TC联合化疗方案：每日使用75 mg/m2多西他赛（江苏恒瑞医药股份有限公司，生产批号：HZ0150609、HZ20151002）联合500 mg/m2环磷酰胺（江苏盛迪医药有限公司，生产批号：035460、035670），每3周为1个治疗周期，持续治疗6个周期。研究组患者在对照组TC联合治疗方案基础上再加用曲妥珠单抗（美国罗氏制药有限公司，生产批号：S20150104、S20151124）静脉滴注，第1周治疗剂量为4 mg/kg，第2～18周剂量为2 mg/kg，每周给予1次，持续治疗18周。待两组患者化疗结束后2周，行乳腺癌改良根治术。

1.2.2 HER-2蛋白、B7-H1及IL-2检测方法 治疗前组织样本通过穿刺肿瘤部位获取，治疗后组织样本通过手术切除组织获取，两次组织取样部位保持一致。经临床取得的乳腺癌组织样本采用10%中性甲醛固定，经常规脱水后制成石蜡切片，放置于-80℃保存备用待测。免疫组化方法：取组织石蜡切片，采用二甲苯-100%酒精-100%酒精-90%酒精-80%酒精-70%酒精順序进行脱蜡，用水、PBS缓冲液洗3次，每次5 min，加入3%过氧化氢溶液于37℃孵育10 min，再加入PBS缓冲液冲洗3次，每次5 min，加入pH 9.0的EDTA于100℃反应7 min，PBS冲洗后，加入一抗，4℃过夜孵育，第2天加入二抗，37℃孵育30 min，加入试剂盒中的SP试剂37℃孵育30 min，按照试剂盒方法进行冲洗、染色，最后脱水、透明、封片，进行镜检。每例标本镜下随机观察10个视野（400×），每个视野计数100个细胞，记录细胞着色强度评分×细胞百分比评分。

1.3 观察指标与评价标准

1.3.1 疗效评价 采用中国抗癌协会《乳腺癌诊治指南与规范（2013版）》的相关标准进行评估。①完全缓解（CR）：影像学复查显示病灶完全消失；②部分缓解（PR）：影像学复查显示病灶体积缩小50%以上；③疾病稳定（SD）：影像学复查显示病灶体积缩小0～50%或增加0～25%；④疾病进展（PD）：像学复查显示病灶体积增加25%以上或出现新病灶。总有效（RR）=CR+PR。

1.3.2 HER-2蛋白表达评估[7] 无着色或细胞膜着色的肿瘤细胞计数≤10%记为（-）；微弱、不完整细胞膜着色的肿瘤细胞计数>10%记为（+）；弱至中度完整细胞膜着色的肿瘤细胞计数>10%记为（++）；清晰完整细胞膜着色的肿瘤细胞计数>10%记为（+++）。HER-2蛋白非过度表达记为（-）或（+），HER-2蛋白的过度表达记为（+++）；检测记为（++）的患者需要再次进行FISH检测，检查结果以（+）为HER-2蛋白过度表达，其他则为非过度表达。

1.3.3 B7-H1和IL-2蛋白表达评估[8] B7-H1和IL-2的阳性物质均为棕黄色颗粒物且细胞膜及细胞质着色。细胞着色强度评分×细胞百分比评分结果≥3分记为阳性表达。其中，细胞着色包括无色、淡黄色、棕黄色和棕黄色，分别记为0、1、2、3分。细胞百分比评分：0分为无阳性细胞，1分为阳性细胞计数 ≤10%，2分为阳性细胞计数11%～50%，3分为阳性细胞计数51%～75%，4分为阳性细胞计数>75%。

1.3.4 安全性评价 记录治疗后两组患者肝损害、胃肠道反应、白细胞计数和心脏毒性发生例数，计算不良反应发生率。

1.4 统计学方法

采用SPSS 21.0统计学软件进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者疗效比较

治疗后，研究组RR为76.3%，显著高于对照组的53.7%，差异有统计学意义（P < 0.05）。见表1。

2.2 两组患者治疗前后病灶组织HER-2、B7-H1与IL-2表达比较

治疗后，两组HER-2过表达率均显著降低（P < 0.05），其中研究组治疗后过表达率显著低于对照组（P < 0.05）。研究组治疗后B7-H1、IL-2阳性表达率均较治疗前显著降低（P < 0.05），且均低于对照组治疗后（P < 0.05）。见表2。

2.3 两组患者不良反应发生情况比较

两组患者治疗后不良反应发生率差异无统计学意义（P > 0.05）。见表3。

3 讨论

乳腺癌是在女性群体中高发的一种恶性肿瘤，目前在临床研究报道中没有明确乳腺癌的发病机制，通过对乳腺癌的流行病学调查可以发现其在25～55岁的女性人群中具有较高发病率[9-11]。目前认为乳腺癌并不是仅仅局限在乳房的的局部病变，仅用手术手段来切除乳腺癌病灶远远不能控制其复发和转移。随着新辅助治疗开始在临床中得到普及，大量临床应用研究认为，在乳腺癌术前应用化疗方案对患者早期的微小转移灶进行一定程度的控制，从而延长患者的生存时间，术前的化疗应用对于控制乳腺癌的局部复发和远处转移具有重要的临床意义[12-13]。术前化疗是采用全身化疗加乳腺癌改良根治术的方式提升抗癌效果。治疗乳腺癌的常用化疗药物为蒽环类和紫杉醇类，这种药物可以很好地控制术前乳腺癌的进展。由于HER-2阳性的乳腺癌患者因耐药对化疗药物不敏感，导致术前仅应用蒽环类和紫杉醇类进行化疗疗效不理想[14-15]。曲妥珠单抗是一种作用于HER-2受体的靶向治疗HER-2阳性乳腺癌的单克隆抗体[16-17]，具有治疗特异性，因此在理论上，化疗治疗联合曲妥珠单抗用于乳腺癌根治术前治疗，可以提高HER-2阳性乳腺患者的治疗效果，缩短术后恢复时间，提高乳腺癌的治疗预后。

通过本研究可见，治疗后研究组RR为76.3%，显著高于对照组的53.7%（P < 0.05）；治疗后两组HER-2过表达率均显著降低（P < 0.05），其中，研究组治疗后HER-2过表达率显著低于对照组（P < 0.05）。HER-2是分子量为185 kD的跨膜糖蛋白，在人体乳腺、肠道、胃部和心脏等器官均有表达，其异常激活常会导致肿瘤的生长、复发和转移。曲妥珠单抗是用于各期HER-2过表达乳腺癌治疗的靶向治疗药物，其机制主要是阻碍HER-2受体二聚体的形成。张纲领等[18]研究采用紫杉醇联合卡铂新辅助化疗加用曲妥珠单抗对HER-2阳性乳腺癌患者进行治疗，结果认为4个疗程的紫杉醇联合卡铂单周化疗方案加曲妥珠单抗对HER-2阳性乳腺癌患者治疗具有较好效果及耐受性。本研究中在TC方案基础上加用HER-2靶向治疗的曲妥珠单抗取得了较好疗效。

进一步考察TC方案联合曲妥珠单抗治疗的安全性。结果显示，研究组治疗后B7-H1、IL-2阳性表达率均较治疗前显著降低（P < 0.05）。刘鸿飞等[19]研究认为，免疫共刺激分子B7-H1的表达与乳腺癌细胞化疗敏感性相关，上调B7-H1表达可减弱乳腺癌细胞对化疗药物表柔比星和多西他赛的敏感性。邹小盼等[20]研究发现，B7-H1在乳腺癌组织中的阳性表达率明显高于乳腺良性病变，而IL-2在乳腺癌组织中的阳性表达率明显低于乳腺良性病变；在44例乳腺癌患者中，肿瘤直径>2 cm、组织学分级较高、有淋巴结转移、HER-2阳性以及TNM分期ⅢA～Ⅳ期者，其B7-H1的表达较高，认为B7-H1、IL-2与乳腺癌病情的严重程度相关，两者存在联合参考价值。本研究显示，两组患者治疗后肝损害、胃肠道反应、白细胞计数和心脏毒性的不良反应发生率差异无统计学意义（P > 0.05），说明在提高治疗效果的同时，并不增加TC化疗方案的不良反应发生率，其是一种合理、安全的术前治疗方案。

综上所述，曲妥珠单抗联合TC方案治疗HER-2过度表达乳腺癌患者可有效降低HER-2蛋白、B7-H1和IL-2的表达含量，提高HER-2过度表达乳腺癌的临床治疗效果，同时不会增加不良反应发生率，可以在临床治疗中推广应用。

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（收稿日期：2018-01-08 本文編辑：程 铭）