大理卫矛乙醇提取物的化学成分研究

张慧颖　付兴情　蔡义玲　李亶烨　张建英　左爱学

中图分类号 R284.1；R284.2 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2018）02-0176-04

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.02.08

摘 要 目的：研究大理卫矛的化学成分。方法：采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、薄层色谱、半制备高效液相色谱对大理卫矛乙醇提取物进行分离纯化，根据理化性质和波谱数据（质谱、氢谱和碳谱）分析鉴定化合物结构。结果：从大理卫矛乙醇提取物中分离得到10个化合物，分别鉴定为蒲公英赛醇（1）、槐二醇（2）、蒲公英萜酮（3）、Sorghumol（4）、十七烷酸（5）、十八烷酸（6）、β-谷甾醇（7）、胡萝卜苷（8）、表木栓醇（9）、木栓酮（10）。结论：上述10个化合物均为首次从大理卫矛中分离得到，化合物1、2、4、5、6为首次从卫矛属植物中分离得到。该研究为大理卫矛的质量评价奠定了一定基础。

关键词 大理卫矛；化学成分；蒲公英赛醇；槐二醇；蒲公英萜酮；Sorghumol ；十七烷酸；十八烷酸；β-谷甾醇；胡萝卜苷；表木栓醇；木栓酮

ABSTRACT OBJECTIVE： To study the chemical constituents of Euonymus amygdalifolius. METHODS： Silica gel column chromatogram， gel column chromatogram， TLC and semi-preparative HPLC were adopted to isolate and purify ethanol extract from E. amygdalifolius. The structure of compounds was analyzed and identified according to physical and chemical properties， spectral data （mass spectrum， hydrogen spectrum and carbon spectrum）. RESULTS： Ten compounds were isolated from ethanol extract of aerial part of E. amygdalifolius， i.e. taraxerol （1）， sophoradiol （2）， taraxerone （3）， sorghumol （4）， heptaecanoic acid （5）， octadecenoic acid （6）， β-Sitosterol （7）， daucosterol （8）， epifriedelinol （9） and friedelin （10）. CONCLUSIONS： Above compounds are all isolated from E. amygdalifolius for the first time； compounds 1， 2， 4， 5， 6 are isolated and obtained from Euonymus A. for the first time. The study lay a foundation for quality evaluation of E. amygdalifolius.

KEYWORDS Euonymus amygdalifolius； Chemical constituents； Taraxerol； Sophoradiol； Taraxerone； Sorghumol； Heptaecanoic acid； Octadecenoic acid； β-Sitosterol； Daucosterol； Epifriedelinol； Friedelin

衛矛植物约有60属、850种，其品种繁多、资源丰富，是中药研发的重要种源，主要分布于热带、亚热带地区，我国是其主产区，覆盖了111种、10个变种、4个变型[1]。大理卫矛（Euonymus amygdalifolius）作为卫矛属植物，多产于云南、西藏（定结）等高海拔地区，在《西藏植物志》和《中国植物志》中均有收载，但至今未见其化学成分及生物活性的研究报道。为了阐明大理卫矛的物质基础，以为其质量评价奠定一定基础，本课题组从大理卫矛乙醇提取物中分离了10个化合物，并对其进行了结构鉴定。

1 材料

1.1 仪器

Autospec-3000型质谱（MS）仪（英国Micromass公司）； AM-400型、DRX-500型核磁共振（NMR）波谱仪（瑞士Bruker公司）；Hei-VAP Value Digital G3 R型旋转蒸发仪（上海豫康科教仪器设备有限公司）。

1.2 试剂

Sephadex LH-20凝胶柱色谱（瑞典 Pharmacia公司）；LC3000半制备高效液相色谱（北京创新通恒科技有限公司）；YMC-Pack ODS-A硅胶柱色谱（日本YMC公司）；硅胶（200～300目）、硅藻土（青岛海洋化工厂）；薄层色谱（TLC）硅胶板（烟台大学生物科学与工程研究所）；乙醇为色谱纯，其余试剂均为工业纯或化学纯，水为纯化水。

1.3 药材

大理卫矛样品采于云南鹤庆地区，经云南中医学院中药鉴定教研室杨竹雅副教授鉴定为真品。

2 提取与分离

取干燥大理卫矛样品10 kg，粉碎，以95%乙醇溶液浸提2次，每次浸泡7 d。抽滤、减压浓缩、回收溶剂，得黑色浸膏468.3 g。浸膏用丙酮溶解，硅藻土拌样，经硅胶柱色谱，以石油醚-丙酮（60 ∶ 1、30 ∶ 1、20 ∶ 1、15 ∶ 1、12 ∶ 1、9 ∶ 1、8 ∶ 2、7.5 ∶ 2.5、5 ∶ 5，V/V）梯度洗脱，经TLC分离、鉴别，得8个流分（D1～D8）。

流分D1（38.3 g）经硅胶柱色谱，以石油醚-乙酸乙酯（30 ∶ 1、20 ∶ 1、10 ∶ 1、4 ∶ 1，V/V）梯度洗脱，得D1A～D1D。其中，D1C经凝胶柱色谱[三氯甲烷-甲醇（1 ∶ 1，V/V）]分离纯化，重结晶，得化合物3（21.3 mg）。D1B经半制备高效液相色谱，以甲醇-水（9 ∶ 1，V/V）等度洗脱，得化合物5（138.3 mg）、化合物6（48.3 mg）。D1D经硅胶柱色谱层析，以石油醚-丙酮（25 ∶ 1，V/V）等度洗脱，收集洗脱液，经TCL分离、鉴别，合并相同部分，重结晶，得化合物4（11.3 mg）；母液继续经凝胶柱色谱[三氯甲烷-甲醇（1 ∶ 1，V/V）]分离纯化，得化合物9（14.0 mg）。

流分D2（28.5 g）经硅胶柱色谱，以石油醚-二氯甲烷-丙酮（4 ∶ 1 ∶ 0.1，V/V/V）等度洗脱，收集洗脱液，经TLC分离、鉴别，合并相同部分，得D2A～D2C。其中，D2A经硅胶柱色谱层析，以石油醚-丙酮（20 ∶ 1、15 ∶ 1、10 ∶ 1，V/V）梯度洗脱，收集洗脱液，重结晶，得化合物1（25.4 mg）。D2B经凝胶柱色谱[三氯甲烷-甲醇（1 ∶ 1，V/V）] 分离纯化，重结晶，得化合物7（234.2 mg）。D2C经硅胶柱色谱，以石油醚-丙酮（15 ∶ 1、10 ∶ 1，V/V）梯度洗脱，收集洗脱液，经凝胶柱色谱[三氯甲烷-甲醇（1 ∶ 1，V/V）] 分离纯化，重结晶，得化合物2（10.2 mg）。

流分D5（21.3 g）以丙酮溶解，硅胶拌样，经硅胶柱色谱层析，以石油醚-乙酸乙酯（10 ∶ 1、8 ∶ 2、7.5 ∶ 2.5、1 ∶ 1，V/V）梯度洗脱，收集洗脱液，经TLC分离、鉴别，合并相同部分，重结晶，得化合物8（16.5 mg）、化合物10（12.0 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：白色粉末；熔点（mp）：271～273 ℃。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：3.40（1H，m，H-3），0.97（3H，s，H-23），0.80（3H，s，H-24），0.92（3H，s，H-25），1.09（3H，s，H-26），0.91（3H，s，H-27），0.82（3H，s，H-28），0.95（3H，s，H-29），0.90（3H，s，H-30）。13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ：37.5（C-1），27.7（C-2），78.0（C-3），40.8（C-4），55.2（C-5），18.4（C-6），35.2（C-7），38.5（C-8），48.3（C-9），37.5（C-10），17.0（C-11），36.1（C-12），37.2（C-13），157.6（C-14），116.3（C-15），37.1（C-16），37.5（C-17），48.8（C-18），40.9（C-19），27.8（C-20），33.2（C-21），32.6（C-22），27.8（C-23），15.4（C-24），15.4（C-25），29.3（C-26），25.4（C-27），28.2（C-28），32.8（C-29），20.8（C-30）。与文献[2-3]对照，其波譜数据基本一致，可确定该化合物为蒲公英赛醇（Taraxerol）。

化合物2：白色粉末；mp：219～220 ℃。1H-NMR（400 MHz，C5D5N）δ：3.44（1H，m，H-3），5.20（1H，brs，H-12），3.84（1H，m，H-22），0.89（3H，s，H-23），0.77（3H，s，H-24），0.97（3H，s，H-25），1.02（3H，s，H-26），1.09（3H，s，H-27），0.85（3H，s，H-28），0.95（3H，s，H-29），0.92（3H，s，H-30）。13C-NMR （100 MHz，CDCl3）δ：39.2（C-1），27.9（C-2），77.9（C-3），39.2（C-4），55.5（C-5），18.6（C-6），33.4（C-7），40.0（C-8），47.9（C-9），37.0（C-10），23.7（C-11），122.3（C-12），144.4（C-13），42.3（C-14），26.2（C-15），28.5（C-16），38.7（C-17），43.7（C-18），46.5（C-19），31.4（C-20），42.3（C-21），74.9（C-22），27.9（C-23），15.6（C-24），16.8（C-25），16.9（C-26），26.0（C-27），19.5（C-28），33.5（C-29），28.5（C-30）。与文献[4]对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为槐二醇（Sophoradiol）。

化合物3：白色粉末；mp：239～240 ℃。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：5.57（1H，dd，J=4.0，8.0 Hz，H-15），1.06（3H，s，H-23），1.01（3H，s，H-24），1.11（3H，s，H-25），1.16（3H，s，H-26），0.91（3H，s，H-27），0.83（3H，s，H-28），0.95（3H，s，H-29），0.92（3H，s，H-30）。13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ： 38.3（C-1），34.1（C-2），217.5（C-3），47.6（C-4），55.8（C-5），20.0（C-6），34.1（C-7），38.4（C-8），48.7（C-9），36.7（C-10），17.4（C-11），35.1（C-12），37.7（C-13），157.6（C-14），117.2（C-15），36.7（C-16），37.7（C-17），48.8（C-18），40.6（C-19），29.8（C-20），33.6（C-21），33.4（C-22），26.1（C-23），21.5（C-24），14.8（C-25），29.9（C-26），25.6（C-27），29.9（C-28），33.6（C-29），21.4（C-30）。与文献[5]对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为蒲公英萜酮（Taraxerone）。

化合物4：白色粉末；mp：276～278 ℃。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：3.22（1H，dd，J=4.0，11.5 Hz，H-3），5.23（1H，d，J=6.5 Hz，H-11），1.66（2H，d，J=6.5 Hz，H-12），0.98（3H，s，H-23），0.82（3H，s，H-24），1.03（3H，s，H-25），0.81（3H，s，H-26），0.77（3H，s，H-27），0.76（3H，s，H-28），0.83（3H，d，J=6.5 Hz，H-29），0.89（3H，d，J=6.5 Hz，H-30）。13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ：36.0（C-1），27.8（C-2），79.8（C-3），39.0（C-4），52.3（C-5），21.4（C-6），26.6（C-7），40.9（C-8），148.8（C-9），39.6（C-10），114.3（C-11），35.9（C-12），38.1（C-13），36.7（C-14），29.6（C-15），36.0（C-16），42.8（C-17），52.0（C-18），20.1（C-19），28.2（C-20），59.6（C-21），30.7（C-22），26.7（C-23），15.5（C-24），22.1（C-25），17.0（C-26），15.2（C-27），13.9（C-28），23.0（C-29），21.4（C-30）。與文献[6]对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为Sorghumol。

化合物5：白色粉末。电喷雾电离（ESI）-MS：m/z 293 [M+Na]+；1H-NMR（400 MHz，C5D5N）δ： 2.36（2H，t，J=7.5 Hz，H-2），1.65（2H，m，H-3），1.27（26H，brs，H-4～H-16），0.90（3H，t，J=7.0 Hz，H-17）。13C-NMR（100 MHz，C5D5N）δ：175.7（C-1），34.0（C-2），24.6（C-3），29.0～29.7（C-4～C-14），31.9（C-15），22.7（C-16），14.1（C-17）。 与文献[7]对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为十七烷酸（Heptaecanoic acid）。

化合物 6：白色蜡状固体；mp：62～63 ℃。1H-NMR（400 MHz，C5D5N）δ：2.34（2H，t，J=8.0 Hz，H-2），1.63（2H，m，H-3），1.26（28H，s，H-4～H-17），0.95（3H，t，J=7.0 Hz，H-18）。13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ： 180.1（C-l），34.1（C-2），31.9（C-3），28.0～31.0（C-4～C-15），24.7（C-16），22.7（C-17），14.4（C-18）。与文献[8]对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为十八烷酸（Octadecenoic acid）。

化合物 7：白色鳞片状晶体；mp：135～136 ℃。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：3.55（1H，m，H-3），0.71（3H，s，H-18），1.03（3H，s，H-19），0.94（3H，d，J=6.0 Hz，H-21），0.86（3H，d，J=7.6 Hz，H-26），0.84（3H，d，J=7.2 Hz，H-27），0.87（3H，t，J=7.6 Hz，H-29）。13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ： 37.8（C-1），32.3（C-2），71.3（C-3），43.4（C-4），142.1（C-5），121.2（C-6），32.6（C-7），32.3（C-8），50.5（C-9），36.9（C-10），21.3（C-11），40.0（C-12），42.5（C-13），56.8（C-14），24.5（C-15），28.6（C-16），56.3（C-17），12.2（C-18），20.0（C-19），36.4（C-20），19.7（C-21），34.2（C-22），26.4（C-23），46.0（C-24），29.4（C-25），18.9（C-26），19.2（C-27），23.3（C-28），12.2（C-29）。与文献[9]对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为β-谷甾醇（β-Sitosterol）。

化合物8：淡黄色无定形粉末；mp：283～285 ℃。1H-NMR（400 MHz，C5D5N）δ：3.96（1H，m，H-3），5.38（1H，t，J=3.2 Hz，H-6），0.64（3H，s，H-18），0.92（3H，s，H-19），0.97（3H，d，J=6.4 Hz，H-21），0.86 （3H，d，J=7.2 Hz，H-26），0.84 （3H，d，J=7.0 Hz，H-27），0.87（3H，t，J=7.6 Hz，H-29），5.09（1H，d，J=7.6 Hz，H-1′），4.35（1H，dd，J=12.0，2.0 Hz，H-6′ a），4.55（1H，dd，J=11.6，5.2 Hz，H-6′ b）。13C-NMR（100 MHz，C5D5N）δ：37.7（C-1），30.8（C-2），79.5（C-3），38.8（C-4），142.4（C-5），123.2（C-6），33.4（C-7），31.6（C-8），51.7（C-9），37.7（C-10），21.3（C-11），40.7（C-12），43.8（C-13），58.2（C-14），24.7（C-15），27.8（C-16），57.6（C-17），13.3（C-18），20.5（C-19），35.5（C-20），20.3（C-21），33.4（C-22），25.8（C-23），47.3（C-24），30.8（C-25），20.7（C-26），20.7（C-27），22.6（C-28），13.5（C-29），103.9（C-1′），76.6（C-2′），79.7（C-3′），73.1（C-4′ ），79.7（C-5′ ），64.2（C-6′ ）。与文献[9]对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为胡萝卜苷（Daucosterol）。

化合物9：白色针状结晶；mp：279～280 ℃。1H-NMR （400 MHz，CDCl3）δ：0.82（3H，d，J=6.6 Hz，H-23），0.98（3H，s，H-24），0.93（1H，s，H-25），0.99（3H，s，H-26），1.09（3H，s，H-27），1.18（3H，s，H-28），1.11（3H，s，H-29），0.99（3H，s，H-30）。13C-NMR（100 MHz，CDCl3） δ：18.0（C-1），35.4（C-2），72.2（C-3），53.0（C-4），38.2（C-5），41.4（C-6），17.9（C-7），53.2（C-8），37.1（C-9），60.1（C-10），35.6（C-11），30.6（C-12），38.3（C-13），39.7（C-14），32.4（C-15），36.1（C-16），30.0（C-17），42.7（C-18），35.4（C-19），28.2（C-20），32.8（C-21），39.3（C-22），10.4（C-23），14.7（C-24），18.2（C-25），20.2 （C-26），18.7 （C-27），32.1 （C-28），31.9 （C-29），35.0 （C-30）。与文献[10]对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为表木栓醇（Epifriedelinol）。

化合物10：白色粉末；mp：259～260 ℃。1H-NMR （400 MHz，CDCl3）δ：0.87（3H，s，H-23），0.73（3H，s，H-24），0.89（3H，s，H-25），0.93（3H，s，H-26），1.05（3H，s，H-27），1.18（3H，s，H-28），1.01（3H，s，H-29），1.00（3H，s，H-30）。13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ：22.3（C-1），41.5（C-2），213.1（C-3），58.2（C-4），42.0（C-5），41.3（C-6），18.2（C-7），53.1（C-8），36.0（C-9），59.5（C-10），35.6（C-11），30.5（C-12），39.3（C-13），39.3（C-14），32.4（C-15），36.0（C-16），30.5（C-17），41.5（C-18），35.6（C-19），30.5（C-20），32.4（C-21），39.3（C-22），6.8（C-23），14.7（C-24），18.0（C-25），20.3（C-26），18.7（C-27），32.1（C-28），35.0（C-29），31.8（C-30）。與文献[11]对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为木栓酮（Friedelin）。

4 讨论

本试验从大理卫矛乙醇提取物中分离得到了化合物1～10，分别鉴定为蒲公英赛醇（Taraxerol）、槐二醇（Sophoradiol）、蒲公英萜酮（Taraxerone）、Sorghumol、十七烷酸（Heptaecanoic acid）、十八烷酸（Octadecenoic acid）、β-谷甾醇（β-Sitosterol）、胡萝卜苷（Daucosterol）、表木栓醇（Eepifriedelinol）、木栓酮（Friedelin）；其中化合物1、2、3、4、9、10为五环三萜类，化合物5、6为脂肪酸，化合物7、8为甾体。所有化合物均为首次从大理卫矛中分离得到，化合物1、2、4、5、6为首次从卫矛属植物中分离得到。本研究结果可为大理卫矛的质量建立及开发提供一定参考。

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（收稿日期：2017-06-17 修回日期：2017-07-18）

（编辑：张 静）