薄层色谱法测定调味品中苯甲酸的研究

詹永能

薄层色谱法（简称：TLC）是一种快速、简便的色谱分析方法。薄层色谱过程是混合终点将首先在薄的均匀的固定相涂层分离，然后端板浸入流动相，在湿片样品的流动相的过程中，随着流动相进行了不同成分的流动相不同的速度，在板的不同位置，向前移动，最终保留下来，从而达到使用不同成分的适当分离目的的方法进行检测，可以是定性的或定量的样本分析。由于它具有成本低、速度快、可在同一薄膜中测量多个样品的优点，因此本文采用聚酰胺聚酰胺膜代替国标法有效地测定了苯甲酸中的含量，具体如下：

试验部分

仪器与试剂

仪器：层析展缸（23cm ×23cm ×10 cm），聚酰胺薄膜（12 cm ×22 cm）

展开剂：异丙醇+氨水+无水乙醇（8+1+1）

氯化钠溶液： 30 g /L，加 HCl 10～15 滴。

氢氧化钠，无水硫酸钠，无水乙醚均为分析级

试剂配制根据国标方法。

试验方法

1.样品（标准样品）的预处理。（1）样品（如豆瓣酱）： 样品磨细后，称取10 g左右， 加入0. 1mol/ L氢氧化钠溶液稀释至15倍， 放置过夜， 过滤 ，吸取滤液25mL ，稀盐酸调节至溶液为中性。（2）含油脂试样（如方便面酱包）：称取样品10g，加0.08mol/L氢氧化钠溶液至100g，40℃水浴，并不时搅拌浸泡2h以上，取出，用乙醚多次萃取油脂，弃去乙醚层，再经40℃水浴挥去残留的乙醚，过滤，取滤液适量，用盐酸调pH至中性。

2.样品提取及纯化。经上述处理后的样液中加盐酸酸化至约1mol/L，用适量乙醚分3～4次萃取，每次剧烈振摇1min，合并萃取后的乙醚液，用40g/L氯化钠溶液洗涤两次，静置15min，醚层经无水硫酸钠过滤至容量瓶，定容，吸取适量乙醚提取液，在40℃水浴上小心揮干乙醚，残渣用适量无水乙醇溶解。

3.定性检出。取苯甲酸标准溶液、样品溶液和标准溶液分别2μl，点在2cm的基线在影片的下端。每一个点的时间间隔为1.5～2.0cm处在槽的内壁贴有流动相过滤，扩展槽为50 ～ 100ml膨胀剂，将扩展槽的倾斜位置，对好点位置，加盖，放置10min，从溶剂到达10cm左右，取出。在空气中摇摆或吹去剩下的展开剂。细水雾均匀地洒在薄膜表面，斑点呈黄色，背景为蓝色。将样品与标准样品进行比较。比较了待测样品中苯甲酸和苯甲酸标准溶液的斑点。

4.定量。测量样品和标准样品以1.2.3相同，根据粗略的定量结果，选择合适的加标量，加入标准样品的标准，根据1.2.3的方法，操作，在标准亮度相同的样品和标准样品点的比较，根据标准样品和计算量的含量，样品中苯甲酸含量的测定。

结果与讨论

酸化程度影响。酸化程度不够，苯甲酸转化为苯甲酸，测定值较低。如果酸化过多，会引起干扰。研究表明，酸化程度控制在1mol/ L。

样品中的干扰及排除。样品中组分常会对苯甲酸的展开产生干扰，使样品中苯甲酸和山梨酸的Rf值与标准溶液中的Rf值不一致。为此，常采用样品中加入标准溶液，如未加标的样品斑点与加标后的样品斑点Rf值一致，则为阳性。

方法的回收率试验。在10 g 辣椒酱样品中加入 200 mg /L苯甲酸标准溶液，经高效液相色谱测定 ，进行回收率测定。结果见表 1

方法检出限及准确性。聚酰胺薄膜在定量精度、检测灵敏度和分离度方面优于聚酰胺粉片。在聚酰胺膜，苯甲酸的检测限为0.8mg/ L。该方法对苯甲酸的定量分析是非常直观的。每次4～8人得出一致结论。与苯甲酸标准溶液相比，测定结果比较困难，标准样品加标法是有效的。当标准样品中苯甲酸含量高于待测样品时，样品中加入标准，可计算出相同的标准。酸的含量。该方法的样品提取和测定过程简单，测定结果直观，可比性强，测定误差较大。