不同炮制方法对白术药材指标成分含量及浸出物影响研究*

★ 徐春良 林苗苗 魏惠珍** 何浪 费俗青 柴艳承

(1.江西中医药大学附属医院 南昌 330006；2.江西江中中药饮片有限公司 江西 九江 332300；3. 江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心 南昌 330006)

白术是菊科Compositae植物白术AtractylodesmacrocephalaKoidz.干燥根茎。具有健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎等功效[1]。白术主要有效成分为挥发性成分和白术多糖[2-3]。挥发性成分中的白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ不但具有消炎、抗癌作用，还可以调节胃肠运动，达到健脾运脾的功效[4-6]，而白术的主要燥性成分是苍术酮，具有一定的刺激性，故选择白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、苍术酮为白术指标性成分。

白术的炮制方法有清炒白术、米泔水漂白术、麸炒白术、焦白术、土炒白术等[7-9]。传统认为白术药材炮制后可使药性缓和，疗效增强[10-12]。清炒白术具有缓和燥性，健脾益气的功能[13-14]。麸炒白术有和中益脾之功效，主要用于运化失常，食少胀满等病症[15-16]。米泔水漂白术可借助米泔水去燥性和中，增加补脾和胃的功效[17]。焦白术有温化燥湿，增强醒脾的功效，主要用于慢性寒性腹泻。土炒白术以补脾止泻为优，主要用于脾虚与泄泻。不同炮制方法影响白术药材指标成分含量，关于这方面研究多数集中于麸炒白术和土炒白术[18]。本文研究白术药材、米泔水漂白术、麸炒白术、焦白术、土炒白术指标成分含量及浸出物含量的变化，为指导炮制工艺改进及不同炮制品在临床的应用提供依据。

1 仪器与试药

Waters 2695-2996 高效液相色谱仪及工作站，美国Waters公司；依利特ODS(5μm,4.6mm×250mm)色谱柱，大连依利特分析仪器有限公司。AB104N型万分级电子精密天平，梅特勒-托利多仪器；KQ-250DB型数控超声波清洗器，昆山市超声仪有限公司。

白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ对照品均购自中国食品药品检定研究院，批号分别为111975-201501、111976-201501、111978-201501，苍术酮购自成都瑞芬思生物科技有限公司，批号为c-084-170306。

白术药材分别购自各个产地，经江西江中中药饮片有限公司谌瑞林副主任中药师鉴定为菊科植物白术AtractylodesmacrocephalaKoidz.的干燥根茎；白术炮制品为自制，均由对应产地同一批白术药材按法定标准方法炮制而来。

溶液制备用甲醇为分析纯；流动相用乙腈为色谱纯；所用水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液制备 精密称取白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、苍术酮对照品适量，分别加甲醇制成0.0104，0.0106，0.0107，0.5050 mg/mL的溶液，即得。

2.2 供试品溶液的制备 精密称取供试品粉末(过3号筛)1.0 g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20 mL，称定重量，超声处理(功率250 W，频率50 KHz)30 min ，取出，称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，即得。

2.3 色谱条件 色谱柱：依利特ODS色谱柱(4.6mm × 250mm,5μm)；流动相为乙腈(A)-水(B)，梯度洗脱0～10min，A 40%→48%；10～15min，A 48%→48%；15～28min，A 48%→55%；28～38min，A 55%→55%；38～45min，A 55%→70%；45～50min，A 70%→75%；50～70min，A 75%→85%；流速为1.0 mL/min；检测波长：白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ、苍术酮：220nm，白术内酯Ⅱ：276nm；柱温：30℃，进样量：10 μL，经方法学验证，该方法适合于白术四种成分含量测定。对照品及供试品色谱图见图1。

A，B对照品；C，D白术药材(批号：20151226)；1：白术内酯Ⅲ；

2.4 样品指标成分测定结果 分别取10 批白术药材、10批麸炒白术、10批米泔水漂白术、10批焦炒白术和10批土炒白术每个样品取2份，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，精密吸取10μL 进样测定，计算样品中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ和苍术酮含量，结果见表1-2。

由表1、表2可知，不同白术炮制品中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ含量变化明显。白术内酯Ⅰ含量变化趋势：米泔水漂白术>土炒>焦炒>白术药材=麸炒；白术内酯Ⅱ含量变化趋势：米泔水漂白术>焦炒=麸炒>土炒=白术药材；白术内酯Ⅲ含量变化趋势: 焦炒>米泔水漂白术>麸炒>土炒>白术药材；苍术酮含量变化趋势：焦炒=米泔水漂白术=麸炒=白术药材>土炒。

表1 不同白术炮制品四种成分含量测定结果 %

2.5 样品浸出物测定结果 参照《中国药典》2015版醇溶性浸出物测定法(热浸法)测定白术不同炮制品浸出物含量，结果见表3。

表2 不同白术炮制品四成分平均含量 %

表3 浸出物含量测定结果 %

由表3可知，浸出物含量：焦白术>白术药材>麸炒白术>土炒白术>米泔水漂白术。

3 讨论

试验过程中考察了超声提取、回流提取2种方法，指标成分含量基本无差异，综合考虑选取超声提取法。同时比较了提取时间、提取溶液体积，最终确定为1 g白术药材加20 mL 甲醇，超声提取30 min。

白术内酯类成分有抗癌、抗炎，促进胃肠运动等作用，浸出物是白术药材主要的药效物质基础，在一定程度上反映了白术临床疗效。不同炮制方法使白术药材中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ含量较白术药材都有上升趋势，苍术酮含量基本没有发生变化。米泔水漂白术中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ含量增加明显，苍术酮含量基本没有发生变化，但其浸出物含量明显降低，可能与白术多糖及其他易溶于水的成分在炮制过程中溶解有关。麸炒白术和焦炒白术中白术内酯Ⅲ含量明显增加，且焦炒白术中浸出物含量明显升高，这可能是焦炒白术健脾止泻功效显著增强的原因。该研究为白术不同炮制品在临床的应用提供了有利依据，但临床作用机理还需进一步研究。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典·一部[S].北京:中国医药科技出版社,2015:103.

[2]吴慧,赵文龙,单国顺,等.HPLC波长切换法同时测定白术及其不同麸制品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ[J].中成药,2013,35(11):2484-2487.

[3]阎克里,朱秀卿,赵丽.HPLC法同时测定白术挥发油中5种抗肿瘤成分含量[J].药物分析杂志,2011,31(6):1 106-1 110.

[4]向小庆,叶红.白术抗肿瘤作用的研究及应用进展[J].中国实验方剂学杂志,2013,19(8):367-370.

[5]李雯,尹华. 白术化学成分的药理作用研究进展[J].海峡药学,2012,24(3):9-11.

[6]彭腾,李鸿翔,邓赟,等.白术内酯类成分及其药理作用研究进展[J].中国药房,2012,23(39):3 732-3 734.

[7]段启,许冬谨,谢晨. HPLC法测定白术不同炮制品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ[J].中草药,2008,39(9):2 482-2 487.

[8]沈建涛,张振凌.白术炮制品中白术内酯Ⅰ、Ⅲ含量随放置时间变化的研究[J].时珍国医国药,2014,25(8):1 873-1 875.

[9]张金莲,谢日健,刘明贵,等.不同炮制方法对白术中白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ含量的影响[J].中国实验方剂学杂志,2016,22(21):15-18.

[10]朱国琼,高岚.白术古今炮制述要[J].基层中药杂志,1998,12(3):17.

[11]李钊,李维聪.浅析白术不同炮制的临床应用[J].四川中医,2015,33(2):189-191.

[12]费莹,王娜妮,李洪玉,等.炮制工艺对白术挥发油组成及3种白术内酯含量的影响研究[J].中华中医药学刊,2016,34(2):418-421.

[13]王文明,夏黎,段启,等. 清炒白术高效液相色谱指纹图谱研究[J].现代医药卫生,2013,29(17):2 582-2 583.

[14]段启,许冬谨,刘传祥,等. 白术的研究进展[J].中草药,2008,39(5):附4-附6.

[15]伏新顺. 白术炮制不同功有别[N].中国中医药报,2009-09-17(5).

[16]李庆.白术的不同炮制法对临床作用影响[J].中国医药指南,2013,11(19):302-303.

[17]张钰祺,龚千锋. 米泔水在中药炮制中的古今应用研究[J].江西中医药,2011,42(4):64-66.

[18]谌瑞林,何浪,费俗青,等. 白术不同炮制品白术内酯含量的比较研究[J].时珍国医国药,2016,27(12):2 911-2 914.