微柱凝胶法ABO血型正反定型不符与临床输血分析

白晶 吴蒙

1 辽化总医院 （辽宁 辽阳 111003）

2 牡丹江医学院 （黑龙江 牡丹江 157011）

随着微柱凝胶法（Micro-column Gel Method，MGT）在医院普及，ABO血型正反定型不符结果越来越多，在基层医院由于人员、设备、试剂等因素所限，会出现无法报告血型鉴定结果，导致需要输血患者转院。本文回顾性分析本院输血科ABO血型鉴定中出现正反定型不符结果，用文中试验方法解决了大部分问题，使患者得到及时输血，且输注有效，现报告如下。

1.资料与方法

1.1 临床资料

2013～2017年送检本院输血科2178例血型检测标本，患者年龄2～91岁，70岁以上840例。其中，消化道出血219例，尿毒症187例，肝硬化115例，多发性骨髓瘤（Multiple Myeloma，MM）52例，M2 23例，骨髓增生异常综合症（Myelodysplastic Syndrome，MDS）30例，其他白血病218例，其他癌566例。

Diamed-ID操作系统，DT5-3血库专用离心机，ABO血型正/反定型检测卡（Diaclon），低离子抗人球蛋白卡（Diaclon），人ABO血型反定型用红细胞试剂盒（上海血液生物医药有限责任公司）。

1.2 方法

排除人为因素造成正反定型不符；分析正反定型不符是否与患者病情、年龄有关，查询瑞美血库管理系统，检索患者历史血型信息；临床资料结合血清学反应格局初步判断产生正反定型不符原因，再做相应的试验；综合分析确认患者血型。

ABO血型正反定型采用Diamed-ID操作系统采用MGT法用厂家提供说明书进行。

表1. 血型抗体减弱

表2. 抗原减弱

1.2.1抗体减弱

试验1：在MGT法加大反定患者血浆标本量为正常3倍，其他步骤不变。试验2：采用试管法离心后显微镜镜检。试验3：采用试管法延长反应时间，加血浆和红细胞后置于4˚C环境中15～30min，离心后镜检。1.2.2抗原减弱或者ABO亚型

试验1：温盐水洗涤患者红细胞6～8次，重新进行MGT法检测。试验2：吸收放散实验、H血型物质检测。试验3：加做抗H、抗A1、抗AB、A2细胞、O细胞。

1.2.3异常蛋白干扰

试验：延长标本离心时间5～10min（3500r/min），同时在CTL孔加做自身对照（患者自身红细胞+血浆），O细胞对照（O细胞+患者血浆）重新进行MGT法检测。

1.2.4冷凝集素干扰

试验1：采用37˚C温生理盐水洗涤患者红细胞6～8次，直到显微镜下观察红细胞无凝集状态时再重做MGT法和试管法。试验2用O型洗涤红细胞在4˚C条件下吸收患者血清中高效价冷凝集素，待1～2h吸收完全后，再取血清做反定型。

表3. 异常蛋白干扰

表4. 疑为冷凝集素干扰

2.结果

2178例ABO血型鉴定中有12例患者出现正反定型不符70次，分别被鉴定为抗体减弱（57次）、抗原减弱（7次）、异常蛋白干扰（3次）、冷凝集素干扰（2次）、疑为亚型（1次）。典型患者血清学反应格局如下，见表1～4。

患者12，58岁，腹痛腹胀入院，MGT法ABO血型正定抗A阴性，抗B阴性，CTL阴性，A细胞阴性，B细胞4+，O细胞阴性，正定O型，反定A型，正反定型不符，吸收放散试验红细胞有A抗原，综合考虑为亚型，无其他试剂，未确认，未发报告单。

3.讨论

ABO血型正反定型不符原因分人为因素和客观因素，人为因素包括操作中加错标本或试剂、细胞与血清比例不当、结果判读错误等。客观因素包括因某种疾病（包括白血病）导致抗原性减弱，红细胞发生多凝集现象及产生类B物质；抗体效价低，如婴幼儿、老年人、低丙种蛋白血症等；存在不规则抗体；某些药物干扰；试剂不标准、试剂失效或污染等[1]。本次分析引起患者ABO血型正反定型不符原因按样本比例从大到小为抗体减弱＞抗原减弱＞异常蛋白干扰＞冷凝集素＞ABO亚型。

MM和老年人常会出现抗体效价减低，干扰ABO血型反定型。患者3，男性，MM，2013年血型为A型，输红细胞3.5U。2016年出现26次抗体减弱，输红细胞42U。2017年3次反定多出来抗体，输红细胞6U。之后2次血型正常，输红细胞4U。输血治疗均有效。多发性骨髓瘤由于正常免疫球蛋白减少或异常免疫球蛋白（M蛋白）增多常会干扰MGT法ABO血型鉴定，同一患者在疾病期即可出现抗体减弱，也可出现多出来的抗体，干扰反定型结果。有专家建议MM患者出现正反定型不符结果时，可以以正定型结果为准。

白血病患者会发生抗原减弱。患者9，2014年正定双群，发A型红细胞2U，输注有效。转院到盛京医院诊断M2。之后13次血型正常。输红细胞20U，机采血小板20治疗量，输注有效。目前认为报道较多的是白血病引起抗原的减弱或消失，对于疾病患者，抗原减弱在疾病期出现，一旦病情缓

解，血型表型会恢复正常[2,3]。有专家建议急性髓细胞白血病、M2、MDS患者常会干扰正定型结果，以反定型结果为准。

高效价冷凝集素是患者体内产生了抗自身红细胞的嗜异性冷抗体，在体外4˚C或室温条件下可与自身红细胞或ABO系统其他各个血型的红细胞发生特异性凝集反应。对此可采用温盐水洗涤，直至显微镜下观察红细胞无凝集状态时再做正定型[4]。本研究中患者11，2013年之前已确诊特发性血小板减少性紫癜，输血小板及红细胞共8次，2013年ABO血型正反定型不符，考虑患者冷凝集素干扰血型正定型，造成结果假阳性。

亚型也是造成ABO血型正反定型结果不符的一个重要因素。当非新生儿、未患使抗原抗体减弱的疾病、非老年人出现正定凝集强度弱于4+，应考虑亚型。

由于引起ABO血型正反定型不符的原因复杂，在基层医院应努力提高解决ABO正反定型不符能力，为患者及时有效的进行输血治疗提供有力的保障。

[1] 陈小伍,于新发,田兆嵩.输血治疗学[M].科学出版社,2012:37.

[2] 胡荣华,王淑芬,马丽荣,等.白血病引起ABO血型抗原暂时减弱1例[J].中国输血杂志,1989,2(2):83-84.

[3] 杨珊.健康献血者及疾病患者ABO正反定型不符比较研究[J].临床输血杂志,2009,22(5):550-552.

[4] 余忠清,胡丽华.ABO疑难血型鉴定与临床输血的研究[J].临床血液学杂志,2010,2(2):100.