常规试管凝集试验与虎红平板凝集试验检测布病抗体结果对比分析

张宇 王志坚

本文的主要研究目的，是通过虎红平板凝集试验以及常规试管凝集试验对布鲁菌病进行检测，并且分析对比两者的检测结果。在实际检测的过程中，主要运用试管凝集试验以及虎红平板凝集试验这两种方法。通过对试验结果分析发现，在四百份的高温血清当中，其中有十八份试管凝集试验阳性，完全来自于三十六份的虎红平板凝集试验的阳性当中。因此我们能够得出，在对布鲁菌病的实际检测过程中，应用通过虎红平板凝集试验进行有效的筛选，所得到的阳性样品可以通过试管凝集试验来进行复核。

所谓布鲁菌病，通常也被人称作布病或者波状热病。这种疾病主要是布鲁菌所引发的，并且在世界范围内分布广泛，人类与牲畜都会感染这种慢性的细菌性传染疾病。布鲁菌病在我国隶属于二类牲畜疫病。在我国大多数布鲁菌病发病率高的区域，国家颁布了2015年必须对该疾病进行有效的控制，到了2020年必须彻底的清除该疾病。因此，對于布鲁菌病阳性高效的检测手段，对该疾病的预防与医治都有着至关重要的意义。疾病控制机构通过运用试管凝集试验方法以及虎红平板凝集试验方法对四百例高危群体的样品血清进行检测对比分析。其详细的分析检测报告结果如下。

1 材料与方法

1.1 材料

在实际检测的过程中，所使用的材料包括：试管凝集抗原试剂，虎红平板凝集抗原试剂，并且都在有效期之间进行使用。所检测的血清样品来自于四百例布鲁菌疾病的高危群体。

1.2 方法

1.2.1 虎红平板凝集试验（RBPT）

在实际检测的过程中，将需要进行检测的血清样品，取出0.03mL，放置于玻片上，并且将0.03mL的虎红平板抗原加入到其中，并且均匀混合，其判定结果将会在5min之内产生。如果玻片上的混合物当中产生颗粒状的物质或者产生凝集片，其检测结果都为阳性（+）。如果混合液体呈现出十分浑浊的状态，其检测结果都为阴性（-）。

1.2.2 试管凝集试验（SAT）

在运用该种方法进行实际检测的过程中，需要稀释被检测的血清样品。对于每一份的血清样品，需要使用五支小试管，将2.3mL生理盐水加入到第一个试管当中，对于第二个试管，不需要加入生理盐水，接下来将0.5mL加入到第三个试管、第四个试管以及第五个试管当中。之后，通过对1mL吸管的有效使用，将需要进行检测的0.2mL血清样品吸入到其中，并且将其放置到第一个试管当中，保证液体的均匀混合。在确定液体的均匀混合之后，继续运用此吸管来吸取第一个试管当中的血清，并且将这些血清分别以0.5mL的容量加入到第二个试管与第三个试管当中，并且保证第三个试管当中的液体均匀混合。之后吸出0.5mL的第四试管液体，将其融入到第五个试管当中，并且确保第五个试管当中的液体均匀混合，然后取出0.5mL的第五试管液体并将其丢弃。通过对这些试管当中的血清稀释度进行分析对比，我们发现第二个试管一直到第五个试管的稀释度分别为1∶12.5、1∶25、1∶50、1∶100。在第二个试管以及第五个试管的稀释血清检测样品当中，分别将0.5mL的抗原稀释液加入到其中。通过观察发现，血清样品的稀释度第二个试管一直到第五个试管的稀释度分别为1∶25、1∶50、1∶100、1∶200。同时进行抗原对照以及阳性与阴性的对照，并且对判断比浊管进行制备。将所有的比浊管、对照管、试验管有效震荡之后，将其放置到37℃的温箱之内二十二个小时，将其取出在室温的环境中放置两个小时，之后将比浊管作为判断的重要依据，进行试验结果的判定。阳性血清的诊断准则：试管凝集反应血清 1∶100 稀释度凝集现象++及以上就可以判定为布鲁菌病阳性。

2 结果

通过四百份高危群体的样品血清进行细致的检测，其中试管凝集试验有十八份的阳性监测结果，虎红平板凝集试验有三十六份阳性监测结果，并且试管凝集试验的十八例阳性结果全部包含在虎红平板凝集试验的三十六例阳性结果当中。试管凝集试验以及虎红平板凝集试验这两种试验手段有着十分重要的统计学含义，两种检测手段的阳性结果有着极大的差异性（χ2=16.06，P﹤0.005）。如下表所示：

通过对试验信息数据的有效分析，能够得知试管凝集试验方法所产生的阳性概率为4.50%，虎红平板凝集实验方法所产生阳性的概率为9.00%，因此，相比之下虎红平板凝集实验相较于试管凝集试验的阳性测定有着非常大的优势。

我国国标运用试管凝集试验检测手段以及虎红平板凝集试验手段来进行检测。通过实际操作我们发现，虎红平板有着更快的反应速度，并且操作方式极为简单快捷，但是非常容易导致特异凝集的产生，致使假阳性的出现，该种方法对于大面积筛查非常适合。试管凝集试验可以定量定性，并且有着非常强的敏感性与特异性，有着非常精准的判断结果。但是使用该种方法的过程中，所需要的群体血清以及布鲁菌凝集抗原的量比较大。

在大面积筛查的过程中，虎红平板凝集试验能够发挥重要作用。养殖产业在现今得到了飞速的发展，检测工作者也在持续的增多，想要更加高效精准的得出检测结果，相关工作者可以将两种检测方法结合进行，进行优势互补，这样才能使工作效率得到大幅度的提升。

（作者单位：111000辽宁省辽阳市太子河区动物疫病预防控制中心）