EDTA和有机酸对毛竹修复重金属污染土壤的强化作用

叶朝军，吴家胜，钟 斌，陈俊任，郭 佳，徐美贞，柳 丹,

（1.温州科技职业学院 科技产业开发处，浙江 温州325006；2.浙江农林大学 省部共建亚热带森林培育国家重点实验室，浙江 杭州 311300；3.浙江农林大学 浙江省土壤污染生物修复重点实验室，浙江 杭州311300；4.东阳市画水镇人民政府，浙江 东阳 321000；5.浙江诚邦园林股份有限公司，浙江 杭州310008）

随着工农业的发展及人类的活动加剧，重金属污染已经严重危害到人类的健康［1－2］。目前，植物修复因其绿色环保受到广泛的关注，但由于受到土壤中重金属生物有效性的影响，植物修复效率低下［3－4］。利用螯合剂来活化土壤中的重金属，促进植物对重金属的吸收，是提高植物修复效率的方法之一［5］，其中，乙二胺四乙酸（EDTA）是使用最广泛的一种螯合剂，能够显著提高铅（Pb），铜（Cu），镉（Cd）等重金属的活性［6－8］。CHIGBO等［9］在铜污染的土壤中施加EDTA强化植物修复后显著提高了土壤中铜的有效态含量，同时显著促进了植物对铜的吸收积累。有研究表明：EDTA的生物降解性差，可能会对环境造成一定污染［10］。草酸、柠檬酸等生物降解性较好的小分子有机酸也被广泛用于植物修复中［11］。DUQUÈNE等［12］研究发现，使用5 mmol·kg－1柠檬酸、柠檬酸铵、草酸等有机酸显著增加了土壤溶液中重金属的质量浓度。相对于其他超积累植物或者重金属富集植物，毛竹Phyllostachys edulis拥有巨大的生物量，并且已被证明作为植物修复材料的可能性［13－14］。本研究采用镀锌厂重金属污染土壤和毛竹苗进行土柱淋洗试验，研究施加螯合剂EDTA和有机酸后毛竹叶片叶绿素荧光特性，毛竹重金属质量分数变化，土壤溶液重金属质量分数及EDTA质量浓度的动态变化，为螯合剂强化重金属污染土壤植物修复提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 供试材料

供试土壤来自浙江省杭州市富阳区云纳热镀锌厂附近农田（29°53′17″N， 119°53′24″E）， 采集 0～20，20～40，40～60 cm等3个土层的重金属污染土壤，风干过5 mm筛，其土壤基本理化性质见表1。供试植株：由种子培养生长在基质中的毛竹幼苗，选择长势相似且无病虫害的幼苗，用蒸馏水去除附着的基质，在含有1/2 Yoshida营养液（pH 5.8）的黑色塑料盆中预培养。营养液隔5 d更新1次，保持24 h通气。

表1 土壤基本理化性质Table 1 Physicochemical properties of soil

1.2 实验设计与处理

将不同土层的土壤装入土柱中，并且在5，20，40，60 cm土层处装入土壤溶液收集器［15］。栽植毛竹苗3株·土柱－1，并且控制土柱土壤含水率，整个实验培养周期为2个月，在实验结束前10 d，一次性分别添加人工螯合剂和有机酸。所添加的人工螯合剂为质量摩尔浓度1.5 mmol·kg－1（E1.5）和3.0 mmol·kg－1（E3.0）的 EDTA-Na2； 有机酸根据毛竹苗根系分泌物配制， 为 m（草酸）∶m（柠檬酸）∶m（乳酸）=5∶1∶1 的混合物［16］， 质量摩尔浓度为 15.0 mmol·kg－1（S15）和 30.0 mmol·kg－1（S30）， 以不添加螯合剂和有机酸为对照（ck），共5个处理，重复3个·处理－1，并随机排放。整个试验在浙江农林大学温室大棚内完成。为避免pH值不同所引起的活化差异，所添加的EDTA和有机酸的pH值均调节成供试土壤pH值［17］。

1.3 土壤溶液的收集

在添加螯合剂前1 d，收集土柱各土层的土壤溶液，作为初始溶液，然后一次性加入EDTA和有机酸，并在第1，3，5，7，9天收集土壤溶液［18］，共6次。收集到的土壤溶液取10 mL酸化，利用ICPOES测定土壤液中重金属质量分数，其余冷冻保存冰箱备用。

1.4 植物叶绿素荧光的测定

在试验结束前2 d，选择晴朗天气，利用便携式叶绿素荧光仪在9:00－12:00测定每株毛竹第3片叶片叶绿素荧光特征。Fo为初始荧光；Fm为最大荧光产量；Fv/Fm为PSⅡ最大光化学量子产量；Fv/Fo为PSⅡ潜在光化学效率。

1.5 毛竹重金属质量分数测定

收获的毛竹用20.0 mmol·L-1EDTA-Na2浸泡20 min，去除附着的重金属，将毛竹分为根茎叶3部分，粉碎，称取0.1 g的样品，用硝酸/高氯酸消煮定容至50 mL并过滤，用ICP-OES测定重金属质量分数。

1.6 土壤溶液中EDTA质量浓度的测定

EDTA质量浓度测定参考郭晓方等［19］、郑睿行等［20］方法：取1.0 mL样品至管中，加1.0 mL氯化铁溶液（2.5 mmol·L-1）和1.0 mL抗坏血酸（含4.0 mg抗坏血酸），稀释至5.0 mL，水定容摇匀，经0.22 μm微孔滤膜过滤，立即液相色谱法测定。液相色谱为日本LC-20AT，分析柱：C18 Inertsil ODS-SP色谱柱（4.6 mm × 250 mm， 5 μm）， 岛津； 保护柱： Inertsil ODS-SP（5 μm， 4.0 mm × 10 mm）， 岛津； 流动相：水-甲醇（80+20）含有 0.02 mol·L-1四丁基溴化铵， 0.03 mol·L-1乙酸钠缓冲液（磷酸调 pH 4）； 流速： 0.8 mL·min-1， 检测波长： 258 nm。

1.7 数据分析

采用Excel 2013和SPSS 21.0软件进行数据处理，用SigmaPlot 12.5软件作图。采用方差分析和最小差异显著法（LSD）对数据进行统计分析，差异显著性水平为P＜0.05。

2 结果分析

2.1 EDTA及有机酸对毛竹叶绿素荧光特性的影响

由表2可知：施加EDTA和有机酸后，Fo略微上升，与对照组之间无显著差异；而Fm，Fv/Fm和Fv/Fo不同程度地下降，且添加3.0 mmol·kg-1EDTA和有机酸后，Fm，Fv/Fm和Fv/Fo显著降低，在30.0 mmol·kg-1有机酸下Fm，Fv/Fm和Fv/Fo下降幅度最大，分别降低了11.7%，5.3%和19.2%。可见，30.0 mmol·kg-1的有机酸处理对毛竹叶片叶绿素荧光特性抑制效果最为显著。

表2 添加EDTA和有机酸后毛竹叶片叶绿素荧光变化Table 2 Changes of chlorophy fluorescence parameter of moso bamboo leaves after adding EDTA and organic acids

2.2 EDTA及有机酸强化毛竹吸收重金属

从图1可以看出：添加EDTA后毛竹对3种重金属的吸收显著增加，且随着EDTA质量摩尔浓度增加而增加；添加有机酸后，毛竹对重金属的吸收无显著差异。毛竹从土壤吸收的重金属主要集中在根部，其次在茎，最少在叶，并且毛竹对镉的转运效率最高，对铜的转运效率最低。

2.3 EDTA及有机酸对重金属在不同土层内迁移的影响

图1 EDTA和有机酸对毛竹吸收重金属的影响Figure 1 Effect of EDTA and organic acids on moso bamboo accumulated heavy metal

2.3.1 EDTA及有机酸对铜在不同土层内迁移的影响 由图2所示：在对照处理中，土壤溶液中铜质量分数随着采集时间的增加始终在低于0.1 mg·kg-1的范围内波动。在土壤中添加螯合剂后，土壤溶液中铜的质量分数显著增加。在EDTA处理中，3.0 mmol·kg-1EDTA对铜的活化作用较强，在添加EDTA后第1天各土层土壤溶液中铜质量分数显著上升，且5 cm土层处土壤溶液中铜质量分数变化最大，与对照相比分别增加了1 215和1 639倍。随着时间的推移，5 cm表层土层土壤溶液中铜质量分数先升高，在第3天的时候达到最大，然后再随时间的增加而降低；在20 cm及更深的土层中，土壤液中的铜不断累积。添加有机酸后，只有表层土壤表现出明显的活化作用。在5 cm土层中，15.0 mmol·kg-1有机酸处理后，土壤溶液中铜质量分数随着时间增加逐渐减少，15.0 mmol·kg-1有机酸处理后，土壤溶液中铜质量分数随着时间增加先增加后减少，在20 cm处，仅在添加有机酸的第1天铜质量分数显著增加。在整个土柱试验中，土壤溶液中铜主要集中在表层土壤。

图2 各土层土壤溶液中铜质量分数的变化Figure 2 Change of Cu contents in soil solution of different soil layers

2.3.2 EDTA及有机酸对锌在不同土层内迁移的影响 由图3可知：对照土壤溶液中锌质量分数随着采集时间无显著变化，添加EDTA螯合剂后，土壤溶液中锌质量分数显著增加，且相比添加有机酸作用更加明显。在EDTA处理中，高质量浓度EDTA对锌的活化作用较强，在添加1.5和3.0 mmol·kg-1EDTA后第1天各土层土壤溶液中锌质量分数显著上升。随着时间的增加，5和60 cm土层处锌质量分数逐渐降低，在20和40 cm土层，土壤溶液中的锌质量分数随着时间的增加而增大。添加有机酸后，在5和20 cm土层土壤溶液中锌质量分数显著增加。

图3 各土层土壤溶液中锌质量分数的变化Figure 3 Change of Zn contents in soil solution of different soil layers

2.3.3 EDTA及有机酸对镉在不同土层内迁移的影响 由图4可见：对照土壤溶液中镉质量分数始终在很低的范围内波动。在土壤中添加螯合剂EDTA后，各土层土壤溶液中镉质量分数显著增加，对镉的活化作用显著强于有机酸处理。在添加EDTA后第1天各土层土壤溶液中镉质量分数显著上升，且5 cm土层土壤溶液中镉质量分数变化最大，相比对照分别增加了353和1 012倍。随时间的增加，各土层土壤溶液中镉与锌的质量分数变化趋势一致。添加有机酸对各土层土壤镉都有活化作用，且表层土壤最显著，随时间的增加镉质量分数不断降低。在整个淋洗柱中，土壤溶液中镉质量分数随土壤深度的增加而减少。

2.4 土壤溶液中EDTA质量浓度的变化

由图5所知：添加1.5和3.0 mmol·kg－1EDTA后，土壤溶液中EDTA主要集中在5 cm土层。随着时间的增加，5 cm土层处EDTA质量浓度显著降低，5 d后达到稳定，分别为110.9～122.9 mg·L－1和257.8～263.3 mg·L－1； 20 cm 土层 EDTA 质量浓度为 47.7～55.6 mg·L－1和 84.4～124.5 mg·L－1， 无显著变化；40 cm土层EDTA施加第1天达到最高，分别为22.3和50.7 mg·L－1，之后显著下降达到稳定；60 cm土层 EDTA 质量浓度相对较小， 分别为 2.9～6.2 mg·L－1和 7.3～10.7 mg·L－1， 差异不显著。

3 讨论

叶绿素荧光是反映植物光合生理的一个指标［21］。本研究中，添加3.0 mg·L－1EDTA和有机酸后毛竹叶片最大荧光Fm，PSⅡ最大光化学效率Fv/Fm和PSⅡ潜在光化学效率Fv/Fo显著降低，表明螯合剂的添加降低了植物的光合生物素，使植物的光合系统遭到破坏。EDTA处理后的毛竹叶片荧光参数降低，主要原因可能是EDTA活化了土壤中的重金属，提高了重金属的生物有效质量分数，高质量分数的重金属损害了毛竹的生长，对毛竹细胞内叶绿体、线粒体及细胞壁等结构产生了毒害作用［13,22］。同样添加有机酸后也降低了毛竹叶片的叶绿素荧光参数，可能有机酸分解后改变了土壤的基本理化性质，从而改变了毛竹苗的生长状况。

图4 各土层土壤溶液中镉质量分数的变化Figure 4 Change of Cd contents in soil solution of different soil layers

图5 各土层土壤溶液中EDTA质量浓度的变化Figure 5 Change of EDTA contents in soil solution of different soil layers

螯合剂可以活化土壤中难溶态重金属，改善其生物有效性［7,27］，提高植物对土壤中重金属的吸收效率［23－24］。EDTA是一种普遍使用的螯合剂，添加EDTA显著提高了毛竹对土壤中锌、铜和镉的吸收，作用效果显著高于有机酸。这与CAY等［25］研究EDTA强化蜀葵Althaea rosea修复重金属污染土壤得出的结果相似。添加有机酸并没有明显促进毛竹对重金属的吸收，可能是由于添加的有机酸分解后改变了土壤的基本理化性质，抑制了毛竹吸收重金属，这与吴龙华等［26］的研究结果类似。本研究中，EDTA淋洗显著增加了0～20 cm土层土壤中可溶性铜、锌和镉的质量分数，由于EDTA活化效果强，土壤溶液中铜、锌和镉的质量分数相对比较高。添加EDTA增强了重金属的迁移性，导致20和40 cm处土壤溶液中铜、锌和镉的质量分数随着时间的增加而增加。YLIVAINIO等［28］研究表明：在石灰性土壤中添加EDTA可持续提高镉、铅和镍在土壤中的溶解性。在本研究中，添加有机酸初期对土壤中铜和锌的活化效果比较明显，随着时间的推移，活化效果消失甚至产生了钝化效果。可能是由于有机酸在土壤中很快被土壤微生物分解，对重金属的活化效果消失，而且可能改变了土壤的pH值，从而产生钝化效果。吴龙华等［26］研究表明：施加3.0 mmol·kg－1，pH 6.3的草酸、柠檬酸或苹果酸对土壤铜含量及其形态分配无显著影响。添加有机酸后，土壤溶液中铜和锌质量分数在40和60 cm土层处变化不显著，说明添加有机酸后铜和锌在土壤中的纵向迁移能力弱；而有机酸处理对镉具有一定的活化和迁移能力。在整个土柱试验中，EDTA处理对重金属的活化和迁移效果始终强于有机酸。李艳丽等［29］采用土柱模拟淋洗试验，研究了EDTA，柠檬酸和草酸3种淋洗剂对污染土壤中镉纵向迁移的影响，结果表明：EDTA对镉的迁移能力强于柠檬酸和草酸。

EDTA添加到土壤后会长时间残留，并迁移到更深的土壤中，从而对环境造成一定的风险［30－31］。有研究表明：可根据土壤类型，通过控制EDTA的施用量及施用时间来控制EDTA在强化修复重金属污染土壤中的残留和迁移［19］。相比EDTA，有机酸在自然界中很容易被生物降解，因此它的环境风险更小［32－33］。本研究中，EDTA主要集中在表层土壤，但第1天在40 cm土壤溶液中检测到相对较高的质量浓度，说明EDTA在土壤中迁移能力强。在第5天到第9天EDTA质量浓度相对稳定且相对较高，也说明EDTA很难被分解。

4 结论

乙二胺四乙酸（EDTA）和有机酸处理抑制了毛竹的叶绿素荧光特性，且30.0 mmol·kg－1有机酸处理的抑制程度最大，3.0 mmol·kg－1EDTA处理其次，15.0 mmol·kg－1有机酸处理最小。在整个土柱试验中，EDTA处理显著提高了土壤溶液中重金属质量分数，加重了重金属向下迁移的风险；有机酸处理对重金属的活化效果及在土壤中的迁移能力不明显。添加EDTA促进了毛竹对铜、锌、镉的吸收，而有机酸则无促进作用。添加1.5和3.0 mmol·kg－1EDTA后，土壤溶液中EDTA质量浓度主要集中在5 cm土层，且短期内很难被分解。

5 参考文献

［1］徐剑锋，王雷，熊瑛，等.土壤重金属污染强化植物修复技术研究进展［J］.环境工程技术学报，2017，7（3）：366－373.XU Jianfeng,WANG Lei,XIONG Ying,et al.Research progress on strengthening phytoremediation technologies for heavy metals contaminated soil［J］.J Environ Eng Technol,2017,7（3）:366 － 373.

［2］LI Zhiyuan,MA Zongwei,van der KUIJP T J,et al.A review of soil heavy metal pollution from mines in China:pollution and health risk assessment［J］.Sci Total Environ,2014,468/469:843 － 853.

［3］WAN Xiaoming,LEI Mei,CHEN Tongbin.Cost-benefit calculation of phytoremediation technology for heavy-metalcontaminated soil［J］.Sci Total Environ,2016,563/564:796 － 802.

［4］席梅竹，白中科，赵中秋.重金属污染土壤的螯合剂诱导植物修复研究进展［J］.中国土壤与肥料，2008（5）:6－11.XI Meizhu,BAI Zhongke,ZHAO Zhongqiu.Advances on the study of chelate-enhanced phytorermediation for heavy metal contaminated soils ［J］.Soil Fert Sci China,2008（5）:6 － 11.

［5］刘孝利，曾昭霞，铁柏清，等.几种修复措施对Cd淋失及土壤剖面运移影响［J］.环境科学，2016，37（2）：734－739.LIU Xiaoli,ZENG Zhaoxia,TIE Baiqing,et al.Cd runoff load and soil profile movement after implementation of some typical contaminated agricultural soil remediation strategies ［J］.Environ Sci,2016,37（2）:734 － 739.

［6］张玉秀，黄智博，柴团耀.螯合剂强化重金属污染土壤植物修复的机制和应用研究进展［J］.自然科学进展，2009， 19（11）： 1149 － 1158.ZHANG Yuxiu,HUANG Zhibo,CHAI Tuanyao.Advances in mechanisms and applications of chelating agents for phytoremediation of heavy metal contaminated soils ［J］.Progr Nat Sci,2009,19（11）:1149 － 1158.

［7］LUO Jie,QI Shihua,SOPHIE X W,et al.An evaluation of EDTA additions for improving the phytoremediation efficiency of different plants under various cultivation systems ［J］.Ecotoxicology,2016,25（4）:646 － 654.

［8］LAI H Y,CHEN Z S.The influence of EDTA application on the interactions of cadmium,zinc,and lead and their uptake of rainbow pink （Dianthus chinensis） ［J］.J Hazard Mater,2006,137（3）:1710.

［9］CHIGBO C,BATTY L.Chelate-assisted phytoremediation of Cu-pyrene-contaminated soil using Z.mays ［J］.Water Air Soil Pollut,2015,226（3）:74.doi:10.1007/s11270-014-2277-2.

［10］龙珍，徐海涛，张亚平，等.活化剂联合植物移除污染土壤重金属的研究进展［J］.环境工程，2016，34（10）： 172 － 176.LONG Zhen,XU Haitao,ZHANG Yaping,et al.Removal of heavy metals from contaminated soils by activating agents combined with plants ［J］.Environ Eng,2016,34（10）:172 － 176.

［11］易龙生，王文燕，陶冶，等.有机酸对污染土壤重金属的淋洗效果研究［J］.农业环境科学学报，2013，32（4）： 701 － 707.YI Longsheng,WANG Wenyan,TAO Ye,et al.Removing heavy metals in contaminated soil by the organic acids［J］.J Agro-Environ Sci,2013,32（4）:701 － 707.

［12］DUQUÈNE L,VANDENHOVE H,TACK F,et al.Enhanced phytoextraction of uranium and selected heavy metals by Indian mustard and ryegrass using biodegradable soil amendments ［J］.Sci Total Environ,2009,407（5）:1496 － 1505.

［13］CHEN Junren,SHAFI M,LI Song,et al.Copper induced oxidative stresses,antioxidant responses and phytoremediation potential of Moso bamboo （Phyllostachys pubescens） ［J］.Sci Rep,2015,5（3）:13554.

［14］PENG Danli,SHAFI M,WANG Ying,et al.Effect of Zn stresses on physiology,growth,Zn accumulation,and chlorophyll of Phyllostachys pubescens ［J］.Environ Sci Pollut Res,2015,22（19）:14983 － 14992.

［15］LIU Dan,ISLAM E,MA Junshan,et al.Optimization of chelator-assisted phytoextraction,using EDTA,lead and Sedum alfredii Hance as a model system ［J］.Bull Environ Contam Toxicol,2008,81（1）:30 － 35.

［16］CHEN Junren,SHAFI M,WANG Ying,et al.Organic acid compounds in root exudation of moso bamboo （Phyllostachys pubescens） and its bioactivity as affected by heavy metals ［J］.Environ Sci Pollut Res,2016,23（20）:20977-20984.

［17］WU L H,LUO Y M,CHRISTIE P,et al.Effects of EDTA and low molecular weight organic acids on soil solution properties of a heavy metal polluted soil［J］.Chemosphere,2003,50（6）:819 － 822.

［18］DOUMETT S,LAMPERI L,CHECCHINI L,et al.Heavy metal distribution between contaminated soil and Paulownia tomentosa,in a pilot-scale assisted phytoremediation study:influence of different complexing agents ［J］.Chemosphere,2008,72（10）:1481-1490.

［19］郭晓方，卫泽斌，吴启堂.乙二胺四乙酸在重金属污染土壤修复过程的降解及残留［J］.农业工程学报，2015， 31（7）： 272 － 278.GUO Xiaofang,WEI Zebin,WU Qitang.Degradation and residue of EDTA used for soil repair in heavy metal-contaminated soil［J］.Trans Chin Soc Agric Eng,2015,31（7）:272 － 278.

［20］郑睿行，张旭，方芳，等.高效液相色谱法测定酱腌菜制品中EDTA残留量［J］.中国食品添加剂，2011（2）： 212 － 219.ZHENG Ruihang,ZHANG Xu,FANG Fang,et al.Technical studies of detection method of EDTA residue in the pickled product［J］.China Food Add,2011（2）:212 － 219.

［21］简敏菲，汪斯琛，余厚平，等.Cd2+，Cu2+胁迫对黑藻（Hydrilla verticillata）的生长及光合荧光特性的影响［J］.生态学报， 2016， 36（6）： 1719－ 1727.JIAN Minfei,WANG Sichen,YU Houping,et al.Influence of Cd2+or Cu2+stress on the growth and photosynthetic fluorescence characteristics of Hydrilla verticillata ［J］.Acta Ecol Sin,2016,36（6）:1719 － 1727.

［22］AZZARELLO E,PANDOLFI C,GIORDANO C,et al.Ultramorphological and physiological modifications induced by high zinc levels in Paulownia tomentosa ［J］.Environ Exp Bot,2012,81（3）:11 － 17.

［23］卫泽斌，陈晓红，吴启堂，等.可生物降解螯合剂 GLDA诱导东南景天修复重金属污染土壤的研究［J］.环境科学， 2015,36（5）:1864 － 1869.WEI Zebin,CHEN Xiaohong,WU Qitang,et al.Enhanced phytoextraction of heavy metals from contaminated soils using Sedum alfredii Hance with biodegradable chelate GLDA ［J］.Environ Sci,2015,36（5）:1864 － 1869.

［24］LEE J,SUNG K.Effects of chelates on soil microbial properties,plant growth and heavy metal accumulation in plants ［J］.Ecol Eng,2014,73:386 － 394.

［25］CAY S,UYANIK A,ENGIN M S,et al.Effect of EDTA and tannic acid on the removal of Cd,Ni,Pb and Cu from artificially contaminated soil by Althaea rosea Cavan ［J］.Int J Phytoremed,2015,17（6）:568 － 574.

［26］吴龙华，骆永明.铜污染土壤修复的有机调控研究（Ⅲ）EDTA和低分子量有机酸的效应［J］.土壤学报，2002， 39（5）： 679 － 685.WU Longhua,LUO Yongming.Chelate-enhanced phytoremediation of copper polluted soil （Ⅲ）effect of EDTA and low molecule weight organic acids ［J］.Acta Pedol Sin,2002,39（5）:679 － 685.

［27］UDOVIC M,LESTAN D.Pb,Zn and Cd mobility,availability and fractionation in aged soil remediated by EDTA leaching ［J］.Chemosphere,2009,74（10）:1367 － 1373.

［28］YLIVAINIO K.Effects of iron （III） chelates on the solubility of heavy metals in calcareous soils ［J］.Environ Pollut,2010,158（10）:3194 － 3200.

［29］李燕丽，李博文，刘微，等.有机酸淋洗对土壤Cd纵向迁移及有效性的影响［J］.水土保持学报，2011，25（1）： 34 － 38.LI Yanli,LI Bowen,LIU Wei,et al.Effects of soil leaching with organic acid on vertical movement and the availability of Cd in soil［J］.J Soil Water Conserv,2011,25（1）:34 － 38.

［30］WU L H,LUO Y M,XING X R,et al.EDTA-enhanced phytoremediation of heavy metal contaminated soil with Indian mustard and associated potential leaching risk ［J］.Agric Ecosyst Environ,2004,102（3）:307 － 318.

［31］SHAHID M,AUSTRUY A,ECHEVARRIA G,et al.EDTA-enhanced phytoremediation of heavy metals:a review［J］.Soil Sedim Contam Int J,2014,23（4）:389 － 416.

［32］MEERS E,RUTTENS A,HOPGOOD M J,et al.Comparison of EDTA and EDDS as potential soil amendments for enhanced phytoextraction of heavy metals ［J］.Chemosphere,2005,58（8）:1011 － 1022.

［33］EVANGELOU M W H,EBEL M,SCHAEFFER A.Evaluation of the effect of small organic acids on phytoextraction of Cu and Pb from soil with tobacco Nicotiana tabacum ［J］.Chemosphere,2006,63（6）:996 － 1004.