脂肪酶的试剂携带污染对总胆汁酸检测的影响

雷鹏，侯芳，陈开杨，欧阳慧，杨阳，向尹

(乐山市人民医院检验科，四川 乐山 614000)

血清总胆汁酸（TBA）在临床肝病诊断中应用较广，对急、慢性肝炎，肝硬化，肝内外胆道阻塞，胆汁淤积等疾病的诊断具有重要的临床意义[1，2]。在实际工作中我们发现部分TBA结果有假性升高的现象。经追踪发现，测定脂肪酶（LPS）后的TBA浓度与单独测定TBA浓度有差异。为探讨LPS试剂是否影响TBA测定，我们用日立7600－110和7600－020全自动生化分析仪，实验分析LPS试剂对TBA携带污染的情况，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器 ⑴检测标本：收集当日无溶血、无黄疸、无脂血的血清标本混合成1份样本后再分为20份，每份2ml。⑵仪器：日立7600－110、7600－020全自动生化分析仪。其中，7600－110由D模块与P模块组成，LPS与TBA试剂在P模块。7600－020由两个 P模块组成，LPS试剂在 P2模块，TBA试剂在P1模块。试剂：TBA试剂由四川迈克提供，批号：0217011，有效期：20180209。

1.2 方法 ⑴LPS对TBA的干扰程度：先对10份混合血清的TBA进行单独检测，将其作为对照组。接着另取混合血清10份，做LPS检测后接着做TBA检测，连续10次，将其作为实验组1。然后在LPS检测后设置特殊清洗，做LPS检测后接着做TBA检测，连续10次，将其作为实验组2。在7600－110上进行上述三种检测，在7600－020上进行上述前两种检测。⑵干扰试剂的确认：取混合血清1份，取500μl混合血清与5μl生理盐水混合作为对照组，再取两份500μl混合血清分别与5μl LPS的R1、R2试剂混合作为实验组1和实验组2，每份样本重复测定10次。在7600－020上进行上述检测。⑶LPS对TBA结果影响的持续时间：将10份混合血清单独测试TBA，作为对照组。接着在仪器上对15份混合血清按下列顺序测试：LPS、LPS、LPS、LPS、LPS、TBA、TBA、TBA、TBA、TBA、TBA、TBA、TBA、TBA、TBA，按上述检测重复 10次作为实验组1。然后在LPS检测后设置特殊清洗，重复实验组1步骤作为实验组2。在7600－110上进行上述检测。

1.3 统计学处理 应用SPSS 18.0统计软件进行数据分析，计量资料以（±s）表示，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 LPS对TBA的干扰程度实验结果 在7600－110上同时选择LPS与TBA进行检测所得TBA的值明显高于单独检测TBA，差异有统计学意义（P＜0.05）。而在检测LPS后设置特殊清洗再检测TBA所得的值也明显高于单独检测TBA，差异有统计学意义（P＜0.05）。 而在 7600－020 上同时选择LPS与TBA进行检测所得TBA的值与单独检测TBA 相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。 （表 1）

2.2 携带污染的试剂确认实验结果 加入LPS试剂R1后，所测得的TBA值明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。 而加入 LPS试剂 R2后，所测得的TBA值也明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。 （表 2）

2.3 LPS试剂携带污染对TBA结果影响的持续时间 参照参考文献[3，4]方法，未设置特殊清洗时，LPS试剂对其后TBA检测的干扰到第10管仍然存在，差异有统计学意义（P＜0.05）。而在 LPS 检测后设置特殊清洗，LPS试剂对其后TBA检测的干扰持续到第 7 管测试，差异有统计学意义（P＜0.05），第 8管测试与对照组相比，差异无统计学意义 （P＞0.05）。 （表 3）

表1 3种不同方法检测TBA

表2 加入LPS试剂后所测TBA含量

3 讨论

目前，全自动生化分析仪在临床检验中广泛使用，给日常工作带来了极大的便利[5，6]。但在实际工作中，仪器的携带污染现象难以避免[7－9]。资料显示，携带污染是影响全自动生化分析仪准确度、精密度的常见原因之一[10，11]。携带污染与不同仪器、试剂成分及项目测定顺序、组合以及试剂针、搅拌棒、比色杯是否清洁或损坏均有一定的关系[12]，其中常见原因是试剂间的交叉污染。试剂间的交叉污染常见于试剂中含有下一个检测所要测定的底物，或含有的某种试剂成分与下一反应的底物有作用，因而直接干扰下一反应的测定结果；另一种原因是该试剂所发生的反应对下一个项目的反应过程带来间接的干扰[13－15]。

本文通过实验发现LPS的R1和R2试剂对TBA测定有明显的正干扰，同时还发现LPS的R1和R2试剂中含有大量的胆汁酸。在7600－110上对LPS先测定，之后行TBA测定时，TBA测定结果表现为假性增高，结果明显区别于对照组。同时在对LPS测定后设置特殊清洗再行TBA测定，TBA测定结果仍假性增高，结果也高于对照组。而在7600－020上，由于LPS与TBA试剂分别处于不同的模块中，所以并不存在LPS对TBA的携带污染。实验结果还表明在LPS检测后设置特殊清洗并不能完全清洗试剂针上的LPS试剂，这可能与LPS试剂中含有大量的胆汁酸，仪器并不能彻底冲洗干净有关。

表3 LPS试剂对TBA测定干扰持续时间

本实验还表明LPS试剂对TBA测定的影响具有持续性，未设置特殊清洗，TBA测定的第10管仍存在携带污染。即使设置特殊清洗，TBA测定的第7管也存在携带污染。这要求实验室人员在平时的工作中发现TBA出现异常结果时，要及时考虑携带污染的情况，分析之前测定的项目是否包含LPS，并在不同的仪器上复查。

综上所述，结合TBA测定中，LPS试剂对其结果正干扰影响进行分析，可将被干扰的项目和干扰的项目在不同的模块中安排，对分析项目的设置必须注意位置，加强防范措施，从根本上保证实验数据的可靠性，为临床提供客观真实的诊疗依据。

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