绝经后女性冠心病患者趋化因子CCL5水平与冠状动脉病变程度的相关性△

钱 芳 李 华 瞿秋红 王育斌

(武汉科技大学医学院生理与病理生理学系 武汉 430065)

心血管疾病(cardiovascular disease，CVD)是影响人类生存和生活质量的“头号杀手”，冠心病(coronary heart disease，CHD)在CVD中位居前列[1]。CHD确切机制尚不清楚，目前普遍认为其发生发展与遗传、环境因素有关。流行病学资料显示，绝经前的女性CHD发病率明显少于同龄男性，但绝经后发病率则迅速上升。超敏C反应蛋白(hs-CRP)是已被证实的引发CVD的独立危险因素，其水平对CVD的干预及预后有重要参考价值。趋化因子RANTES/CCL5(CCL5)是近年发现的一类小分子量炎症性细胞因子，具有趋化和活化T细胞和单核细胞的功能，并在炎症反应、病原体感染、创伤修复及肿瘤发生发展等方面具有广泛作用[2～4]。本研究通过绝经后女性CHD患者CCL5水平与临床病理因素相关性分析，探讨CCL5作为CHD危险的预测价值。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选择2014年5月～2016年4月在我院心内科根据冠状动脉造影结果首次确诊为冠心病的绝经后女性患者44例，以同期参加健康体检的绝经后女性志愿者44例为对照。所有受试者均排除肿瘤或其他系统严重疾病，且近期无急性疾病、损伤或外科手术史，同意参加此项研究并签署了知情同意书。

1.2 实验室相关检测

抽取受试者空腹状态下(CHD患者造影前)的静脉血5ml，室温下30min内离心，取上层血清，用全自动分析仪(OLYMPUS日本)检测总胆固醇、低密度脂蛋白、胆固醇、甘油三酯、空腹血糖等，采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)检测CCL5(Human RANTES ELISA Kit 北京博奥森生物公司)、胶体金法检测hs-CRP水平(南京 基蛋生物公司)。

1.3 冠脉造影及病变程度评估

完善术前准备，经皮穿刺桡动脉行冠状动脉造影，通过影像回放进行诊断及冠状动脉病变评分，具体参照Gensini评分方法进行。采用加拿大心血管协会(CCS)分级法对患者的临床症状分级。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 一般资料

两组受试者在年龄、绝经年限比较，差异无统计学意义(P>0.05)；腰围、体重指数、总胆固醇及低密度脂蛋白水平，CHD组显著高于对照组(P<0.05)；CHD阳性家族史、糖尿病及高血压比例，CHD组显著高于对照组(P<0.05)。

表1 两组受试者基线特征

特征对照组(n=44)CHD组(n=44)P值年龄(岁)62.5±2.1864.5±1.940.13绝经年限(年)8.1±1.988.4±2.130.56腰围(cm)92.31±7.98105.68±10.710.03体重指数(kg/m2)21.95±2.1328.95±2.130.03CHD阳性家族史3(6.81%)14(31.81%)0.03糖尿病5(11.36%)30(68.18%)0.03高血压7(11.36%)35(68.18%)0.03总胆固醇(mmol/L)4.55±0.215.71±0.180.01低密度脂蛋白(mmol/L)2.69±0.172.92±0.150.04高密度脂蛋白(mmol/L)1.49±0.431.43±0.210.15甘油三酯1.52±0.321.54±0.350.30

2.2 CCL5、hs-CRP水平及其与血管病变程度、症状分级的相关性

ELISA法检测CCL5、hs-CRP水平，结果(表2)显示，与对照组比较，CHD组血清CCL5水平显著升高[(42.5±8.21) vs (88.1±10.21)μg/L，P<0.05]，血清hs-CRP水平显著升高[(0.45±0.14) vs (5.42±2.13)mg/L，P<0.05]。CHD组患者病变血管数量单支24例，≥2支20例；Gensini评分在12～102之间，平均(56.70±27.37)；CCS分级I～III级，I级15例、II级18例、III级11例。

CHD组血清CCL5、hs-CRP水平与患者冠状动脉病变程度及临床症状分级的相关性(表3)显示，血清CCL5、hs-CRP水平与病变血管数量、Gensini评分及CCS分级呈正相关(P<0.05)；此外，血清水平CCL5与hs-CRP水平无显著相关性(P>0.05)。

分组CCL5(μg/L)hs-CRP(mg/L)对照组(n=44)42.5±8.210.45±0.14CHD组(n=44)88.1±10.21*8.42±2.13*

注：*与对照组比较，P<0.05。

表3 CCL5、hs-CRP水平及其与血管病变程度、症状分级的相关性

CCL5(μg/L)P值hs-CRP(mg/L)P值病变血管数量单支(n=24)49.12±8.98≥2支(n=20)98.17±10.050.045.13±1.548.02±4.330.01Gensini评分<57(n=21)31.52±12.92≥57(n=23)79.70±12.42*0.034.95±2.139.12±3.180.03CCS分级CCS I(n=15)21.95±27.35CCS II(n=18)51.95±18.34*CCS III(n=11)91.95±13.04*0.033.87±1.526.34±2.3810.01±3.160.01

3 讨论

动脉粥样硬化或动力性血管痉挛是导致CHD发生的主要病理变化，但动脉粥样硬化不是一种简单的脂质沉积，而是具体慢性炎症长期累积的结果[5～6]。hs-CRP作为炎症标志物，被美国疾病控制预防中心(CDC)与美国心脏协会(AHA)推荐为CVD危险分类的预测指标，具体分类标准根据hs-CRP水平分为：相对低危险(<1mg/L)、中度危险(1.0～3.0mg/L)和高度危险(>3.0mg/L)。本研究结果发现，CHD组血清hsCRP水平较对照组显著升高，其水平与病变血管数量、Gensini评分及CCS分级呈正相关(P<0.05)。冠状动脉硬化斑块破裂是导致CHD患者发生急性心肌梗死(AMI)的首要原因。研究报道， AMI者在发作6h内hs-CRP呈数十倍增长，提示可能炎症反应导致了斑块破裂[7]。这些结果提示，血清hs-CRP水平可以作为CHD血管病变程度、分级及斑块活动情况的评估指标，从而预测AMI等发生的危险性，起到二级预防的作用。但也有研究者认为，hs-CRP易受到感染、创伤等多种因素影响，特异性不强，其能否作为心血管病危险性评估的金指标存在争议[8]。目前，hs-CRP和其他心肌标志物(如肌钙蛋白)联合使用判断急性冠状动脉综合征(ACS)预后中得到普遍采用。

趋化因子CCL5含有68个氨基酸残基，分子量为8kd，属于分泌型的小分子量炎症性细胞因子，主要来自于T淋巴细胞、血小板及NK细胞，也可以在其他组织细胞诱导表达。首先作为趋化性介质被发现，近年来的研究表明其对组织损伤、感染和肿瘤免疫等方面也发挥重要的作用。本研究结果发现，CHD组血清CCL5水平与hs-CRP表现了相同的趋势，但血清水平CCL5与hs-CRP水平并无显著相关性(P>0.05)，表明CCL5水平可能是影响CHD发生的独立危险因素。有研究报道心肌梗死的患者CCL5表达水平升高，尤其是复杂心力衰竭患者[7]；此外，在动物实验中使用抗CCL5的单克隆抗体或抑制剂能减少梗死后心肌损伤，在血管周围脂肪组织中高表达的CCL5对血管炎性细胞的招募及其介导的内皮功能障碍起重要作用[8～9]。这些结果提示CCL5不仅可以作为CVD危险分类的预测指标，而且可能成为治疗的新靶点。CCL5可以在中性粒细胞和单核巨噬细胞等表达，并对这些炎性细胞有趋化作用，但有研究报道，炎性细胞的数量与CCL5水平无显著相关性。

近年来，随着人们对CHD的发病机制及危险因素等相关研究的深入，对CHD的发生、发展也有了更深的认识，并采取了三级预防有利措施，明显降低了冠心病的发病率与死亡率。但是在绝经后女性人群中CHD的发病未得到明显的改善，流行病学资料表明，绝经前的女性在CHD的发病率显著低于男性，也因此在本病的筛查和预防上容易忽视。研究表明，绝经后女性CHD的发病率呈现迅速上升的趋势，其中最重要的原因在于雌激素水平的降低，雌激素与血管粥样硬化的发生存在密切关系。本研究以绝经后女性健康人群和 CHD患者为研究对象，通过绝经后女性CHD患者CCL5水平与临床病理因素相关性分析，探讨CCL5作为CHD危险的预测价值，结果发现绝经后女性冠心病患者CCL5水平升高，与冠脉病变程度及心绞痛症状分级呈正相关，可预测冠脉病变的严重程度，并可能作为hs-CRP等他心肌标志物的联合指标或治疗的新靶点。

1 韩全乐,刘晓堃,张琦,等.早发冠心病患者理想心血管健康行为和因素研究.中国动脉硬化杂志,2014,22(12):1268～1272.

2 周玉丽,徐金锋,刘莹莹.趋化因子CCL5及其受体CCR5在乳腺癌中作用的研究进展.肿瘤,2015,35(8):920～924.

3 Siegel R,Ma J,Zou Z,et al.Cancer Statistics.2014,CA Cancer J Clin,2014,64(1):9～29.

4 Griffith JW,Sokol CL,Luster AD.Chemokines and Chemokine Receptors: Positioning Cells for Host Defense and Immunity.Annu Rev Immunol,2014(32):659～702.

5 施继红,郝雁红,吴寿岭,等.开滦研究人群理想心血管健康行为和因素分布调查.中华心血管病杂志,2012,40(1):62～67.

6 Guzik TJ,Hoch NE,Brown KA,et al.Role of the Tcell in the Genesis of Angiotensin II Induced Hypertension and Vascular Dysfunction.J Exp Med,2007,204:2449～2460.

7 Parissis JT,Adamopoulos S,Venetsanou KF,et al.Serum Profiles of C-C Chemokines in Acute Myocardial Infarction: Possible Implication in Postinfarction Left Ventricular Remodeling.J Interferon Cytokine Res,2002,22:223～229.

8 Montecucco F,Braunersreuther V,Lenglet S, et al.CC Chemokine CCL5 plays a Central Role Impacting Infarct Size and Post-infarction Heart Failure in Mice.Eur Heart J,2012,33:1964～1974.

9 Guzik TJ,Marvar PJ,Czesnikiewicz-Guzik M,et al.Perivascular Adipose Tissue as a Messenger of the Brain-vessel Axis: Role in Vascular Inflammation and Dysfunction.J Physiol Pharmacol ,2007,58:591～610.