LC-MS法测定食用农产品中61种兽药残留及违法添加物

2018-06-06黄武平

现代食品 2018年3期

◎ 黄武平，宋洋

（重庆市计量质量检测研究院，重庆 401123）

食用农产品的饲养不可避免会使用各种兽药，合理使用兽药可以提高其质量，但不遵守休药期/不合理用药问题屡屡发生，造成各种食用农产品中的兽药残留及可能违法添加非食用物质，威胁人们健康。因此，农业部专门发布公告如235号、176号、1025号、560号、1077号等，专门规定了最高兽药残留限量、禁止使用的药物品种目录。目前，各类农产品的兽药残留及可能违法添加的非食用物质检测标准很多，如GB/T 19857-2005、GB/T 20366-2006等分类检测方法，分类检测虽针对性强，但同时测定的种类有限，检测效率低。本方法采用液相色谱质谱联用（LC-MS）仪对61种兽药残留及可能违法添加的非食用物质进行测定，确定了各类物质的检出限、重复性要求。

1 实验部分

1.1 试剂

甲醇；乙腈；甲酸；1%甲酸乙腈-水溶液；0.1%甲酸乙腈溶液；0.1%甲酸水溶液；标准品；1 000 mg/L标准储备液；1.0 mg/L标准中间溶液；混合标准使用液。（注：除另有说明外，本方法所用水均为一级水，各有机试剂均为色谱纯）

1.2 仪器

配有电喷雾离子源LC-MS，电子分析天平，均质器，旋涡混合器，超声波清洗仪，离心机，固相萃取装置。

1.3 分析步骤

1.3.1 试样制备

从所取全部样品中取出有代表性样品的可食部分约500 g，搅碎后用均质器匀浆，制好的试样均分成两份，装入洁净的盛样容器内，密封，并注明标记。将试样于-18 ℃冷冻保存。

1.3.2 试样处理

准确称取试样5 g（精确至0.01 g），于50 mL离心管中，加入10 mL 1%甲酸乙腈-水溶液，涡旋混匀1 min，超声提取20 min，于6 000 r/min离心5 min，取上清液4 mL，待净化。同时进行空白实验。将EMR-Lipid柱放入固相萃取装置上，移入上述4 mL提取液，收集滤液约1 mL，用于液相色谱-质谱测定。

1.3.3 测定条件

色谱柱：C18，2.1 mm×50 mm，1.8 μm；流动相A：0.1%甲酸水溶液；流动相B：0.1%甲酸乙腈溶液（梯度洗脱）；流速：0.3 mL/min；柱温：30℃；进样量：5 μL。流动相梯度洗脱程序见表1。

表1 流动相梯度洗脱程序表

质谱条件：离子源，电喷雾ESI，正离子5 500 V/负离子-4 500 V。

离子源温度：正离子600 ℃/负离子500 ℃；CUR，25；GS1，50；GS2，50；扫描方式，多反应监测MRM。

2 结果与讨论

（1）定性测定。样品中化合物色谱峰的保留时间与标准溶液的保留时间相比在允许偏差±2.5%之内；每种化合物的质谱定性离子必须出现，至少包括一个母离子和两个子离子，而且同一检测批次，对同一化合物，样品中目标化合物的两个子离子的相对丰度比与浓度相当的标准溶液相比，其允许偏差不超过规定的范围（相对丰度＞50%，允许±20%偏差；50%≥相对丰度＞20%，允许±25%偏差；20%≥相对丰度＞10%，允许±30%偏差；相对丰度≤10%，允许±50%偏差），则可判断样品中存在目标物质。如果不能确证，应重新进样，采用增加其他确证离子的方式或用其他灵敏度更高的分析仪器来确证。

（2）定量分析。本方法采用外标校准曲线法定量测定。

（3）平行试验。按以上步骤对同一试样进行平行测定。

（4）空白试验。除不称取试样外，均按上述步骤进行。

（5）加标回收。称取试样后，加入一定体积混合标准溶液，涡旋混匀，静置10 min，按上述操作步骤进行。所有物质的加标回收率在65%～100%。

（6）结果计算。按式（1）进行计算：