妊娠期糖尿病孕妇血清miR-126、sVCAM-1水平与糖脂代谢的相关性

王 青 寇 莉 李小林

湖北省黄石市第二医院(435002)

妊娠期糖尿病(GDM)血糖过高可导致妊娠期高血压等并发症[1]。病因尚不十分清楚，胰岛素抵抗和胰岛 β 细胞分泌降低被认为是GDM发病机制的重要环节[2]。2型糖尿病患者血浆miRNA表达异常升高，对糖尿病起到预警作用[3]，外周血miRNA表达稳定，对糖尿病诊治意义重大。sVCAM-1属免疫球蛋白家族,可调节细胞间相互作用[4]。高表达可促使单核细胞与血管内皮细胞黏附[5]，并与冠心病患者血脂异常存在一定关系[6]。推测miR-126、sVCAM-1 与GDM患者糖脂代谢可能有关。鉴于目前尚无GDM与miR-126、sVCAM-1关系的研究，本文研究了GDM患者外周血清miR-126、sVCAM -1的表达特点，及其与糖脂代谢关系，为临床诊治提供指导。

1 资料与方法

1.1 一般资料

GDM诊断：参照美国糖尿病学会标准妊娠中期糖筛查(50g)≥7.8mmol/L,OGTT1h≥10.0mmol/L/OGTT2h≥8.6mmol/L/OGTT3h≥7.8mmol/L；或糖筛查(50g)FPG≥11.1mmol/L且FPG≥5.8mmol/L[7]。纳入标准：妊娠≥16周；在本院规律产检；资料完整；知情同意本研究。排除妊娠期高血压、心脏病等妊娠合并症、不配合本研究、终止妊娠等。依据以上标准，选择2016年2月—2018年2月本院妇产科及中西医结合科门诊就医的GDM患者为观察组，并选择同期正常妊娠产检孕妇为对照组。

1.2 实验室检测

1.2.2生化指标两组孕妇均采集空腹静脉血离心取上清液，美国贝克曼DXI 800全自动化学发光免疫分析仪测定空腹血糖(FPG)和空腹胰岛素(FINS)，并采用稳态模型法计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)=(FPG×FINS)/22.5。全自动生化检测仪(美国雅培C 8000)检测TG、TC、apoA、apoB、HDL-C、LDL-C。酶联免疫法测定血清sVCAM-1。

1.2.3 miR-126血液标本提取淋巴细胞，常规处理提取，RNA沉淀物至干燥，紫外分光光度法鉴定RNA纯度和完整性。RT-PCR反应。2-ΔΔCt法计算miR-126相对表达量。引物设计软件Primer Premier 5.0，引物合成为金斯瑞生物科技有限公司。

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 一般临床资料

两组一般资料对比无差异(P>0.05)(表1)。

2.2 两组血脂代谢指标比较

观察组血清TG、LDL-C、apoA、apoB水平高于对照组，HDL-C低于对照组(均P<0.05)，TC水平两组对比无差异(P>0.05)，见表2。

表1 两组一般临床资料比较

表2 两组血脂代谢指标比较

2.3 两组血糖代谢及相关指标比较

观察组FPG、FINS、HOMA-IR、sVCAM-1均高于对照组，miR-126表达低于对照组(均P<0.05)，见表3。

表3 两组血糖代谢及相关指标比较

2.4 miR-126、sVCAM-1与血脂代谢相关性分析

miR-126与TG、LDL-C、FPG、FINS、HOMA-IR、apoA呈负相关(r=-0.328、-0.510、-0.324、-0.336、-0.616、-0.456、-0.315，P<0.05)，与HDL-C呈正相关(r=0.335，P<0.05)，与TC、apoB无关(r=-0.013、-0.015，P>0.05)。sVCAM-1与TG、FPG、HOMA-IR呈正相关(r=0.433、0.637、0.301，P<0.05)，与HDL-C呈负相关(r=-0.325，P<0.05)，与TC、LDL-C、FINS、apoA、apoB无关(r=0.040、0.158、0.012、0.008，P>0.05)。见表4。

2.5 影响miR-126、sVCAM-1的因素分析

分别以miR-126、sVCAM-1为因变量，以TG、TC、HDL-C、LDL-C、apoA、apoB、FPG、FINS、HOMA-IR等为自标量，校正混杂因素影响，逐步排除无关项目，最终TG、HOMA-IR是影响miR-126的独立因素，TG与sVCAM-1独立相关，见表4。

3 讨论

目前研究证明microRNA(MiRNA)直接或间接参与了糖尿病的发病机制，在胰岛细胞发育、糖脂代谢等中均发挥主要作用[8-9]。miRNAs具有高度保守和内源性，通过与靶基因3’非翻译区互补配对结合转录，调控蛋白编码基因的表达。现有研究显示，miRNA参与脂肪细胞分化、胰岛素分泌、糖脂代谢的调控过程，同时可能参与胰岛素抵抗的发生[10]。miR-126是内皮细胞特异性高表达miRNA[11]。在2型糖尿病不同阶段呈下降趋势[12]，但目前尚缺乏GDM患者miR-126变化特征的报道。

表4 影响miR-126、sVCAM-1的logistic回归分析

本研究GDM患者血清miR-126表达明显低于正常孕妇，说明miR-126可能参与GDM发病机制。分析与GDM糖脂代谢指标的相关性发现，miR-126与TG、LDL-C、FPG、FINS、HOMA-IR、apoA呈负相关，与HDL-C呈正相关，TG、HOMA-IR是影响miR-126的独立因素，说明miR-126可能参与了GDM患者糖脂代谢异常的进程，同时血脂、胰岛素抵抗状态影响了miR-126的表达。有研究发现[13-14]，在合并心血管病变的糖尿病患者中miR-126表达明显降低，可能与miR-126表达下降抑制了内皮型一氧化氮合酶而降低一氧化氮生物活性，或降低p65蛋白巯基亚硝基化作用激活核因子κB表达介导内皮损伤有关。黄婷等[15]研究显示糖尿病患者血浆miR-126表达明显降低，并且与胰岛及内皮功能有关，而TC水平是影响miR-126表达的独立因素，说明miR-126与糖脂代谢有关。

sVCAM-1是广泛分布于内皮细胞、单核细胞、中性粒细胞表面的免疫球蛋白,高度表达于内皮细胞，使细胞间产生黏附作用,并通过分泌各种活性物质,导致血管增生和动脉粥样硬化斑块的形成。长期高脂血症状态，尤其是低密度脂蛋白和胆固醇可损伤动脉内膜功能，刺激内皮细胞、单核细胞、淋巴细胞表面发生变化，刺激黏附因子表达上调，从而使内皮细胞与单核细胞的黏附作用增强，并介导一系列细胞内炎症反应[16]。刘海宁等[17]研究显示，不稳定型心绞痛患者血清sVCAM-1与血清内脏脂肪素呈正相关，说明血清sVCAM-1与不稳定型心绞痛患者血脂异常有关。但目前尚缺乏sVCAM-1在GDM中研究。本研究GDM患者血清sVCAM-1水平显著升高，且与TG、FPG、HOMA-IR呈正相关，与HDL-C呈负相关，同时TG是影响sVCAM-1水平的独立因素。提示sVCAM-1可能参与了GDM糖脂代谢异常的发生，而高血脂水平可能促进sVCAM-1水平升高。

综上，GDM患者血清miR-126表达下调，sVCAM-1水平升高，血清miR-126、sVCAM-1与GDM患者糖脂代谢相关，miR-126、sVCAM-1可能参与GDM患者糖脂代谢过程，同时血脂水平，胰岛素抵抗状态也影响miR-126与sVCAM-1水平。miR-126、sVCAM-1与糖脂代谢在GDM发病过程中可能存在协同调控作用，但机制尚不清楚，仍待进一步研究证实。