β-受体激动剂的危害及QuEChERS方法在其检测中的应用

□ 贺志乔 滨州市食品药品检验检测中心

食品安全问题是最基本的民生问题，日益得到人们关注和重视。我国作为畜产品的生产和消费大国，更应该提高畜产品的质量和安全性。而近年来，畜产品的兽药残留问题仍然突出，主要表现在抗生素类、β-肾上腺素能受体阻断剂等方面[1]。其中，β-受体激动剂又称“瘦肉精”，是一类具有肾上腺受体激动作用的药物，其在畜肉中的残留通过食物链进入人体，可引起慢性或急性中毒，严重影响消费者的身心健康[2]。本文将从β-受体激动剂的危害、检测方法及QuEChERS方法在前处理中的应用等方面作介绍。

1 β-受体激动剂的危害

β-受体激动剂是一类人工合成的药物，母体结构为苯乙胺醇[3]。农业部及食安办相关公告中列出的β-受体激动剂有10余种，常见的种类有克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、西马特罗、特布他林等。最初，此类药物在医学上被用作治疗心律失常、心绞痛、哮喘和支气管痉挛，其药理为松弛平滑肌。20世纪80年代，被发现在动物体内有促进脂肪的转化和分解，增加蛋白质的合成以提高瘦肉率的功效，进而作为兽药用于动物饲料中。但达到减少脂肪沉淀提高瘦肉率的效果，使用量需远远超过治疗剂量方可，因此导致“瘦肉精”的滥用和大剂量残留[2]。通过食物链进入人体的“瘦肉精”，易引起肌肉震颤、酸痛、心动过速、恶心、失眠等症状，有致染色体畸变、诱发肿瘤和致畸的可能性。过量摄入会引起急性中毒，甚至导致心脑血管系统疾病患者死亡[3][4]。

2 β-受体激动剂的检测方法

我国明令禁止在饲料和畜牧生产中使用β-受体激动剂类药物，在动物源性食品中，此类药物的限量为不得检出[5]。目前，常见的检测方法主要有色谱法、免疫分析法、生物传感技术、快速检测技术等[6]。其中，液相色谱-串联质谱法因其检测灵敏度高、准确度高、无假阳性、检出限低、无需衍生等特点，为检验检测部门常用的方法。如国家标准GB/T 22286-2008为液相色谱串联质谱法测定猪肝和猪肉中11种β-受体激动剂残留的方法，农业部1025号公告-18-2008为液相色谱-串联质谱法测定猪肝、猪肉、牛奶和鸡蛋中的9种β-受体激动剂残留的方法；其原理均为样品经酶解，酸调pH沉降蛋白后，用有机试剂提取，再经阳离子交换固相萃取柱净化；定量限均为 0.5 μg/kg[7][8]。

以上检测方法采用酶解、提取、固相萃取柱净化等步骤，存在操作过程繁琐，前处理时间长，使用试剂较多，成本昂贵，回收率不理想，需采用同位素内标或基质加标做标准校正曲线的方法来确保准确度和回收率等方面的缺点，使得检测工作耗时长，对操作人员要求较高。首先被应用于农药残留领域的QuEChERS方法，近年来也被改良并应用于兽药残留检测方法的前处理中，提高了兽药残留检测的效率。

3 QuEChERS方法在β-受体激动剂残留检测中的应用

QuEChERS方法以其快速（quick）、简单（easy）、便宜（cheap）、高效（effective）、耐用（rugged）、安全（safe）的特点，已被广泛应用于农药多残留检测的前处理方法中[9]。针对于兽药残留检测中β-受体激动剂复杂的前处理步骤，QuEChERS方法也日益得到研究和应用，见表1。

前处理方法中，肌肉或内脏组织中的β-受体激动剂需用β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶进行酶解，实验者多采用乙酸铵缓冲溶液作为酶解的溶液环境。基于样品基质不同，李婧妍等[10]采用0.1 mol/L的EDTA-Mcllvaine缓冲溶液对液态乳中的β-受体激动剂进行提取；对于虾肉中的莱克多巴胺和沙丁胺醇，卜明楠等[11]采用均质提取的办法使之成为游离态。提取试剂多使用乙腈或添加一定量的有机酸，因相较而言，乙腈可以更好地沉淀蛋白，且不易引入极性基质干扰物；加入一定的有机酸可优化目标物的分离度。

表1 QuEChERS方法在动物源性样品中β-受体激动剂残留检测的应用

常见的QuEChERS净化剂PSA、C18和NH2可以吸附基质中的脂肪酸、色素和糖类等，得到澄清干净的提取液。无水硫酸钠或硫酸镁起到吸水的作用，氯化钠起到盐析的作用，使水相和有机相分层，便于浓缩。曲斌等、李磊等[12]则采用新型QuEChERS净化剂，即EMR-Lipid对于动物组织样品进行净化。EMR-Lipid是一种除脂产品，能够选择性地去除样品萃取物中的主要脂类而不会造成目标物的损失。曲斌等对比了使用EMR-Lipid净化剂与MCX固相萃取柱两种方法的回收率，前者的加标回收率得到了提高。

4 结语

β-受体激动剂及其他兽药的使用，给消费者身心健康带来严重影响，兽药残留问题不容忽视。传统的检验检测方法步骤繁琐、成本高、耗时长，不能快速有效地得到可靠的结果。QuEChERS方法的快速、简便、高效等优点，使得检测过程中的前处理步骤得到简化，时间成本和人力成本得到降低。对于面临大量检测任务的食品检验机构来说，不失为好的选择。

[1]陈一资,胡滨.动物性食品中兽药残留的危害及其原因分析[J].食品与生物技术学报,2009(2):162-166.

[2]田晓静,陆会宁,刘丽霞.“瘦肉精”残留的危害与检测方法分析[J].Meat Industry,2011(6):34-36.

[3]曲斌,耿士伟,陆桂萍,等.新型QuEChERS方法结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肝中β-受体激动剂残留[J].食品安全质量检测学报,2015(12):4747-4754.

[4]姜光丽,何小琴,郗存显,等.QuEChERS/超高液相色谱-串联质谱法同时测定饲料中6种β-阻断剂类药物[J].中国饲料,2015(12):33-36.

[5]中华人民共和国农业部兽医局.中华人民共和国农业部公告第235号[Z].2008.

[6]刘超，郭又春.瘦肉精的检测方法及其监管措施[J].质量安全,2013,3:67-68.

[7] 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局,中国国家标准化管理委员会.动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法:GB/T 22286-2008[S].北京:中国标准出版社,2008.

[8]中华人民共和国农业部.动物源性食品中β-受体激动剂残留检测 液相色谱-串联质谱法:农业部1025号公告-18-2008[S].北京:中国标准出版社,2008.

[9]曲斌.QuEChERS在动物源性食品兽药残留检测中的研究进展[J].食品科学,2013(5):327-331.

[10]李婧妍,郭春峰,崔立辉,等.QuEChERS-HPLC-MS/MS法检测液态乳中9种β2-受体激动剂残留量[J].中国乳品工业,2016(11):49-52.

[11]卜明楠,石志红,康健,等.QuEChERS结合LC-MS/MS同时测定虾肉中72种兽药残留[J].分析测试学报,2012(5):552-558

[12]李磊,李海畅,高婧,等.QuEChERS EMR-Lipid-LC/MS/MS测 定8种β-受体激动剂[J].食品研究与开发,2016(9):178-182.