酸枣仁-丹参炮制品镇静催眠作用及对失眠小鼠脑电图的影响

尚丛珊，孟婷婷

（西安培华学院，陕西 西安 710125）

《中国药典》记载：酸枣仁多擅长于安神，有滋心、肝之阴血，为养心安神之要药[1]。酸枣仁与多种镇静催眠类药物有明显的协同作用，丹参有清心除烦，养血安神，除烦解郁而达安神定志。二者配对入药，可相辅同用，相辅相成，酸枣仁养心血敛心阴而治本，丹参补气活血，清心经之火而治标。本实验通过观察酸枣仁-丹参炮制品对戊巴比妥钠小鼠睡眠潜伏期和睡眠持续时间的影响，再辅助观察失眠小鼠睡眠各时相脑电图的变化，研究酸枣仁-丹参药对的镇静催眠作用及对失眠症的治疗效果。

1 材料和方法

1.1 试验动物

健康昆明种小鼠，二级合格动物，体重18～22 g，110只，由西安交通大学实验动物中心提供，喂养于本院动物房。

1.2 试验药物

酸枣仁、丹参炮制品均购自西安怡康医药连锁有限责任公司，经中药师鉴定均为正品药材。取等量酸枣仁和丹参适量，加10倍量水，提取1 h，重复一次，混合两次所得提取液，过滤并浓缩至2 g生药/mL备用。艾司唑仑片：济南永宁制药股份有限公司。地西泮片：山西昂生药业有限责任公司。

1.3 试剂

对氯苯丙氨酸（PCPA）：上海研生实业有限公司。戊巴比妥钠：上海化学试剂厂。

1.4 仪器

BL-420S生物机能试验系统：成都泰盟科技有限公司。小鼠脑立体定位仪：美国Stoelting公司。

1.5 方法

1.5.1 对小鼠的催眠作用

小鼠50只，雌雄各25只，适应性喂养3天后，随机分为5组：酸枣仁-丹参1.25 mL/kg、2.5 mL/kg、5 mL/kg剂量组；阳性对照组以地西泮溶于纯净水，按1.3 mg/kg剂量给药；空白对照组喂养等体积纯净水，给药30天，每天一次。各组动物末次给药1 h后腹腔注射戊巴比妥钠，剂量为50 mg/kg，观察记录各组小鼠的睡眠潜伏期（从戊巴比妥钠腹腔给药到翻正反射消失所需时间）和睡眠持续时间（从翻正反射消失到其恢复时间）。

1.5.2 失眠小鼠模型的建立及脑电图的观察

取雄性健康小鼠60只，适应性喂养3天，将小鼠麻醉后固定于脑立体定位仪，头部剪毛消毒去皮，暴露颅骨，剥离骨膜，然后颅骨上钻孔，于相应位置植入不锈钢螺丝钉与硬脑膜接触但不穿透，以此作为皮层电极记录脑电，四周敷上消炎粉即可缝合[2]。术后将小鼠置于特定容器内，单笼饲养，防止污染，并连续腹腔注射青霉素4万单位。恢复10d后，随机分为正常组、模型组、酸枣仁-丹参1 mL/kg、2 mL/kg、4 mL/kg剂量组、艾司唑仑片阳性对照组。对照组将艾司唑仑片溶于纯净水，按剂量0.15 mg/kg给药，正常组和模型组喂养等体积纯净水，给药30天，每天一次。末次给药后腹腔注射PCPA 350 mg/kg，每天一次，连续给药2天，小鼠昼夜节律消失，白天活动不停，表明造模成功。观察各组小鼠脑电图，将小鼠睡眠周期分为觉醒、慢波睡眠和快动眼睡眠三个时期，每个时期持续时间至少达20 s以上，连续观察小鼠脑电图9 h并记录。

2 结 果

2.1 酸枣仁-丹参对戊巴比妥钠小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间的影响

表明酸枣仁-丹参具有镇静催眠作用，且随着剂量增大，效果更显著。见表1。

表1 酸枣仁-丹参炮制品对戊巴比妥钠小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间的影响（±s）

表1 酸枣仁-丹参炮制品对戊巴比妥钠小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间的影响（±s）

组别 剂量（mL/kg） 睡眠潜伏期（min） 睡眠时间（min）空白对照组 8.5±3.78 113±23.72阳性对照组（地西泮） 1.3 mg/kg 4.7±3.12 163±32.82酸枣仁-丹参 1.25 mL/kg 6.0±2.34 140±22.93酸枣仁-丹参 2.5 mL/kg 5.6±3.51 147.2±25.26酸枣仁-丹参 5 mL/kg 5.3±2.46 151.0±29.37

2.2 酸枣仁-丹参对小鼠脑电图的影响

说明酸枣仁-丹参炮制品可有效改善失眠小鼠的睡眠状况，且效果随剂量增加而增强。见表2。

表2 酸枣仁-丹参对小鼠脑电图的影响（±s）

表2 酸枣仁-丹参对小鼠脑电图的影响（±s）

组别 剂量（mL/kg） 觉醒时间（min） 慢波睡眠时间（min） 快动眼睡眠时间（min）正常组 269.8±57.60 249.7±47.60 16.2±4.36模型组 367.8±52.30 158.9±53.20 6.9±3.86酸枣仁-丹参 1 mL/kg 320.9±44.75 213.1±45.05 8.6±4.72酸枣仁-丹参 2 mL/kg 304.6±63.43 223.5±62.80 9.1±3.43酸枣仁-丹参 4 mL/kg 284.5±50.50 236.7±51.25 9.7±3.14艾司唑仑片 0.15 mg/kg 280.5±43.8 232.5±46.3 13.4±4.87

3 讨 论

临床引起失眠的原因较多，如禀赋不足，心虚胆怯，情志失常，病后体虚及年迈等，致心神失养或心神不安，从而使正常睡眠受到影响，入睡困难、晨醒过早及（或）时常觉醒，甚至彻夜不寐。目前用于治疗失眠的药物多属处方药，不易购买，且对中枢神经系统有明显的不良反应，长期使用易产生耐药性，加重病情。

祖传中药具有调节人体脏腑气血的功能，可改善睡眠状况，且毒副作用较小[3]，而酸枣仁则是目前治疗失眠组方中出现频次最高的中药材，且遍布全国各地。多项研究也表明酸枣仁与多种镇静催眠药有明显的协同作用，关于酸枣仁药对治疗失眠的效果也有人报道过，如陈金锋、李宝莉等人曾研究酸枣仁-五味子药对、酸枣仁油栀子油的镇静催眠作用，结果均显示复方药效果好于单方药。丹参具有清心除烦，养血安神的功效，而关于酸枣仁-丹参的药对研究却鲜有报道。

脑电图能够客观真实的反应出机体睡眠状态的变化，由PCPA诱导的小鼠失眠模型简单易行，成功率高且可重复，是目前较为公认的失眠模型[4]。本试验将酸枣仁-丹参跑制品配伍入药，观察小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间的变化，借助观察失眠小鼠脑电图的变化，进一步证明酸枣仁-丹参具有镇静催眠的作用，并且能够改善失眠患者的睡眠状况，效果随着剂量的增加而增强，药效显著，值得推广。

[1]国家药典委员会.中国药典(一部)[S].北京:中国医药科技出版社:2010,343-44.

[2]翟旭峰,肖小春,娄勇军,李 柯,谢芳一,郑 兵.生酸枣仁及其炮制品镇静催眠作用及对失眠大鼠脑电图的影响[J].中药药理与临床:2015:31(6):94-97.

[3]姚瑞萍.酸枣仁汤加减治疗失眠48例观察[J].医学理论与实践:2016;29(8):1031-1032.

[4]陈金锋,高家荣,季文博,姜 辉.酸枣仁-五味子药对镇静催眠作用及机制研究[J].中药药理与临床:2013;29(4):128-130.